丁氏妇科补肾养血保胎方药效学实验结题汇报汇报内容研究目标及内容实施方案及技术路线研究结果研究结论预期考核指标完成考核指标情况经费使用情况一、研究目标及内容1.检测大鼠血清Th1型细胞因子IFN-γ,IL-2和Th2型细胞因子IL-4,IL-10,探讨丁氏妇科该补肾养血保胎方(以下简称保胎方)对大鼠免疫因子的影响。2.检测大鼠血清E2、P、β-HCG,探讨丁氏妇科补肾养血保胎方对大鼠内分泌的影响。3.检测大鼠血清PT、FBG,探讨丁氏妇科补肾养血保胎方对大鼠对凝血功能影响。4.检测大鼠在体子宫平滑肌收缩张力及频率,探讨丁氏妇科补肾养血保胎方对大鼠子宫肌的影响。二、实施方案及技术路线1.实验动物及分组已孕SD大鼠随机分6组,每组12只。A—补肾养血保胎方高剂量组,B—本方中剂量组,C—本方低剂量组,D—保胎灵对照组,E—肾虚流产组,F—空白对照组。2.羟基脲灌胃造模:3.给药方法:4.检测方法:th1/th2型细胞因子、P、E2、β-HCG、凝血功能——ELISA检测在体子宫宫缩实验——肌张力换能器胚胎数——观察5.统计学处理前期准备预初实验生理盐水(正常妊娠组)(F)本方高剂量组(A)本方中剂量组(B)本方低剂量组(C)(保胎灵组)(D)生理盐水(肾虚流产组)(E)各灌胃10天,第10天加灌胃米非司酮检测各项指标收集数据综合分析撰写发表论文在体子宫收缩记录胚胎数生殖内分泌、细胞免疫因子凝血功能ELISAELISA肌张力换能器观察三、研究结果(一)保胎方对各组大鼠一般情况的影响空白对照组:大鼠一般状态良好,反应灵活,毛色光滑,饮水进食增加,大便正常。模型对照组:从第2天开始出现拱背、蜷缩,以后且逐渐出现进食量减少、大便稍稀、被毛疏松。保胎方低剂量组:部分大鼠出现蜷缩少动、拱背、被毛疏松表现,出现时间较模型组晚,饮水量与进食量增加不明显。保胎方高、中剂量组及保胎灵组:大鼠有轻微少动、拱背、被毛疏松现象,饮水量与进食量情况较低剂量组多。三、研究结果(二)三、研究结果(三)空白组大鼠子宫增长,呈串珠样,胚胎为圆形,大小均匀,光洁、粉红色;余5组流产大鼠子宫不规则,胚胎瘀紫,模型组胚胎有明显瘀血痕迹和不全胚胎;未孕大鼠子宫外形短、细、淡粉红色。图1未孕大鼠子宫图2空白组大鼠子宫图3流产大鼠子宫三、研究结果(三)三、研究结果(四)三、研究结果(四)三、研究结果(五)三、研究结果(六)三、研究结果(七)四、结论1.丁氏妇科补肾养血保胎方能改善羟基脲所致肾虚流产大鼠模型一般情况、提高体重及子宫卵巢重量、减轻对胚胎与子宫损伤的作用;2.可通过降低Th1细胞因子浓度,提高Th2细胞因子浓度,调整Th2/Th1的比值偏向Th2,改善母体对胚胎的免疫排斥作用;3.可通过延长PT、降低Fbg含量,降低血粘度发挥安胎作用;4.可通过提高血清E2、P、β-HCG的浓度,支持胚胎生长、发育,同时减少子宫平滑肌收缩的频率、张力,抑制子宫平滑肌异常收缩而有助于胚胎在宫腔内继续发育、提高妊娠率。通过本实验以探讨该类疾病发病的实质,揭示补肾养血保胎方的保胎机制,为该方的临床运用提供理论和实验依据,符合中医药新药的研究思路,能为丁氏妇科经验方的推广应用和新药的研究奠定一定基础。五、预期考核指标1.学术论文:发表论文2篇(在国内核心及省级刊物上各1篇)。2.科技报告:完成科技报告1份。六、完成考核指标情况1.学术论文:撰写论文3篇,在省级刊物上发表论文1篇,两篇在出版中。2.科技报告:完成科技报告1份。七、经费使用情况丁氏妇科补肾养血保胎方是名中医丁丽仙教授数十年的临床经验方,通过临床运用观察有良好的临床疗效,目前已完成预实验,发现该方从多角度有治疗先兆流产的作用。谢谢各位专家指导!