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第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析第一节莨菪烷类药物的结构与性质莨菪烷衍生的氨基醇和不同有机酸缩合成酯，常见的有硫酸阿托品、氢溴酸东莨菪碱NOCH3OHOHHOCH3ON,H2SO4,H2O2OHO,HBr,3H2O硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱主要理化性质1.水解性本类药物分子结构中具有酯的结构，易水解。以阿托品为例，水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。2.碱性阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有叔胺氮原子,具有较强的碱性,易与酸成盐。如阿托品的pKb1为4.35。3.旋光性氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋体，阿托品结构中虽然有不对称碳原子，但因外消旋化而为消旋，无旋光性。一、托烷生物碱类Vitaili鉴别反应第二节、鉴别试验生物碱水解莨菪酸发烟硝酸三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固体KOH有色的醌型产物二、氧化反应本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：HOOCOHHOOC-H2O(H2SO4)CH2CHO2O2+2CO2+H2O三、沉淀反应本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。如：阿托品+碘化铋钾试液橙红到棕红色沉淀东莨菪碱+硅钨酸试液白色沉淀四、硫酸盐与溴化物反应硫酸阿托品+氯化钡白色沉淀（不溶于盐酸或硝酸）硫酸阿托品+醋酸铅白色沉淀（溶于醋酸氨或氢氧化钠溶液）氢溴酸东莨菪碱+硝酸银黄色凝乳沉淀氨试液中微溶，硝酸中几乎不溶。加氯试液，再加氯仿，氯仿层显黄色或红棕色五、光谱鉴别法紫外光谱法或红外光谱法六、色谱法高效液相色谱法或薄层色谱法，对照品对照。薄层固定相需碱化，HPLC法流动相多离子对法。第三节、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查1.酸度2.易氧化物3.其他生物碱二、硫酸阿托品中有关物质的检查第四节、含量测定一、酸性染料比色法原理:在适当pH溶液中,有机碱（B）可以与氢离子成盐,酸性染料（HIn）可解离成阴离子,阴离子可与有机碱盐阳离子定量地结合成有色离子对，而进入到有机相。通过测定有机溶剂提取液的吸收度；或将有机溶剂提取液酸化或碱化，使与有机碱结合的酸性染料释放出来，测定染料的吸收度来测得有机碱的含量。有机相·(BH+In-)水相·(BH+In-)+HInH+In-+BH+BH+主要条件1、水相最佳pH的选择要求：能使有机碱全部以盐的形式存在，酸性染料能够解离成离子，以便它们定量地结合成离子对而转溶于有机相，且又能将剩余的染料完全保留在水相。B+H+BH+HInH++In－H+OH－OH－H+pH（碱性）In-，BH+BH+In-，有机溶剂提取的是B2、酸性染料的选择要求：常用酸性染料有溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚绿等。酸性染料浓度，对测定影响不大，有足够量即可。（1）能与有机碱定量的结合（2）生成的络合物（离子对）在有机相中溶解度大（3）染料自身在有机溶剂中不溶或很少溶解（4）在最大波长处有较高的吸收度。(3)有机溶剂的选择：有机碱药物应对离子对提取率高，不与水混溶，或能与离子对形成氢键的有机溶剂。常用的有机溶剂有氯仿和二氯甲烷。(4)水分的影响：严防水分混入有机溶剂中，水相中有色酸性染料，而影响测定结果；水分的混入使氯仿混浊，而影响比色测定。一般加入脱水剂，或滤纸过滤的方法，除去混入的水分。（5）酸性染料中的有色杂质：将缓冲液与酸性染料的混合液先用有机溶剂萃取弃去。二、非水溶液滴定法硫酸盐在冰醋酸中可用高氯酸直接滴定，但只能滴定至硫酸氢盐，(BH+)2·SO4＋HClO4≒BH+ClO4-+BH+HSO4-反应摩尔比为1:1三、高效液相色谱法：加扫尾剂法：以十八烷基硅烷（ODS）键合的硅胶为固定相，在流动相中加入扫尾剂，以抑制或掩蔽固定相表面的游离硅醇基的活性。最常用的扫尾剂是三乙胺（TEA）。离子对HPLC法基本原理：在流动相总加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，两者形成中性离子对化合物，增加了被测样品组分在固定相中的溶解度，使被测组分的分配系数增大，达到样品组分分离测定的目的。反相离子对色谱：分析酸类或带负电荷的药物时，常用季胺盐如四丁基铵作离子对试剂，分析碱类或带正电荷的药物时，常用磺酸盐类如庚烷磺酸盐和烷基硫酸盐类如十二烷基硫酸盐等。反相离子对高效液相色谱法离子对的浓度：是控制反相离子对色谱溶质保留值的主要因素，通常对离子的浓度为310mmol/L。流动相pH的选择：调解流动相的pH值可在较大范围内，改变弱酸或弱碱样品的保留值和分离选择性。影响离子对形成的因素：反离子种类、浓度、流动相的组成、pH及离子强度离子对HPLC法测定氢溴酸东莨菪碱注射液的含量和降解产物的测定色谱条件色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C18(150mm×4.6mm,5μm)；流动相：0.004%磷酸溶液(pH3.0)-乙腈(50∶50)配制的8mmol·L-1十二烷基硫酸钠溶液；流速：1.0mL·min-1；检测波长：210nm；进样量：10μL。氢溴酸东莨菪碱分离色谱图2.氢溴酸东莨菪碱;3.硫酸阿托品