搜索
实验二微型动物的计数一、目的显微镜观察活性污泥样品中微型动物的种类、数量及状态。二、实验器材1．活性污泥法曝气池混合液。2．显微镜、小量筒、滴管等。3．计数板如果没有微型动物计数的计数板(微型动物，即使是原生动物，也比细菌大得多，—般的细菌或血球计数板都不适用)，则可按照上海织袜四厂和上海师范大学生物系所介绍的微型动物计数板制作方法制备如下：采用厚质玻璃割成9cm长，4cm宽的长方块，玻璃厚度以0.3一0.4cm为宜。利用氢氟酸腐蚀法，使玻板中央刻上10×l0＝100个小方格，小方格的大小没有严格规定，只要一片大号盖玻片能盖满格子有余和便于在显微镜下计数就可以了。用大号盖玻片切成宽约0.7cm的玻条，用阿拉伯树胶粘在计数用的小方格的四周，使呈一圈凸起的边框。这样，就制成了一块微型动物计数板，如图8—5所示。关于氢氟酸腐蚀法划方格的方法是先将玻璃表面涂一层薄面均匀的石蜡，然后用尖针在石蜡层上刻出所要求的方格，再以氢氟酸蒸汽进行重蒸。三、计数方法及步骤1．将活性污泥法曝气池混合液轻轻搅拌均匀；如混合液较浓，则可稀释成1：1的液体(稀释方法：取l0mL量筒一个，加混合液5mL再加蒸馏水5mL，轻轻搅拌均匀，即成1：1稀释液)。2．取洗净的滴管一支(滴管每滴水的体积应预先标定，一般每一滴水的体积约为l／20mL)，吸取摇匀的混合液或己稀释的混合液加一滴到计数板的中央方格内，然后加上一块洁净的大号盖玻片，使玻片的四周正好搁在计数板四周凸起的边框上，侧视如图8—6所示。3．用低倍显微镜进行计数注意所滴加的液体不一定布满整个l00格小方格，在显微镜下计数时只要把充有液体的小方格，挨着次序一行行的计算即可。同时记录各种动物的活动能力、形态结构等。原生动物中有不少种类是群体，须将群体和群体上的个体分别计数。4．计算设在一滴水中测得钟虫30只，则每mL混合液中含有钟虫30×2×20＝1200只，如测得轮虫10只，则每毫升混合液含轮虫10×2×20＝400只(如滴管每一摘体积为1／20mL，所观察的液体是1：l稀释的曝气池混合液)。四、记录微型动物优势种（数量及状态）描述：其他种（种类、数量及状态）描述：注：(1)如无计数板，则可用下法进行计数：1)取洗净的滴管1支（其每一滴水的体积应预先标定）吸取混合均匀的曝气池混合液或已稀释的混合液，滴1滴在载玻片的中央，以盖玻片（以方形为好）轻轻盖上水滴，要避免盖玻片内形成气泡。2)将际本放在显微镜低倍镜下计数。计数时，先将视野放在盖玻片的右上角(可根据各人的习惯，也可放在另一用)，然后移动玻片，视野即可随之从上而下、从左而右通过。当前一个视野数完，并做好记录后，再换第二个视野，如此住复将整个盖玻片下面的动物全部计数完毕。注意在调换视野时，不可使相邦的视野重叠或遗漏。然后换算成1mL混合液中的动物数。3)生物滤池和生物转盘上的生物膜形成胶状，浓度大，一般都必须稀释后计数，其适当的稀释比可在实践中摸索。4)上述计数方法仅适用于原生动物和轮虫，对个体较大的微型动物和线虫等，则须加大计数容量，以免造成误差。(2)为了避免微生物游动而影响计数，可用接种环加一环氯化汞（HgCl2）饱和溶液以杀死微生物。五、思考题怎样通过了解微型动物种类或数量变化来反映废水处理情况？