浙大药物分析复习要点

药物分析——复习要点（1-3章）2012/12/81药物分析第1-3章复习要点2012/12/82第1章药物分析基础知识与药品标准1.药物分析的基本任务任务内容常规检验1.成品的检验2.生产过程的质量控制3.贮藏过程的质量考察新药质量研究1.新药质量标准研究与制订2.新药体内过程研究3.配合其他学科在工艺优化、处方筛选等研究中的质量跟踪临床应用的合理性评估•开展治疗药物监测；临床药代动力学和药物相互作用研究药物分析第1-3章复习要点2012/12/832.药典特性——法定性、科学性、时代性组成——凡例、正文、附录、索引正文组成——性状、鉴别、检查、含量测定药典缩写药典名称缩写现行版中国药典Ch.P.2010年版美国药典USP34版(2011年)英国药典BP2011年版日本药局方JP第十六改正版(2011)欧洲药典Ph.Eur第七版（2011）药物分析第1-3章复习要点2012/12/843.药品检验工作的基本程序取样——均匀、合理（科学、真实和代表性）检验——鉴别、检查、含量测定鉴别——判断真伪，用一组鉴别试验检查——包括杂质检查（限度试验）、有效性、均一性和安全性试验四个方面含量（效价）——测定有效成分原始记录——完整、真实、具体，字迹清晰，不得任意涂改报告——依据准确，数据无误，结论明确，文字简洁，书写清晰，格式规范药物分析第1-3章复习要点2012/12/854.药物分析数据处理与方法评价误差定义、分类、来源、特点系统误差——包括方法、试剂、仪器、操作误差,有固定的方向(正或负)和大小,重复测定时重复出现偶然误差——大小、正负不固定,大误差出现概率小，小误差出现概率大，正、负误差出现概率大致相等偏差定义、表示方法（SD、RSD）降低误差的方法——对照试验、空白试验等方法有效数字——表示方法、修约规则与运算法则药物分析第1-3章复习要点2012/12/86药品分析方法的验证1.准确度——回收率表示（定量）2.精密度——重复性、中间精密度、重现性（定量）3.专属性——鉴别、检查、含量测定均应考察4.检测限——目视法，信噪比法（S/N=2:1或3:1）5.定量限——信噪比法（S/N=10:1），准确性和精密符合要求（杂质定量）6.线性——回归方程、相关系数（定量）7.范围——根据测定要求而定（定量）8.耐用性——鉴别、检查、含量测定均应考察药物分析第1-3章复习要点2012/12/875.药品质量管理规范名称缩写药品非临床研究质量管理规范GLP药品临床试验质量管理规范GCP药品生产质量管理规范GMP药品经营质量管理规范GSP中药材生产质量管理规范（试行）GAP标准操作规程SOP分析质量控制AQC人用药品注册技术要求国际协调会ICH药物分析第1-3章复习要点2012/12/88第2章药物的鉴别试验药物的性状——外观、溶解度、晶型、物理常数（熔点、比旋度、吸收系数）化学鉴别法(注意药物结构的差异和实验现象的区别)三氯化铁反应——含酚羟基结构药物（水杨酸及其酯类、苯甲酸类的区别）重氮化-偶合反应——芳伯氨基或潜在芳伯氨基药物（盐酸丁卡因区别）硝酸银反应与重金属离子的沉淀反应（巴比妥、磺胺等）荧光反应——奎宁、苯并二氮杂卓类、四环素类、维生素B1（硫色素反应）药物分析第1-3章复习要点2012/12/89光谱/色谱鉴别法紫外光谱——λmax,λmin,E1%1cm，A1/A2，化学处理后测定红外光谱——溴化钾压片法，标准图谱对照法，官能团特征峰（羰基、羟基、炔基、氨基等）其他——近红外、核磁共振、原子吸收、X射线粉末衍射TLC，HPLC，GC，质谱法——与对照品比照Rf、tR值药物分析第1-3章复习要点2012/12/810第3章药物的杂质检查杂质来源：生产过程和贮存过程杂质分类按来源：一般杂质和特殊杂质按结构：无机杂质、有机杂质、残留溶剂按性质：信号杂质和有害杂质杂质限量计算杂质限量（L）=C·V/S×100%药物分析第1-3章复习要点2012/12/811一般杂质的检查方法杂质原理条件适宜浓度标准液浓度ClCl﹣+Ag﹢→AgCl↓(白)稀硝酸50～80µg10µgCl/mlSO4SO42﹣+Ba2+→BaSO4白↓稀盐酸100～500µg100µgSO4/ml铁Fe3++6SCNˉ→[Fe(SCN)6]3ˉ(红)盐酸10～50µg10µgFe/ml重金属Pb2++S2ˉ→PbS↓（黄～黑）混悬液pH3.0～3.510～20µg10µgPb/ml砷盐AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑AsH3+2HgBr2→砷斑盐酸2µg1µgAs/ml醋酸铅棉花,KI,SnCl2作用？溶液浑浊处理方法药物分析第1-3章复习要点2012/12/812一般杂质的检查方法（续）重金属定义、Ch.P.收载方法古蔡法和Ag(DDC)法检查砷盐的异同点有机溶剂残留量——GC法3种进样方法（顶空等温法，顶空程序升温法，溶液直接进样法）计算——内标法、外标法、标准溶液加入法干燥失重——定义、方法、恒重操作与计算炽灼残渣——炽灼温度、注意事项、恒重操作与计算药物分析第1-3章复习要点2012/12/813特殊杂质的检查方法TLC法——杂质对照品法、供试品溶液自身稀释对照法、对照药物法、不允许有杂质斑点HPLC——内标法、外标法、不加校正因子的主成分自身对照法、加校正因子的主成分自身对照法、峰面积归一化法、多种方法结合GC法——内标法、外标法、峰面积归一化法、标准溶液加入法毛细管电泳法、离子色谱法——外标法为主光谱法——紫外、红外（无效晶型）、原子吸收（金属杂质）、旋光（对映体杂质）比色、挥发性、臭味、溶解度比移值(Rf)的计算药物分析第1-3章复习要点药物分析——复习要点（4-10章）2012/12/81药物分析第4-10章复习要点2012/12/82第4章药物制剂分析制剂分析特点鉴别的专属性和灵敏度不同杂质检验项目不同制剂的常规检查和特殊检查含量测定方法、限度要求与表示方法不同药物分析第4-10章复习要点2012/12/832012/12/83含量计算方法——以“%”表示直接滴定法剩余滴定法样品%=×100%V×F×TW样品%=×100%(V0－V)×F×TWF——浓度校正因子（F=mol实/mol理）V——滴定剂体积（ml）T——滴定度（mg）W——样品取样量（mg）药物分析第4-10章复习要点2012/12/842012/12/84含量计算方法——以“标示量%”表示片剂注射剂含量计算方法——以单剂重量计算平均片重标示量标示量%=××100%V×F×TW=×平均单剂重V×F×TW每片/粒中的含有量1标示量标示量%=××100%V×F×TW药物分析第4-10章复习要点2012/12/85片剂与注射剂的分析片剂分析常规检查——重量差异、崩解时限特殊检查——含量均匀度、溶出度、释放度附加剂——糖类、硬脂酸镁类、滑石粉等注射剂分析注射剂分析——装量与装量差异、可见异物、无菌、热原、细菌内毒素、不溶性微粒、渗透压摩尔浓度附加剂——含硫抗氧剂、维生素C、注射用植物油药物分析第4-10章复习要点2012/12/86复方制剂与新技术制剂分析复方制剂选择专属方法不经分离直接测定——例复方氢氧化铝片（EDTA滴定法）经适当分离后分别测定——例复方甲苯咪唑片（非水滴定法、紫外光谱法）HPLC法同时测定各成分——例复方对乙酰氨基酚片新技术制剂——微囊、微球、脂质体、包合物、纳米粒药物分析第4-10章复习要点2012/12/87第5章容量法测定药物的含量容量分析特点——耐用、准确，原料药含量测定的首选方法；含量测定以滴定度法计算滴定度（T）——指每1ml规定浓度的滴定液（b）所相当的被测药物（a）的质量(mg)T=C滴定剂×a/b×M被测物分类——酸碱滴定、氧化还原滴定（碘量法、亚硝酸钠法、溴量法、溴酸钾法等）、非水溶液滴定法、沉淀滴定法、配位滴定法药物分析第4-10章复习要点2012/12/88酸碱滴定法滴定剂——盐酸、硫酸、氢氧化钠滴定液被测物——有机酸碱类药物或它们的盐类（阿司匹林、甲芬那酸、布洛芬、马来酸依那普利等）溶剂——水、中性乙醇滴定方法——直接滴定法、两步滴定法（阿司匹林片、氯贝丁酯）药物分析第4-10章复习要点2012/12/89氧化还原滴定法方法药物举例药物与滴定剂摩尔比碘量法维生素C1﹕1溴量法司可巴比妥钠1﹕1盐酸去氧肾上腺素1﹕3盐酸肼屈嗪1﹕2溴酸钾法异烟肼3﹕2碘酸钾法卡托普利6﹕1铈量法吩噻嗪类自身颜色变化指示终点亚硝酸钠法含芳伯氨基的药物永停法指示终点（1﹕1）酸度,加溴化钾,温度,速度药物分析第4-10章复习要点2012/12/810非水酸碱滴定法分类——非水碱量法（1法）、非水酸量法（2法）1法——冰醋酸溶剂，高氯酸滴定液，结晶紫指示剂，测定弱碱性物质及其盐类的分析方法影响因素——酸根（氢卤酸、硫酸、硝酸）、温度、其他（水分、挥发性）应用举例硫酸奎宁——与高氯酸的反应摩尔比为1﹕3硫酸阿托品——与高氯酸的反应摩尔比为1﹕1药物分析第4-10章复习要点2012/12/811基本原理——A＝lg（1/T）＝ECL仪器的校正和检定——波长校正、吸光度准确度检定、杂散光的检查、对溶剂的要求含量计算方法对照品比较法百分吸收系数法计算分光光度法（维生素A的三点校正法）第6章光谱法测定药物的含量C%=×C对×A样A对FW×100%A×FE1%×100×W1cmC%=×100%药物分析第4-10章复习要点2012/12/812第7章色谱法测定药物的含量高效液相常用色谱系统分类定义常用色谱系统NP-HPLC固定相极性＞流动相固定相：硅胶、氨基或氰基柱流动相：极性小的有机溶剂RP-HPLC流动相极性＞固定相固定相：C18柱和C8柱(pH2～8)流动相：甲醇-水或乙腈-水RP-ISC同上在流动相中添加少量弱酸、弱碱或缓冲溶液RP-IPC同上在流动相中添加离子对试剂药物分析第4-10章复习要点2012/12/813系统适用性要求理论板数（n）分离度（R）一般≥1.5重复性：重复进样峰面积的RSD应≤2.0％拖尾因子（T）应在0.95～1.05n=16（tR/W)2或n=5.54(tR/Wh/2)2WWttRRR21)(212+−=)(70.1)(22/,22/,112hhRRWWttR+−=或1h0.052dWT=药物分析第4-10章复习要点2012/12/8142012/12/814含量计算方法外标法内标法C样=×C对A样A对C样=f××C内A样A内f=A内×C对A对×C内平均单剂重标示量标示量%=C样×××100%FW测定液浓度药物分析第4-10章复习要点2012/12/815其他色谱方法气相色谱法——维生素E测定分子排阻色谱法——高分子杂质、分子量测定手性高效液相色谱——酮康唑外消旋体拆分毛细管电泳法——区带电泳、胶束电动毛细管色谱离子色谱法——亲水性阴、阳离子的测定GC-MSLC-MS——中药川楝子中川楝素的含量，千里光中特殊杂质阿多尼弗林碱的检测药物分析第4-10章复习要点2012/12/816第8章中药与天然药物的分析前处理方法——提取、分离纯化鉴别试验——性状、显微、理化（TLC）、指纹图、DNA分子标记杂质检查水分——烘干法，甲苯法，减压干燥法，GC法灰分——总灰分、酸不溶性灰分有害元素——原子吸收，电感耦合等离子体质谱法农药残留量——GC法其他——有关物质等含量测定——化学法、光谱法、色谱法（LC-MS）药物分析第4-10章复习要点2012/12/817第9章生物药物的分析鉴别理化法——化学法、光谱法、色谱法生化法——酶法、电泳法、肽图法、生物法——生物学法、血清学法杂质检查一般杂质特殊杂质——抗生素残留、外源性DNA残留等安全性检查——热原(家兔法)、细菌内毒素(鲎试剂法