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非常灵敏10-17mol/孔线性范围为3-5logsAlphaLISA——不需洗涤的ELISA向所有的洗涤步骤说BYEBYEBYEBYEBYEAlphaLISA技术原理AlphaLISA技术主要依赖于Alpha供体微珠和受体微珠的相互作用。当生物反应使供体微珠和受体微珠相互接近时,激光激发级联反应，从而产生极大放大的信号。具体来说，在680nm的激光照射下,供体微珠上的光敏剂将周围环境中的氧气转化为更为活跃的单体氧。单体氧扩散至受体微珠，产生一系列的化学发光反应，最后将能量传递到铕，发射波长为615nm。在生物分子不存在特异的互相作用时，单体氧无法扩散到受体微珠，则不会有信号的产生。单体氧分子在溶液中可扩散200nm，可检测非常大的生物分子。受体微珠上含有二甲噻吩衍生物，同单体氧反应，产生一系列化学发光反应，最后将能量转移到615nm。该反应的半衰期为0.3秒，可使用时间分辨的方法检测AlphaLISA技术的优势生物大分子和复杂互相作用的检测——供体和受体的距离可达200nmAlpha供体微珠和受体微珠在小于200nm的范围内都可被检测到，可以检测完整蛋白质、酶复合体、噬菌体等非常复杂的复合物和相互作用。而其它均相技术，例如时间分辨荧光（TR-FRET）、荧光偏振（FP），供体和受体之间的距离为10nm，仅限于小分子的检测。灵敏度高操作简单——该技术不需洗涤，灵敏度为10-17摩尔/孔AlphaLISA是目前灵敏度最高的检测技术，可达attomole（10-17）水平。而且，该实验无需洗涤，操作非常简便。背景低，抗淬灭能力强——时间分辨荧光的检测模式，可检测血清等复杂样品AlphaLISA长波长激发，短波长发射，不会有来自荧光的背景。其检测模式为时间分辨荧光，进一步降低了背景，确保结果的真实性。而且，AlphaLISA发射波长为615nm，非常尖锐，基本没有来自样品的淬灭干扰，是进行复杂样品检测的理想选择，如血清和血浆等。检测方式灵活多样——可进行多种形式的实验Alpha技术非常灵活，可进行多种形式的实验，包括竞争性实验、结合实验、解聚实验、检测实验等。可以使用直接检测的方式，也可以选择间接检测的方式。传统的ELISAAlphaLISA特异性高高灵敏度10-10摩尔/孔10-17摩尔/孔检测性质非均相：需要至少6个步骤洗涤均相：无需洗涤高通量96孔板96/384/1536/3456孔板均可抗体要求需要高亲和力抗体高/低亲和力抗体均可应用样品体积大，25-50µL小，5µL检测范围2个数量级3-5个数量级所需仪器标准微孔板读数议EnVisionAlpha或EnspireAlphaAlphaLISA与ELISA的比较AlphaLISA技术是无需洗涤的ELISA技术，与传统ELISA相比，具有不可比拟的优势。2长波长的激发光确保生物分子和实验成分的干扰非常少供体微珠含有高密度的光敏剂，每个微珠每秒可产生多达60000个单体氧分子，极大地扩增了信号，从而使检测灵敏度达到attomole水平AlphaLISA的检测:Alpha微孔板和读板仪AlphaLISA可以在PerkinElmer公司的EnSpireAlpha检测仪或EnVision多标记检测仪上进行检测，其装备了专用的激光用于激发光，并有适宜的温控体系。HTS模块的设计使检测器直接在样品上读数，进一步提高检测灵敏度。同时，PerkinElmer公司提供多种微孔板进行AlphaLISA技术的检测，包括OptiPlateTMAlphaPlateTMProxiPlateTM1/2AreaPlate或CulturPlateTM微孔板等，可达到最高的灵敏度和可靠性。微孔板:种类齐全，应用特异PerkinElmer提供以下的微孔板，全部经过验证，可进行Alpha技术的检测:1/2AreaPlates—相同的孔深，一半的面积，可减少50%的试剂容量。是专门为广大科研用户设计的，可有效节省样品、试剂和细胞。可用于AlphaScreen和AlphaLISA检测。仅提供96孔板的形式。AlphaPlate—浅灰色板可以减少交叉干扰，1536孔板可减少17倍。有384和1536孔板可供选择。专用于Alpha检测。OptiPlate—白色聚苯乙烯微孔提供了极佳的光反射和最高的能量利用率，并且背景较低，可用于荧光和化学发光检测。有24孔到1536孔的形式可供选择。可用于AlphaScreen和AlphaLISA检测。ProxiPlate—浅孔设计使试剂与探测器的距离更近，从而增强信号，而且大大减少试剂的用量。可用于AlphaScreen和AlphaLISA检测。有96和384孔板可供选择。CulturPlate—经过优化的专用于基于细胞的实验，无菌包装，可用于细胞培养。有24孔至1536孔板可供选择，可用于AlphaScreen和AlphaLISA检测。AlphaLISA作为科学研究的通用平台AlphaLISA是进行科学研究通用平台建设的良好选择。利用AlphaLISA，可以方便地实现低亲和力相互作用检测、可以灵敏地检测到低丰度的生物标志物、可以在短时间内建立起表观基因组学检测的平台......一般情况下，我们推荐选择亲和素标记的供体微珠，被检测的成分用生物素标记即可。受体微珠可以与一抗偶联，也可以利用物种特异性的二抗偶联的受体微珠或抗融合蛋白偶联的受体微珠。受体微珠也可以与特定的结合蛋白偶联。AlphaLISA整个偶联过程不需亲和柱纯化，只需要离心就可将偶联蛋白和未偶联蛋白分离。AlphaLISA免疫检测试剂盒PerkinElmer提供几十种无需洗涤的AlphaLISA免疫检测试剂盒，帮您实现复杂的或者丰度很低的Biomarker的检测，为您提供更灵敏更准确的检测方法，同时省时省资源—与繁复的洗涤步骤告别！每个AlphaLISA试剂盒包含以下5个组份：偶联有分析物抗体的AlphaLISA受体微珠亲和素包被的Alpha供体微珠生物素化的抗分析物抗体冻干的分析物AlphaLISA免疫检测缓冲液试剂盒可用于96，384或1536孔板试剂盒检测原理如下：1.Alpha供体微珠（蓝色）表面覆盖了亲和素，可以捕获生物素化的抗体。2.受体微珠（红色）偶联有抗分析物抗体。3.通过与分析物的结合，供体微珠和受体微珠相互接近。4.当受到680nm的激光激发时，Alpha供体微珠激发释放单体氧，单体氧扩散到附近的受体微珠，产生615nm的发射光。1/2AreaPlate3蛋白、多肽、抗体、寡核苷酸X-抗体，结合蛋白EnVision多标记检测仪EnSpireAlpha/AlphaPLUSAlphaLISAHIV-p24研究免疫检测试剂盒HIV-p24是1型人类免疫缺陷病毒衣壳的含有230aa的磷酸化蛋白，用于形成病毒的圆锥体核心，包入基因组RNA核衣壳复合体。P24是Gag多聚蛋白(aa132-133,aa363-364)的病毒蛋白酶裂解产物，多用于在急性HIV血清转化、新生儿感染和监测抗病毒药物治疗反应时的HIV检测，样品可以是血液、血清和其它体液。这个试剂盒用于定量测定缓冲液或细胞培养基中的HIV-p24。在AlphaLISA免疫检测缓冲液中检测：低检测限:525pg/mL动态范围:0.525-3,000ng/mL典型结果对数坐标线性坐标特异性未用AlphaLISAHIV-p24检测试剂盒进行过其它物质的检测。4AlphaLISA人TNFα研究免疫检测试剂盒肿瘤坏死因子α是一个多功能促炎细胞因子，主要由有核血细胞合成，是一个233aa的II型跨膜蛋白，由ADAM17在第76-77个氨基酸残基切开，形成一个可溶性同源三聚体复合物。TNFα参与脂类代谢，凝固和内皮功能，并且与癌症，感染和炎症（包括炎性肠病），缺血/再灌注损伤和心力衰竭以及胰岛素抗药性均有关系。这个试剂盒用于定量测定人类血清、血浆、缓冲液或细胞培养基中的TNFα。在AlphaLISA免疫检测缓冲液中检测：低检测限2.2pg/mL动态范围:2.2-30,000pg/mL在去除检测物的血清中检测:低检测限(LDL):3.6pg/mL动态范围:3.6-30,000pg/mL典型结果对数坐标线性坐标特异性AlphaLISA TNFα检测试剂盒检测过如下物质被测物交叉反应人TNFβ0%小鼠TNFα0%大鼠TNFα0%牛TNFα0%AlphaLISA人类淀粉样蛋白β1-40和淀粉样蛋白β1-42研究免疫检测试剂盒特异性AlphaLISA Amyloidβ1-40检测试剂盒检测过如下物质被测物交叉反应小鼠Amyloidβ1-4094%大鼠Amyloidβ1-4094%人Amyloidβ1-420%注：未对来源于牛、猪、狗、兔子、黑猩猩和猩猩的Amyloidβ1-40进行检测，但是其氨基酸序列与人Amyloidβ1-40序列相同。注：未对来源于牛、猪、狗、兔子、黑猩猩和猩猩的Amyloidβ1-42进行检测，但是其氨基酸序列与人Amyloidβ1-42序列相同。特异性AlphaLISA Amyloidβ1-42检测试剂盒检测过如下物质被测物交叉反应小鼠Amyloidβ1-42110%大鼠Amyloidβ1-42110%人Amyloidβ1-400.1%5。也可以检测其它物种中的amyloidβ1-40和amyloidβ1-42。在AlphaLISA免疫检测缓冲液中检测Amyloidβ1-40：低检测限：0.088ng/mL(88pg/mL)动态范围：0.088-100ng/mL在AlphaLISA免疫检测缓冲液中检测Amyloidβ1-42：低检测限：0.3ng/mL(300pg/mL)动态范围：0.3-300ng/mL典型结果对数坐标线性坐标淀粉样蛋白多肽来源于淀粉样蛋白的前体蛋白（APP）的裂解。APP在神经组织中表达，是一个I型跨膜蛋白，有一个695aa的剪接变体。β内分泌酶在aa671-672处裂解APP，然后继续在跨膜区aa713-714处裂解，得到Aβ40，如果在aa715-716处裂解则得到Aβ42（偶尔合成-39和43mers）。在生理环境下，这两种主要形式的比例Aβ40/Aβ42大约为10:1。现在很多人认为当这个比例上升到5:1时会导致肽类在细胞膜表面的聚集和蚀斑的形成，这些均与阿尔茨海默病有关。典型结果对数坐标线性坐标6AlphaLISA试剂盒订购信息Kits代谢类生物标志物AlphaLISAAdiponectinKit500assaypointsAL209C5,000assaypointsAL209FAlphaLISAhumanAdiponectin,lyophylized1µgAL209SAlphaLISAGrowthHormonekit500assaypointsAL214C5,000assaypointsAL214FAlphaLISAhumanGrowthHormone,lyophylized0.3µgAL214SAlphaLISAGLP-1(7-36amide)kit500assaypointsAL215C5,000assaypointsAL215FAlphaLISAhumanGLP-1(7-36amide),lyophylized0.1µgAL215SAlphaLISAinsulinimmunoassaykit500assaypointsAL203C5,000assaypointsAL204FAlphaLISAhumanInsulin,lyophylized0.01IUAL204SAlphaLISALeptinkit500assaypointsAL225C5,000assaypointsAL225FAlphaLISAhumanLeptin,lyophylized0.3µgAL225SAlphaLISAProlactin