竞争法ELISA结果处理实例

竞争法ELISA结果处理实例竞争法ELISA因为是反曲线，处理起来有一点点的技巧。现以以下一组数据为例，仔细的用EXCEL来处理结果。样本号样本样本样本样本样本样本标准品0样本样本样本样本样本样本标准品5样本样本样本样本样本样本标准品10样本样本样本样本样本样本标准品25样本样本样本样本样本样本标准品50样本样本样本样本样本样本标准品100样本样本样本样本样本样本样本样本样本样本样本样本OD值0.7830.8830.8630.8860.5820.9161.0170.7130.8150.8450.7970.5530.8160.6740.7660.9100.8330.8410.8090.6330.5090.7590.6330.7720.7800.8910.7310.3790.6120.7970.5660.8380.7990.8180.2720.7870.8370.8660.7750.8050.8170.1850.7340.8680.7750.8210.7960.8780.7520.7920.7810.6980.8220.654竞争法的特点就是浓度越高，OD值越低。如果直接作一个直钱，出来的就是反曲线了。0204060801001200.0000.2000.4000.6000.8001.0001.200这样很难得到一个理想的方程。那么我们可以给每个值取一个倒数。这个用EXCEL很简单对吧，定义一个，其他的一拉就可以完成。比如我想将A1上的OD值转算到A11上的倒数值。可以先选中A11，再点fx(插入函数)，点确定出现如下：A9的地方，输入1/A1（那意思是用1除以A1处的数据）点确定。于是A11处便是A1处的倒数，再选中A11，往下拉八格，停一下，再横拉。结果一下子就出来了。再点格式（O）下拉中选单元格（E），也可以直接按Ctrl+1(记得一定要选中目录数据，此步的目的是为了所取的倒数保留三位小数。实际也可以省掉此步。)现出如下选中数值，小数位数为3。于是1/OD结果如下1.2771.1331.1591.1291.7181.0920.9831.4031.2271.1831.2551.8081.2251.4841.3051.0991.2001.1891.2361.5801.9651.3181.5801.2951.2821.1221.3682.6391.6341.2551.7671.1931.2521.2223.6761.2711.1951.1551.2901.2421.2245.4051.3621.1521.2901.2181.2561.1391.3301.2631.2801.4331.2171.529再用这个1/OD为X轴，标准品浓度为Y轴，作一曲线。如下图，1/OD放左排，标准品浓度放右排，全部选中，再点插入（I），下拉菜单中点图表（H），出来图表向导，在标准类型的左边，选XY散点图：再点完成，如下图0.00020.00040.00060.00080.000100.000120.0000.0001.0002.0003.0004.0005.0006.000系列1接下来，用鼠标放在任一点上，点右键，再点击添加趋势线（R）。如果点右键出现的是另一些按键，请重新点击（鼠标放在任一点上是必需的）弹出如下图一共有六个曲线，可选四个，可以先选线性（L），再点选项。如下图：选中显示公式（E）和显示R平方值（R），默认是没选中的。选中后点确定。于是图表及方程如下：y=23.102x-30.523R2=0.9769-20.0000.00020.00040.00060.00080.000100.000120.0000123456系列1线性(系列1)我们看R平方值并不理想。大多数点并没落在线上。所以处理成直线并不合适。先将直线删掉。再回到添加趋势线（R）那一步。选中多项式。当然，也可以用对数试一下。接下来点左上的选项，选中显示公式（E）和显示R平方值（R），选中后点确定。出现如下图y=2.6409x2+6.1297x-9.8021R2=0.9986-20.0000.00020.00040.00060.00080.000100.000120.0000.0001.0002.0003.0004.0005.0006.000系列1多项式(系列1)如果没出选方程和R平方值，肯定是忘了选中显示公式（E）和显示R平方值（R）可以重做。我们再看这个表，R平方值比较理想。得到方程：y=2.6409x2+6.1297x-9.8021。X实际就是OD值的倒数。再代入公式就可以直接算出结果。（以A11处的数据记算到A21处）最终结果如下。2.3340.5270.8470.4818.5270.037-1.2223.9901.6951.1512.0469.9181.6765.1062.7010.1231.3621.2201.8106.47212.4342.8586.4722.5692.3970.4043.52524.7577.2652.0469.2711.2732.0061.63848.4292.2501.2910.7972.5041.8881.657100.4943.4510.7652.5041.5822.0670.6053.0192.1482.3764.4001.5635.745比较标准品计算值与实际值-1.2220.0005.1065.00012.43410.00024.75725.00048.42950.000100.494100.000有差别，但大体还是合上了。所以认为最终的计算是没有问题的。