NYT 4195.1-2022 农药登记环境影响试验生物试材培养 第1部分：蜜蜂

20221111发布－－20230301－－实施农药登记环境影响试验生物试材培养第1部分：蜜蜂17中华人民共和国农业行业标准备案号：XXXX-XXXXＩＣＳ65.050CCSB4195.1—2022Guidanceonthehousingandcareoforganismsusedforenvironmentalimpacttestofpesticideregistration—Part1:HoneybeeＮＹ／Ｔ中华人民共和国农业农村部发布NY/T４１９５􀆰１—２０２２前　　言本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定起草.NY/T４１９４«农药登记环境影响试验生物试材培养»分为８个部分:———第１部分:蜜蜂;———第２部分:日本鹌鹑;———第３部分:斑马鱼;———第４部分:家蚕;———第５部分:大型溞;———第６部分:近头状尖胞藻;———第７部分:浮萍;———第８部分:赤子爱胜蚓.本文件是NY/T４１９４«农药登记环境影响试验生物试材培养»的第１部分.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口.本文件起草单位:农业农村部农药检定所.本文件主要起草人:周欣欣、袁善奎、单炜力、赵学平、杨海荣、郭海坤、周艳明、张天竞、吕露、苍涛、周倩.ⅠNY/T４１９５􀆰１—２０２２农药登记环境影响试验生物试材培养第１部分:蜜蜂１　范围本文件规定了农药登记环境影响试验用蜜蜂的引入、验收和饲养管理等技术方法,以及记录与资料等要求.本文件适用于意大利蜜蜂(Apismelliferaligustica)的实验室饲养,其他品种的蜜蜂可参照使用.２　规范性引用文件本文件没有规范性引用文件.３　术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.３􀆰１蜂群　honeybeecolony蜜蜂自然生存繁衍和蜂场饲养管理的基本单位,由蜂王、雄蜂和工蜂组成的有机群体.３􀆰２蜂王　queen由王台(蜂王房)里的受精卵发育,是蜂群内唯一生殖器官发育完全的雌性蜂.其终身职责是负责产卵、维持蜂巢内合理水平的信息素浓度,组织控制蜂巢内的群体分工生活.３􀆰３工蜂　workerbee由工蜂房里的受精卵发育而成的雌性蜂,但生殖器发育不完全.根据职责可为筑巢蜂、保育蜂和采蜜蜂.３􀆰４雄蜂　drone由产自雄蜂房内的未受精卵发育而成的雄性蜂,其职责仅为与处女蜂王交尾.３􀆰５蜜蜂巢脾　honeybeecomb是蜂巢的组成部分,由蜜蜂筑造而成的双面布满巢房的蜡质结构.蜜蜂蜂巢通常由几片到几十片巢脾组成.人工养殖的蜂箱中,１个框为１个巢脾.按功能可分为粉脾、蜜脾和子脾.３􀆰６蜜蜂幼虫　honeybeelarva蜜蜂卵孵化后至变态化蛹前的虫态,蠕虫型,无足、体弯曲,由１３个环节组成,头部较小,未分化出胸部和腹部,三型蜂的幼虫期不同,蜂王约７d,工蜂约９d,雄蜂约９d.３􀆰７蛹　pupa蜜蜂老熟幼虫停止取食至成虫羽化前的一个发育阶段.化蛹时,幼虫结构解体,成虫结构形成,初次出现翅.三型蜂的蛹期持续时间不同,蜂王约６d,工蜂约９d,雄蜂１２d.３􀆰８插花子脾　shotbrood子脾上空巢房、蜂卵、不同龄期幼虫和蛹呈花杂排列的现象,主要由病虫害、营养不良或蜂王产卵能力１NY/T４１９５􀆰１—２０２２低下引起.４　引入与验收４􀆰１　蜂群引入应从专业养蜂场成箱引入蜂王产卵量高、工蜂采集能力强、营养状况良好的健康蜜蜂,并选择蜂群处于繁殖期、外界气温和蜜粉源条件较好时引入,南方宜在２月~４月或９月~１０月;北方宜在４月~５月.其他时间引入蜂群时,应确保蜂箱内食物充足.４􀆰２　蜂群验收４􀆰２􀆰１　形态检查意大利蜜蜂腹部细长,体表绒毛淡黄色,工蜂在第２~４腹节背板具棕黄色环带,黄色区域的大小和色泽深浅有很大变化,一般以２个黄环为最多,吻较长(６􀆰３mm~６􀆰６mm).蜂王的腹部多为黄色至暗棕色,尾部黑色,只有少数全部为黄色.工蜂体长１２mm~１５mm,雄蜂体长１５mm~１７mm,产卵蜂王的体长２０mm~２５mm.４􀆰２􀆰２　健康检查对所引入蜂群的健康状态进行检查,具体标准如下:———蜂王:腹大尾略尖,四翅六足健全,行动稳重;———工蜂:体色鲜艳、飞行敏捷、表现温顺;———蜂群应健康无病.５　饲养管理５􀆰１　饲养场所５􀆰１􀆰１　饲养场所分为室内和室外.气候适宜时,可将蜂箱置于室外通风阴凉处,如树阴、凉棚下.５􀆰１􀆰２　冬季时,可根据当地气候情况采取适当措施进行蜂箱内或蜂箱外保温.室外气候不适宜蜂群生存时,可将蜂群移入(温)室内.５􀆰１􀆰３　夏季时,采取遮阴、洒水等措施为蜂群生产和繁殖创造适宜的温、湿度条件,保持蜂群群势增长.同时,应毁掉自然王台,加强通风,防止自然分蜂.５􀆰１􀆰４　定期清除箱底死蜂、蜡渣、霉变物,保持箱体清洁.５􀆰２　蜜蜂饲喂５􀆰２􀆰１　室外饲养时,蜂群从自然界中自采自食、自产自繁,一般无须特殊饲喂;定期检查蜂箱,食物不足时,应补充饲喂花粉、糖浆等.５􀆰２􀆰２　室内饲养时,应定期进行人工饲喂,用饲喂器饲以优质糖浆、蜂蜜.在越冬后期及早春时节,宜补充饲喂花粉,保证食物充足.５􀆰２􀆰３　饲养场所应始终保持饮用水供应,设置喂水器并定期进行清洗.５􀆰３　健康检查５􀆰３􀆰１　箱外观察５􀆰３􀆰１􀆰１　观察频率每周至少观察２次(冬季可适当减少观察频率)蜂箱巢门及附近场地上蜜蜂的形态与行为.５􀆰３􀆰１􀆰２　观察内容５􀆰３􀆰１􀆰２􀆰１　蜜蜂形态有无异常;有无死蜂(包括幼虫尸体、死蛹)出现,如有,观察其有无瘦小、翅残、白垩状、腹部异常膨大等异常形态.５􀆰３􀆰１􀆰２􀆰２　蜜蜂飞行有无异常,有无急躁不安、无力爬行、下痢等异常表现.５􀆰３􀆰２　箱内观察５􀆰３􀆰２􀆰１　观察频率２NY/T４１９５􀆰１—２０２２试验期间每周进行１次箱内观察.５􀆰３􀆰２􀆰２　观察内容５􀆰３􀆰２􀆰２􀆰１　观察箱内蜜蜂有无异常形态或行为,蜂箱箱底有无死蜂、幼虫尸体及死蛹.５􀆰３􀆰２􀆰２􀆰２　提脾检查,观察蜜蜂身体上有无蜂螨.提出子脾(每箱蜂取子脾２张以上),观察卵、幼虫分布与发育情况,以及有无插花子脾、幼虫体色异常或死亡幼虫出现.５􀆰３􀆰２􀆰２􀆰３　观察封盖子脾表面有无蜂螨和穿孔;如有,则打开房盖挑出蜂蛹,查看蛹体及巢房内有无蜂螨.５􀆰３􀆰３　蜜蜂常见疾病、诊断与防治方法参考«蜜蜂医学概论».５􀆰３􀆰４　大量蜜蜂出现不明原因死亡时,应做好深埋、焚烧等无害化处理,必要时,应取样送至相关实验室检测,以查明原因.５􀆰４　人工分蜂５􀆰４􀆰１　当蜂群发展到足够的群势,巢内积累起大量青、幼年蜂,雄蜂开始大量出巢,且外界有充足蜜粉源、气候温暖时,可进行人工分蜂.５􀆰４􀆰２　分蜂方法可采用等分法和补强交尾群法.５􀆰４􀆰２􀆰１　采用等分法时,将原群里的子脾、蜜脾、粉脾和蜜蜂提一半到另一个空蜂箱中,蜂王留在原群或提到空蜂箱均可.过半天后,给无王群诱入一只新产卵王.２个蜂箱放置在原群蜂箱位置的两侧,并适时根据外勤蜂返巢情况调整蜂箱位置,使飞入２个蜂箱中的蜜蜂大致相等.５􀆰４􀆰２􀆰２　若已交尾的蜂王产卵性能良好,可采用补强交尾群法分蜂.每次从强群中提１张~２张带幼蜂的封盖子脾补给交尾群,等封盖子脾上的蜜蜂基本出房后,再从另一强群中提１张~２张带幼蜂的封盖子脾继续进行补充.采用此法,使蜂群较短时间内变强.５􀆰４􀆰３　新分群群势较弱.气温较低时,需加强保暖;气温较高时,需采取适当的降温措施.同时,确保巢内食物充足,并适当缩小巢门防止盗蜂.６　记录与资料对于每批次蜜蜂,实验室应保存完整的饲养记录,至少包括以下材料,见附录A:———引入与验收记录;———饲养记录;———健康检查记录;———环境条件监测记录;———预防和治疗用药情况(如有)等.３NY/T４１９５􀆰１—２０２２附　录　A(资料性)记录表格(示例)　蜜蜂引入与验收记录见表A􀆰１.蜜蜂饲养记录见表A􀆰２.蜜蜂健康检查记录见表A􀆰３.表A􀆰１　引入与验收记录引入日期:　　引入数量:　　品种确认:蜂王健康状态:工蜂健康状态:蜂群健康状态是否满足要求(检查记录按表A􀆰３填写):蜜蜂来源地:提供单位:运输方式:验收者/日期:实验室内批号:表A􀆰２　饲养记录批号:　放置场所:日期食物配制食物类型等级/批号用量/仪器编号加入清水量mL蜂箱号/喂食量温度℃相对湿度(％)饮用水添加mL操作者/日期蜂蜜糖浆花粉蜂蜜糖浆花粉　　备注(其他日常管理情况):表A􀆰３　健康检查记录批号:　　　　　　放置场所:检查日期/时间:蜂箱外蜜蜂行为:蜂箱外的蜜蜂形态:蜂箱号箱内蜜蜂形态与行为箱底有无死蜂/蜂幼虫子脾数空脾数　　卵、幼虫分布与发育情况是否正常有无蜂螨寄生４NY/T４１９５􀆰１—２０２２表A􀆰３(续)有无插花子现象有无其他异常症状健康检查结果　　疾病确诊结果(如有)疾病处理情况(如有)　　预防或处理用药情况(如有)检查人/日期　　５NY/T４１９５􀆰１—２０２２参　考　文　献[１]　周婷􀆰蜜蜂医学概论[M]􀆰北京:中国农业科学技术出版社,２０１４[２]　OECD(２００７)􀆰TestNo􀆰７５:Guidancedocumentonthehoneybee(ApismelliferaL􀆰)broodtestundersemiＧfieldconditions[３]　OECD(１９９８)􀆰TestNo􀆰２１３:Honeybees,AcuteOralToxicityTest[４]　OECD(１９９８)􀆰TestNo􀆰２１４:Honeybees,AcuteContactToxicityTest[５]　OECD(２０１７)􀆰TestNo􀆰２４５:HoneyBee(ApismelliferaL􀆰),ChronicOralToxicityTest(１０Ｇdayfeeding)６