SFT 0093-2021 血液中卡西酮等37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物的液相色谱-串联质谱

ICS07.140CCSC06SF中华人民共和国司法行政行业标准SF/T0093—2021血液中卡西酮等37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物的液相色谱-串联质谱检验方法Determinationof37syntheticcathinonesandtheirmetabolitesincludingcathinoneinbloodbyliquidchromatography-tandemmassspectrometry2021-11-17发布2021-11-17实施中华人民共和国司法部发布SF/T0093—2021I目次前言.................................................................................II1范围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语和定义.........................................................................14原理...............................................................................15试剂、仪器和材料...................................................................16操作方法...........................................................................27分析结果评价.......................................................................7附录A（资料性）血液中37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物的线性范围、线性方程、相关系数、检出限及定量限....................................................................9SF/T0093—2021II前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由司法鉴定科学研究院提出。本文件由司法部信息中心归口。本文件起草单位：司法鉴定科学研究院、河北医科大学。本文件主要起草人：施妍、向平、刘伟、沈保华、严慧、卓先义、沈敏、吴何坚、文迪。SF/T0093—20211血液中卡西酮等37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物的液相色谱-串联质谱检验方法1范围本文件描述了血液中37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检验方法，包括原理、试剂、仪器和材料、操作方法以及分析结果评价。本文件适用于血液中37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物的定性与定量分析，其它检材中卡西酮类新精神活性物质及其代谢物的定性及定量分析参照使用。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GA/T122毒物分析名词术语3术语和定义GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。4原理血液中的37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物，经有机溶剂提取后，用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行检测，经与平行操作的空白样品和添加样品比较，以保留时间、特征离子对和离子对丰度比进行定性分析；以定量离子对峰面积为依据，采用内标法进行定量分析。5试剂、仪器和材料试剂试验用水应为符合GB/T6682中规定的一级水，所用试剂和要求如下：a)甲醇：HPLC级；b)乙腈：HPLC级；c)乙酸乙酯：分析纯；d)50%甲酸溶液：优级纯；e)乙酸铵：色谱纯；f)pH9.2硼砂缓冲液；g)20mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸溶液：分别称取乙酸铵1.54g和50%甲酸溶液2mL置于1000mL容量瓶中，加水定容至刻度，pH值约为4；h)标准物质溶液：1)标准物质储备溶液：卡西酮,甲卡西酮,2-甲基甲卡西酮,4-甲基甲卡西酮，N-乙基卡西酮,1-苯基-2-甲氨基-1-丁酮,1-苯基-2-甲氨基-1-丁醇,N-乙基卡西酮麻黄碱代谢物,1-苯基-2-甲氨基-1-戊酮去甲麻黄碱代谢物,4-甲基麻黄碱,3,4-二甲基甲卡西酮去甲麻黄碱代谢物,4-甲氧基甲卡西酮去甲伪麻黄碱代谢物,4-氟甲卡西酮,3-氟甲卡西酮,3-氟甲卡西酮麻黄碱代谢物,1-苯基-2-甲氨基-1-戊酮,3,4-二甲基甲卡西酮,4-乙基甲卡SF/T0093—20212西酮,4-甲基乙卡西酮,4-甲基-N-乙基-去甲麻黄碱（4-MEC代谢物）,4-甲氧基甲卡西酮,1-苯基-2-(N-吡咯烷基)-1-丙酮,3,4-亚甲二氧基甲卡西酮,1-苯基-2-(N-吡咯烷基)-1-丁酮,2-二甲氨基-1-[3,4-(亚甲二氧基)苯基]-1-丙酮,2-甲氨基-1-[3,4-(亚甲二氧基)苯基]-1-丁酮,3,4-亚甲二氧基乙卡西酮,1-苯基-2-(N-吡咯烷基)-1-戊酮,1-（1,3-苯并二恶英-5-基）-2-（甲氨基）-1-戊酮,2-乙氨基-1-[3,4-(亚甲二氧基)苯基]-1-丁酮,1-(4-甲基苯基)-2-(N-吡咯烷基)-1-戊酮,1-[3,4-(亚甲二氧基)苯基]-2-(N-吡咯烷基)-1-丙酮,1-[3,4-(亚甲二氧基)苯基]-2-(N-吡咯烷基)-1-丁酮，1-（2,3-二氢苯并呋喃-5-基）-2-（吡咯烷-1-基）戊烷-1-酮,MDPBP),亚甲基二氧吡咯戊酮，1-萘基-2-(N-吡咯烷基)-1-戊酮,1-(4-氟苯基)-2-(N-吡咯烷基)-1-辛酮标准品溶液，质量浓度均为1mg/mL；置于冰箱中冷冻保存，有效期为12个月；2)标准物质工作溶液：试验中所用其它浓度的标准物质工作溶液均从符合5.1h)1)的标准物质储备溶液用甲醇稀释而得。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期3个月。i)内标溶液：1)内标储备溶液：100μg/mL甲卡西酮-d3,4-甲基甲卡西酮-d3,4-甲基麻黄碱-d3,3,4-亚甲二氧基甲卡西酮-d3,3,4-亚甲二氧基乙卡西酮-d5,1-苯基-2-(N-吡咯烷基)-1-戊酮-d8标准品溶液（或其他性质相近物），置于冰箱中冷冻保存，有效期12个月；2)内标工作溶液：试验中所用其它浓度的内标工作溶液均从符合5.1i)1)的内标储备溶液用甲醇稀释而得。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期3个月。仪器和材料仪器和材料包括：a)液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)；b)电子天平：分度值≤0.1mg；c)涡旋混合器；d)高速离心机；e)超声波清洗仪；f)离心管；g)微量移液器；h)微孔滤膜：0.22μm。6操作方法定性分析6.1.1样品前处理6.1.1.1案件样品取血液样品100µL于2mL离心管中，加入内标工作溶液10μL（100ng/mL甲卡西酮-d3或3,4-亚甲二氧基乙卡西酮-d5或4-甲基甲卡西酮-d3或3,4-亚甲二氧基甲卡西酮-d3或4-甲基麻黄碱-d3或1-苯基-2-(N-吡咯烷基)-1-戊酮-d8或其他性质相近物），混合10s，加入硼砂缓冲液（pH9.2）100μL，乙酸乙酯1mL，涡旋30s，13,000r/min离心5min。取上层有机相置于5mL离心管中，40℃下氮气或空气流吹干。加入20mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸溶液200μL复溶，取上清液过0.22μm微孔滤膜后直接供仪器分析。6.1.1.2空白样品取空白血液100µL，然后按照6.1.1.1的方法操作。6.1.1.3添加样品若案件样品中出现表2中可疑卡西酮类新精神活性物质，则取空白血液100µL，添加案件样品中出现的可疑卡西酮类新精神活性物质，然后按照6.1.1.1的方法操作。SF/T0093—202136.1.2仪器分析6.1.2.1仪器条件6.1.2.1.1液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下，应用时可根据不同品牌仪器的实际情况进行调整。a)色谱柱：AcquityTMUPLCHSST3（100mm×2.1mm×1.8μm）或其他等效柱；注：AcquityTMUPLCHSST3柱为美国waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本文件的使用者，并不是表示对该产品的认可。如果其它等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。b)流动相：流动相A为20mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸和5%乙腈），流动相B为乙腈；采用梯度洗脱，梯度洗脱程序见表1；c)流速：250L/min；d)柱温：室温；e)进样量：5µL。表1梯度洗脱程序时间min流动相A%流动相B%090101.0901010.0307010.1901012.090106.1.2.1.2质谱参考条件质谱参考条件如下，应用时可根据不同品牌仪器的实际情况进行调整。a)离子源：电喷雾电离-正离子模式(ESI+)；b)检测方式：多反应监测(MRM）；c)离子源电压(IS)：5500V；d)碰撞气(CAD)、气帘气(CUR)、雾化气(GS1)和辅助气(GS2)均为高纯氮气，使用前调节各气流流量以使质谱灵敏度达到检测要求；e)去簇电压(DP)和碰撞能量(CE)应优化至最佳灵敏度。在符合6.1.2.1.1和6.1.2.1.2规定的液相色谱和质谱参考条件下，37种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物和内标的定性离子对、定量离子对和保留时间见表2。表237种卡西酮类新精神活性物质及其代谢物、内标的质谱参数和保留时间中文名/CAS号英文名简称母离子m/z子离子m/z去簇电压V碰撞能量eV保留时间min卡西酮71031-15-7Cathinone-150.2116.9a44182.49131.84430甲卡西酮5650-44-2(右旋体)，112117-24-5(左旋体)Methcathinone-164.2130.9a62202.74145.962272-甲基甲卡西酮1246911-71-61-(2-Methylphenyl)-2-methylaminopropan-1-one2-MMC178.0160.4a56194.10145.456284-甲基甲卡西酮5650-44-24-Methylmethcathinonemephedrone178.0160.4a56194.23145.45628SF/T0093—20214表2（续）N-乙基卡西酮51553-17-4N-ethylcathinone-178.1160.3a75193.56132.175261-苯基-2-甲氨基-1-丁酮408332-79-61-Phenyl-2-methylaminobutan-1-onebuphedrone178.2132.1a80273.7091.180281-苯基-2-甲氨基-1-丁醇63991-28-6Buphedroneephedrinemetabolite-180.1162.1a60193.23133.26030N-乙基卡西酮麻黄碱代谢物63401-08-1N-ethylcathinoneephedrinemetabolite-180.1162.0a60213.29147.260291-苯基-2-甲氨基-1-戊酮去甲麻黄碱代谢物Pentedronenorephedrinemetabolite-180.1162.3a40143.8891.340354-甲基麻黄碱552-79-44