SFT 0094-2021 毛发中5F-MDMB-PICA等7种合成大麻素类新精神活性物质的液相色谱

ICS07.140CCSC06SF中华人民共和国司法行政行业标准SF/T0094—2021毛发中5F-MDMB-PICA等7种合成大麻素类新精神活性物质的液相色谱-串联质谱检验方法Determinationof7syntheticcannabinoidsincluding5F-MDMB-PICAinhairbyliquidchromatography-tandemmassspectrometry2021-11-17发布2021-11-17实施中华人民共和国司法部发布SF/T0094—2021I目次前言.................................................................................II1范围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语和定义.........................................................................14原理...............................................................................15试剂、仪器和材料...................................................................16操作方法...........................................................................27分析结果评价.......................................................................5附录A（资料性）毛发中7种合成大麻素类新精神活性物质的线性范围、线性方程、相关系数、检出限及定量限............................................................................7SF/T0094—2021II前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由司法鉴定科学研究院提出。本文件由司法部信息中心归口。本文件起草单位：司法鉴定科学研究院。本文件主要起草人：向平、施妍、刘伟、沈保华、严慧、卓先义、沈敏、吴何坚。SF/T0094—20211毛发中5F-MDMB-PICA等7种合成大麻素类新精神活性物质的液相色谱-串联质谱检验方法1范围本文件描述了毛发中5F-MDMB-PICA等7种合成大麻素类新精神活性物质的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检验方法，包括原理、试剂、仪器和材料、操作方法以及分析结果评价。本文件适用于毛发中5F-MDMB-PICA等7种合成大麻素类新精神活性物质的定性与定量分析，其它检材中5F-MDMB-PICA等7种合成大麻素类新精神活性物质的定性定量分析参照使用。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GA/T122毒物分析名词术语3术语和定义GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。4原理毛发样品经清洗和冷冻研磨后，以甲醇超声法提取，采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行检测，经与平行操作的空白样品和添加样品作对照，以保留时间、特征离子对和离子对丰度比进行定性分析；以定量离子对峰面积为依据，采用内标法进行定量分析。5试剂、仪器和材料试剂试验用水应为符合GB/T6682规定的一级水，所用试剂和要求如下：a)甲醇：HPLC级；b)乙腈：HPLC级；c)甲酸：≥98%，优级纯；d)乙酸铵：色谱纯；e)丙酮：分析纯；f)标准物质溶液：1)标准物质储备溶液：2-(1-(5-氟戊基)-1H-吲哚-3-甲酰氨基)-3，3-二甲基丁酸甲酯（5F-MDMB-PICA）、2-[1-(4-氟丁基)-1H-吲唑-3-甲酰氨基]-3，3-二甲基丁酸甲酯（4F-MDMB-BUTINACA）、1-(5-氟戊基)-N-(2-苯基丙-2-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺（5F-CUMYL-PINACA）、3，3-二甲基-2-[1-(4-戊烯-1-基)-1H-吲唑-3-甲酰氨基]丁酸丁酯（MDMB-4en-PINACA）、3，3-二甲基-2-[1-(5-氟戊基)吲唑-3-甲酰氨基]丁酸甲酯（5F-ADB）、3，3-二甲基-2-[1-(4-氟丁基)吲哚-3-甲酰氨基]丁酸甲酯（4F-MDMB-BICA）、1-(4-氰基丁基)-N-(2-苯基丙-2-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺（4CN-CUMYL-BUTINACA）对照品，加甲醇配制成质量浓度为1mg/mL的标准物质储备液，置于冰箱中冷冻保存，有效期为12个月；SF/T0094—202122)标准物质工作溶液：试验中所用其它浓度的标准物质工作溶液均从符合5.1f)1)的标准物质储备溶液用甲醇逐级稀释而得。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期3个月。g)内标溶液：1)内标储备溶液：1mg/mLN-(1-金刚烷基)-1-戊基吲唑-3-甲酰胺-d9(APINACA-d9)标准品溶液（或其它性质相近物），置于冰箱中冷冻保存，有效期12个月；2)内标工作溶液：试验中所用内标工作溶液从符合5.1g)1)的内标储备溶液用甲醇稀释而得，浓度为1ng/mL。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期3个月。仪器和材料仪器和材料包括：a)液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)；b)电子天平：分度值≤0.1mg；c)高速离心机；d)超声波清洗仪；e)离心管；f)冷冻研磨仪；g)微量移液器；h)微孔滤膜：0.22μm。6操作方法定性分析6.1.1样品前处理6.1.1.1案件样品毛发样品依次用适量的水和丙酮振荡洗涤两次，晾干后剪成约1mm段，称取毛发样品20mg于2mL研磨管中，加研磨珠适量，再加入内标工作溶液1mL，冷冻研磨，超声15min后，13,000r/min离心5min，取上清液，过0.22μm微孔滤膜，滤液直接供仪器分析。6.1.1.2空白样品取空白毛发样品20mg，按照6.1.1.1方法操作。6.1.1.3添加样品若案件样品中出现可疑合成大麻素类新精神活性物质，则取空白毛发20mg，添加案件样品中出现的可疑合成大麻素类新精神活性物质对照品，制得检出限浓度的添加样品，按照6.1.1.1方法操作。6.1.2仪器分析6.1.2.1仪器条件6.1.2.1.1液相色谱条件以下为液相色谱条件，可根据不同品牌仪器实际情况进行调整。a)色谱柱：AcquityTMUPLCHSST3（100mm×2.1mm×1.8μm）或其它等效柱；注：AcquityTMUPLCHSST3柱为美国waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本文件的使用者，并不是表示对该产品的认可。如果其它等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。b)流动相：流动相A为20mmol/L乙酸铵缓冲溶液（含0.1%甲酸和5%乙腈），流动相B为乙腈；采用梯度洗脱，洗脱程序见表1；c)流速：300L/min（或适宜流速）；d)柱温：室温；SF/T0094—20213e)进样量：5µL。表1梯度洗脱程序时间min流动相A%流动相B%050501505069010990109.150501050506.1.2.1.2质谱条件以下为质谱条件，可根据不同品牌仪器实际情况进行调整。a)离子源：电喷雾电离-正离子模式(ESI+)；b)检测方式：多反应监测(MRM）；c)离子源电压(IS)：5500V；d)碰撞气(CAD)、气帘气(CUR)、雾化气(GS1)、辅助气(GS2)均为高纯氮气，使用前调节各气流流量以使质谱灵敏度达到检测要求；e)去簇电压(DP)、碰撞能量(CE)应优化至最佳灵敏度。在符合6.1.2.1.1和6.1.2.1.2的液相色谱条件和质谱条件下，7种合成大麻素类新精神活性物质、内标的质谱参数和保留时间见表2。表27种合成大麻素类新精神活性物质、内标的质谱参数和保留时间中文名英文名简称母离子m/z子离子m/z去簇电压V碰撞能量ev保留时间min2-(1-(5-氟戊基)-1H-吲哚-3-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酸甲酯Methyl2-(1-(5-fluoropentyl)-1H-indole-3-carboxamido)-3,3-dimethylbutanoate5F-MDMB-PICA377.2232.2a50254.46144.050552-[1-(4-氟丁基)-1H-吲唑-3-甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酸甲酯Methyl2-(1-(4-fluorobutyl)-1H-indazole-3-carboxamido)-3,3-dimethylbutanoate4F-MDMB-BUTINACA364.1219a60344.7130460201-(5-氟戊基)-N-(2-苯基丙-2-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺1-(5-Fluoropentyl)-N-(2-phenylpropan-2-yl)-1H-indazole-3-carboxamide5F-CUMYL-PINACA368.2233.1a40255.38213.140403,3-二甲基-2-[1-(4-戊烯-1-基)-1H-吲唑-3-甲酰氨基]丁酸丁酯Methyl3,3-dimethyl-2-(1-(pent-4-en-1-yl)-1H-indazole-3-carboxamido)butanoateMDMB-4en-PINACA358.5213.1a45315.84298.245203,3-二甲基-2-[1-(5-氟戊基)吲唑-3-甲酰氨基]丁酸甲酯N-(1-Methoxy-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(5-fluoropentyl)-1H-indazole-3-carboxamide5F-ADB378.2233.1a70315.16145.07057SF/T0094—20214表2（续）3,3-二甲基-2-[1-(4-氟丁基)吲哚-3-甲酰氨基]丁酸甲酯Methyl2-({[1-(4-fluorobutyl)-1H-indol-3-yl]carbonyl}amino)-3,3-dimethylbutanoate4F-MDMB-BICA363.2218.2a52204.01144.252551-(4-氰基丁基)-N-(2-苯基丙-2-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺1-(4-Cyanobutyl)-N-(2-phenylpropan-2-yl)-1H-indazole-3-carboxamide4CN-CUMYL-BUTINACA361.2226.1a60284.12243.16017N-(1-金刚烷基)-1-戊基吲唑-3-甲酰胺-d9N-(1-Adamantyl)-1-pentyl-1H-indazole-3-carboxamide-d9APINACA-d9375.3135.0a50308.63107.15067a为定量离子对。6.1.2.2进样分别吸取案件样品、空白样品和添加样品提取液，按6.1.2.1条件进样分析。6.1.3记录记录案件样品、空白样品和添加样品中可疑色谱峰的保留时间、特征离子对和离子对丰度比。方法检出限参见附录A。6.1.4定性判断依据以保留时