SNT 1594-2019 出口茶叶及代用茶中噻嗪酮残留量的测定

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1594—20192019-12-27发布2020-07-01实施中华人民共和国海关总署发布ICS67.040CCSX04Determinationofbuprofezinresidueinteaandherbalteaforexport出口茶叶及代用茶中噻嗪酮残留量的测定ISN/T1594—2019前言本标准依据GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准代替SN/T1594—2005《进出口茶叶中噻嗪酮残留量检验方法气相色谱法》。本标准与SN/T1594—2005的主要差异如下：——修改标准名称；——扩大标准适用范围；——修改气相色谱法前处理及仪器条件；——增加液相色谱-质谱/质谱法。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国杭州海关。本标准主要起草人：朱晓雨，黄超群，崔晓美，楼成杰，吴娟，陈丽，蒋沁婷，方群。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：——SN/T1594—2005。1SN/T1594—2019出口茶叶及代用茶中噻嗪酮残留量的测定1范围本标准规定了出口茶叶及代用茶中噻嗪酮残留量测定的液相色谱-质谱/质谱和气相色谱检测方法。本标准适用于出口绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶、牛蒡茶、菊花茶、杜仲茶和麦茶中噻嗪酮残留量的测定。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法第一法液相色谱-质谱/质谱法3　方法提要试样中噻嗪酮经丙酮、水提取，用正己烷抽提，经弗罗里硅土柱净化后，液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。4　试剂和材料除特殊注明外，所用试剂均为色谱纯，所用水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1　丙酮。4.2　正己烷。4.3　无水乙醚。4.4　甲醇。4.5　氯化钠：分析纯。4.6　乙酸铵。4.7　甲酸。4.8　正己烷-乙醚（6+4，V/V）：取600mL正己烷和400mL无水乙醚混合均匀。4.9　乙酸铵-甲酸混合溶液：准确称取0.38g乙酸铵用水溶解，加入1.0mL甲酸，用水定容至1000mL。4.10　标准物质：噻嗪酮，C16H23N3OS，CAS登录号69327-76-0，纯度大于99.0%。4.11　标准储备液：准确称取适量标准物质（4.10），用甲醇溶解并定容，配制成溶液浓度为200μg/mL的标准储备液，于0℃~4℃储存，有效期6个月。4.12　标准中间液：准确移取标准储备液（4.11）0.50mL，用甲醇稀释并定容至10mL，配制成溶液浓度为10μg/mL的标准中间液。准确移取10μg/mL的标准中间液1.0mL，用甲醇稀释并定容至10mL，配制成溶液浓度为1.0μg/mL的标准中间液。2SN/T1594—20194.13　标准工作液：准确移取1.0μg/mL的标准中间液（4.12）1.0mL，用甲醇稀释并定容至50mL，配制成溶液浓度为20ng/mL的标准工作液。分别准确移取20ng/mL的标准工作液0.25mL、0.50mL、1.0mL、2.5mL和5.0mL，用甲醇稀释并定容至10mL，配制成溶液浓度为0.50ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL和10ng/mL的标准工作液，于0℃~4℃储存，有效期3个月。4.14　弗罗里硅土固相萃取柱：1g或相当者，使用前用5mL正己烷预洗。4.15　微孔滤膜：≤0.45μm，有机相。5　仪器和设备5.1　液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2　分析天平：感量0.0001g和0.01g。5.3　涡旋混合器。5.4　均质器。5.5　离心机：最大转速4000r/min。5.6　旋转蒸发仪。5.7　固相萃取仪。6　试样制备与保存6.1　试样制备取代表性样品约500g，用粉碎机粉碎并通过2.0mm圆孔筛，混匀，装入洁净的盛样容器中，密封并标明标记。6.2　试样保存试样于室温下保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7　测定步骤7.1　提取准确称取2g试样（精确至0.01g），置于50mL塑料离心管中，加入10mL水，浸泡2h，再加入20mL丙酮，在均质器中均质2min，加入4g氯化钠，再加入15mL正己烷，涡旋提取1min，以4000r/min离心5min，将上清液收集于浓缩瓶中，残渣再加入15mL正己烷，重复上述操作，合并提取液，在45℃以下水浴减压浓缩至近干，待净化。7.2　净化准确移取10mL正己烷溶解残渣。取1.0mL转移至弗罗里硅土固相萃取柱（4.14）内。再用10mL正己烷-乙醚混合溶液（4.8）洗脱，收集全部洗脱液，45℃以下水浴减压浓缩至干，加入2.0mL甲醇溶解定容，经滤膜过滤，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。7.3　测定7.3.1　液相色谱-质谱/质谱条件液相色谱-质谱/质谱条件如下：3SN/T1594—2019a）色谱柱：C18，100mm×2.1mm（内径），3.5μm，或相当者；b）流动相：乙酸铵-甲酸混合溶液（4.9）和甲醇，梯度洗脱程序见表1；表1　液相色谱-质谱/质谱法梯度洗脱程序时间/min乙酸铵-甲酸混合溶液/%甲醇/%0.0070303.0070304.00208011.00208012.00703015.0070307.3.2　定量测定按7.3.1仪器条件测定标准工作溶液和样液，以外标曲线法计算样液中的噻嗪酮含量。如果样液中噻嗪酮的含量超出标准曲线范围，应用甲醇稀释后再进行分析。在上述条件下，噻嗪酮的参考保留时间约为10.0min。标准溶液多反应监测色谱图参见附录B中图B.1。7.3.3　定性测定在上述液相色谱-质谱/质谱条件下，如果样液与标准工作液中待测物质色谱峰相对保留时间偏差在±2.5％范围内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许误差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在相应的被测物。表2相对离子丰度最大容许误差相对离子丰度（基峰）%＞50＞20~50＞10~20≤10最大容许误差%±20±25±30±507.4　空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。8　结果计算和表述用色谱数据处理机或按公式（1）计算试样中噻嗪酮的残留量：10001000cVXm××=×……………………………（1）式中：X──试样中噻嗪酮的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c──从标准曲线上得到的待测物质的溶液浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V──样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；4SN/T1594—2019m──最终样液所代表的试样质量，单位为克（g）；计算结果应扣除空白值。9　定量限和回收率9.1　定量限本方法对于绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶、牛蒡茶、菊花茶、杜仲茶和麦茶中噻嗪酮的定量限均为0.005mg/kg。9.2　回收率本方法的添加水平和回收率数据见表3。表3茶叶中噻嗪酮添加水平及回收率数据添加水平mg/kg回收率范围/%绿茶红茶普洱茶乌龙茶牛蒡茶菊花茶杜仲茶麦茶0.00584~10474~8692~10676~10286~10490~10486~9884~1060.0176~8973~9782~10886~10172~9282~10182~9770~980.0580~9492~10280~10484~11076~9488~10480~10888~1040.2091~10286~10788~9983~10590~10483~10384~9092~1073080~9674~9184~10085~9674~9276~9092~10477~98第二法气相色谱法10　方法提要试样中噻嗪酮经丙酮、水提取，用正己烷抽提，经弗罗里硅土柱净化后，用配有氮磷检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。11　试剂和材料除特殊注明外，所用试剂均为色谱纯，所用水为符合GB/T6682规定的一级水。11.1　丙酮。11.2　正己烷。11.3　无水乙醚。11.4　氯化钠：分析纯；11.5　正己烷-乙醚（7+3，V/V）：取700mL正己烷和300mL无水乙醚混合均匀。11.6　标准物质：噻嗪酮，C16H23N3OS，CAS登录号69327-76-0，纯度大于99.0%。11.7　标准储备液：准确称取适量标准物质（11.6），用正己烷溶解并定容，配制成溶液浓度为200μg/mL的标准储备液，于0~4℃储存，有效期6个月。11.8　标准中间液：准确移取标准储备液（11.7）0.50mL，用正己烷稀释并定容至10mL，配制成5SN/T1594—2019溶液浓度为10μg/mL的标准中间液。11.9　标准工作液：准确移取标准中间液（11.8）1.0mL，用正己烷稀释并定容至50mL，配制成溶液浓度为0.20μg/mL的标准工作液。分别准确移取0.20μg/mL的标准工作液0.50mL、1.0mL、2.5mL和5.0mL，用正己烷稀释并定容至10mL，配制成溶液浓度为0.010μg/mL、0.020μg/mL、0.050μg/mL和0.10μg/mL的标准工作液，于0℃~4℃储存，有效期3个月。11.10　弗罗里硅土固相萃取柱：5g或相当者，使用前用10mL正己烷预洗。12　仪器和设备除特殊注明外，所用仪器和设备同5.2~5.7。12.1　气相色谱仪：配有氮磷检测器。13　试样制备与保存试样制备与保存同6.1和6.2。14　测定步骤14.1　提取提取同7.1。14.2　净化用2mL正己烷溶解残渣，将溶液转移至弗罗里硅土柱（11.10）内，再用2mL正己烷洗涤残渣合并上柱。用20mL正己烷-乙醚混合溶液（11.5）洗脱，收集全部洗脱液，45℃以下水浴减压浓缩至干，加入2.0mL正己烷溶解，供气相色谱仪测定。14.3　测定14.3.1　气相色谱条件气相色谱条件如下：a）色谱柱：SPB-50，30m×0.25mm×0.25μm，或相当者；b）柱温：60℃保持1min，以15℃/min的速率升温至150℃，保持1min，随后以10℃/min的速率升温至280℃，保持15min；c）进样口温度：250℃；d）载气和尾吹气：氮气，纯度≥99.999%，流量3.0mL/min；尾吹气流量10mL/min；空气流量60mL/min；氢气流量3.0mL/min；e）进样量：2μL；f）进样方式：不分流进样；g）检测器温度：325℃；h）开阀时间：0.75min；i）检测器铷珠的电压和灵敏度应调整至最佳状态，为保护铷珠，进样5min内关闭检测器。6SN/T1594—201914.3.2　色谱测定按14.3.1仪器条件测定标准工作溶液和样液，以外标曲线法计算样液中的噻嗪酮含量。如果样液中噻嗪酮的含量超出标准曲线范围，应用正己烷稀释后再进行分析。在上述条件下，噻嗪酮的参考保留时间约为21.2min。标准溶液色谱图参见附录B中图B.2。14.4　空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。15　结果计算和表述同8。16　定量限和回收率16.1　定量限本方法对于绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶、牛蒡茶、菊花茶、杜仲茶和麦茶中噻嗪酮的定量限均为0.01mg/kg。16.2　回收率本方法的添加水平和回收率数据见表4。表4茶叶中噻嗪酮添加水平及回收率数据添加水平mg/kg回收率范围/%绿茶红茶普洱茶乌龙茶牛蒡茶菊花茶杜仲茶麦茶0.0172~9074~9381~10086~9786~9583~10183~10083~980.0586~9486~10484~9892~11080~10886~9888~10480~980.2090~10486~10190~10383~10682~10089~10792~10589~1063072~9189~9591~10385~9887~10177~9673~9687~977SN/T1594—20