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ICS67.020.01CCSB16中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5462—2022金钗石斛鉴定方法IdentificationofDendrobiumnobileLindl.2022-07-07发布2023-02-01实施中华人民共和国海关总署发布学兔兔—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国海口海关、中华人民共和国拱北海关、中华人民共和国重庆海关、中华人民共和国福州海关。本文件主要起草人:潘英文、刘福秀、张卫东、谢添伟、李佳潼、孙涛、于文涛、王安石、陈施明、韩松、林明光。ⅠSN/T5462—2022学兔兔条形码鉴定方法。本文件适用于金钗石斛的鉴定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1萼片sepal花的外轮花被片。注:包括1片中萼片(背萼片)和2片侧萼片。3.2萼囊mentum蕊柱足和着生于其两侧的两片侧萼片基部以及着生于其顶端的唇瓣基部组成的囊状部分。3.3花瓣petal内轮花被片中的左右两片。3.4唇瓣labellum内轮花被片中央的1片变态而成,常有鲜艳的色泽和复杂的结构。3.5蕊柱column雌雄蕊融合而成的柱状器官。4基本信息中文名:金钗石斛学名:DendrobiumnobileLindl.分类地位:被子植物Angiosperms,单子叶植物分支Monocots,天门冬目Asparagales,兰科Orchi-daceae,石斛属Dendrobium1SN/T5462—2022学兔兔。5方法原理金钗石斛的茎、叶、花等形态学特征作为其鉴定的主要依据,基于ITS序列特征的分子生物学鉴定作为形态学鉴定的辅助手段。6鉴定方法6.1形态学鉴定茎直立,肉质状肥厚,稍扁的圆柱形,长10cm~60cm,粗达1.3cm,上部多少回折状弯曲,基部明显收狭,不分枝,具多节;节间多少呈倒圆锥形,长2cm~4cm,干后金黄色。叶革质,长圆形,长6cm~11cm,宽1cm~3cm,先端钝并且不等侧2裂,基部具抱茎的鞘。总状花序从具叶或落了叶的老茎中部以上部分发出,长2cm~4cm,具1朵~4朵花;花序柄长5mm~15mm,基部被数枚筒状鞘;花苞片膜质,卵状披针形,长6mm~13mm,先端渐尖;花梗和子房淡紫色,长3mm~6mm;花大,白色带淡紫红色先端,有时全体淡紫红色或除唇盘上具1个紫红色斑块外,其余均为白色;中萼片长圆形,长2.5cm~3.5cm,宽1.0cm~1.4cm,先端钝,具5条脉;侧萼片相似于中萼片,先端锐尖,基部歪斜,具5条脉;萼囊圆锥形,长6mm;花瓣多少斜宽卵形,长2.5cm~3.5cm,宽1.8cm~2.5cm,先端钝,基部具短爪,全缘,具3条主脉和许多支脉;唇瓣宽卵形,长2.5cm~3.5cm,宽2.2cm~3.2cm,先端钝,基部两侧具紫红色条纹并且收狭为短爪,中部以下两侧围抱蕊柱,边缘具短的睫毛,两面密布短绒毛,唇盘中央具1个紫红色大斑块;蕊柱绿色,长5mm,基部稍扩大,具绿色的蕊柱足;药帽紫红色,圆锥形,密布细乳突,前端边缘具不整齐的尖齿。6.2分子生物学鉴定6.2.1DNA制备与PCR检测DNA制备与PCR检测按附录C执行。6.2.2测序与序列分析PCR扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,目的片段使用DNA产物纯化试剂盒纯化并测序。测序结果利用序列拼接软件进行拼接编辑,对比峰图,判断序列方向,去除测序引物序列。登录GenBank数据库BLAST鉴定系统(),通过比对查询相似度最高的物种。6.2.3金钗石斛ITS基因序列金钗石斛ITS基因序列GenBank登录号:MT940440.1。7结果判定样品茎、叶、花等形态学特征与6.1的描述相符,且样品ITS序列与GenBank数据库比对结果给出最大近似种金钗石斛且相似度大于99%,则判定为金钗石斛。2SN/T5462—2022学兔兔标本保存样本应注明来源、时间、地点及鉴定者等信息,保存期为1年,以备复验,如涉及贸易纠纷则应保存到纠纷解决完毕。保存期满后,按后期用途长久保存或处理。8.2原始数据保存样品检测结束后,其原始记录单和检验报告应归档,妥善保管,以备复验、谈判和仲裁。3SN/T5462—2022学兔兔(资料性)金钗石斛及其近似种分种检索表1a.萼片和花瓣淡黄色、奶黄色至金黄色,除唇瓣外决不带紫色或其他颜色。2a.茎上部常分枝;叶狭长圆形,宽不及7mm,先端2圆裂细叶石斛D.hancockiiRolfe………………2b.茎不分枝;叶宽1cm以上,先端锐尖、不裂。3a.花单生于叶腋,干后蜡质;唇瓣卵状菱形,无任何斑纹…罗河石斛D.lohohenseT.TangetF.T.Wang3b.花通常2朵至多朵组成总状花序或伞形花序,极罕为单花,干后不为蜡质。4a.伞形花序几乎无花序柄,每2朵~6朵花为一束;唇盘具2个紫红色斑块…束花石斛D.chrysanthumLindl.4b.总状花序。5a.茎上下一致的圆柱形,节和节间不肿胀。6a.花序出自落了叶的茎上。7a.花序轴长不及5cm黄花石斛D.dixanthumRchb.f.………………………………………………7b.花序轴长10cm以上。8a.唇瓣近圆形,凹陷成兜状,基部两侧各具1个淡紫褐色斑块杓唇石斛D.moschatum(Buch.-Ham.)Sw.……8b.唇瓣近圆形,不凹陷成兜状。9a.花序柄基部被覆着长5mm~20mm、套叠的大鞘;花苞片大,舟状,长1.8cm~3.0cm…………线叶石斛D.aurantiacumRchb.f.……………………………………………………………………9b.花序柄基部被覆着长3mm~10mm、套叠的小鞘;花苞片小,卵形,长约5mm。10a.唇瓣圆形,具1个横生的半月形的深紫色斑块,边缘其复流苏流苏石斛D.fimbriatumHook.…………10b.唇瓣近圆形,具2个栗色斑块,边缘稍啮蚀状曲轴石斛D.gibsoniiLindl.………………………5b.茎常在中部或中部以上的节间增粗,有时呈纺锤形或稍呈棒状。11a.花奶黄色或淡黄色;唇瓣卵状披针形,边缘不具流苏尖刀唇石斛D.heterocarpumLindl.………11b.花金黄色。12a.唇瓣近肾形,基部两侧具红色条纹,边缘无流苏短棒石斛D.capillipesRchb.f.………………12b.唇瓣边缘具流苏。13a.花瓣边缘密生长流苏;唇瓣近圆形,边缘具复式短流苏苏瓣石斛D.harveyanumRchb.f.……13b.花瓣边缘全缘;唇瓣卵状三角形,在边缘,尤其前端边缘具很长的流苏……………………………长苏石斛D.brymerianumRchb.f.…………………………………………………………………6b.花序出自带叶的茎中部或中部以上部分;花序柄与茎交成近垂直,花瓣全缘。14a.花序具2朵~7朵花;唇瓣金黄色,近肾状圆形,具2个紫色斑块金耳石斛D.hookerianumLindl.……14b.花序具1朵~2朵花;唇瓣金黄色,圆形,无紫色斑块疏花石斛D.henryiSchltr.………………1b.萼片和花瓣紫红色、天蓝色、白色或淡黄绿色,有时后来渐转变为淡黄色或乳黄色,先端常染有紫红色。15a.茎上的节或节间肿胀,至少在分枝上如此,有的呈串珠状。16a.茎细长,多分枝,节和节间肿胀而呈串珠状;叶生于分枝上部,宽不及5mm…串珠石斛D.falconeriHook.16b.茎通常粗壮,不分枝;叶宽5mm以上。17a.花序柄基部具长2cm~3cm的鞘;花白色,先端紫红色;唇瓣先端微凹,唇盘黄色并且有2个暗紫色斑块大苞鞘石斛D.wardianumWarner……………………………………………………………17b.花序柄基部具长3mm~6mm的鞘。18a.花苞片较小,卵形,长5mm~6mm;总状花序出自具叶的茎上端;花白色带紫红色先端;唇盘中部4SN/T5462—2022学兔兔标准下载以下金黄色,基部两侧具数条紫红色条纹;茎的节间肿胀呈倒圆锥形………………………………棒节石斛D.findlayanumPar.etRchb.f.…………………………………………………………18b.花苞片大,宽卵形,长7mm~10mm;总状花序出自落了叶的茎上;花白色带紫红色先端。19a.茎节多少肿胀,但不为串珠状;唇盘中央横生1个中间不连接的淡黄色、半月形的斑块,基部两侧具数条紫红色条纹杯鞘石斛D.gratiosissimumRchb.f.……………………………………………19b.茎节肿大呈串珠状;唇盘中部以下金黄色,基部无紫红色条纹肿节石斛D.pendulumRoxb.……15b.茎上的节和节间不肿胀。20a.茎下部常狭窄,向上变宽呈压扁的圆柱形;叶先端不等侧2圆裂。21a.唇瓣宽卵形,远比花瓣大金钗石斛D.nobileLindl.…………………………………………………21b.唇瓣宽长圆形,与花瓣约等大或较小矩唇石斛D.linawianumRchb.f.…………………………20b.茎上下一致的圆柱形(但霍山石斛D.huoshanense常下部较粗,向上逐渐变细)。22a.节间的鞘具绿白相间的条纹;花淡紫红色;唇瓣近圆形,中部以上淡紫红色,中部以下金黄色玫瑰石斛D.crepidatumLindl.etPaxt.…………………………………………………………………22b.节间的鞘无绿白相间的条纹。23a.萼片和花瓣纯紫色或紫红色。24a.花大,萼片长约3.5cm;唇瓣宽卵形,周边为紫红色,唇盘中部以下具1个被白色环带围绕的深紫色斑块喇叭唇石斛D.lituiflorumLindl.……………………………………………………………24b.花较小,萼片长约2.7cm;唇瓣菱状圆形,唇盘两侧各具1个深紫红色斑块………………………紫瓣石斛D.parishiiRchb.f.………………………………………………………………………23b.萼片和花瓣白色、黄绿色或淡黄色,有时仅先端带紫红色。25a.花单生于具叶的茎上;萼片和花瓣白色或白色带淡紫红色;茎柔弱而下垂;萼片长1.7cm~2.0cm;花瓣全缘;唇瓣金黄色,周边淡紫红色美花石斛D.loddigesiiRolfe……………………25b.总状花序具1朵~3(~6)朵花,生于落了叶的茎上。26a.花瓣边缘具细齿;萼片和花瓣白色带紫红色先端;唇瓣肾状圆形,白色带紫红色先端,唇盘两侧各具1个黄色斑块齿瓣石斛D.devonianumPaxt.………………………………………………………26b.花瓣边缘全缘。27a.花苞片大,长1.0cm~1.2cm,纸质;萼片和花瓣白色带紫红色先端;药帽密布白色长晶体状的附属物;唇瓣桔黄色带紫红色先端晶帽石斛D.crystallinumRchb.f.………………………………27b.花苞片小,长2mm~8mm,膜质;药帽光滑或被细乳突。28a.花大,萼片长2.5cm~4.5cm。29a.萼片和花瓣白色;萼片长2.5cm~4.0cm;唇瓣白色,中央具黄绿色的斑块,