DB15T 2893-2023 玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程

ICS65.020.01CCSB0115内蒙古自治区地方标准DB15/T2893—2023玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程TechnicalcodeofpracticeforIdentificationandevaluationofmaizetolerancetosaline-Alkaliintumuanplzhain2023-02-27发布2023-03-27实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2893—2023I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC20）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业生态与资源保护中心、鄂尔多斯市农牧业生态与资源保护中心。本文件主要起草人：景宇鹏、李跃进、赵举、高日平、王伟妮、红梅、刘红霞、刘宏金、张永虎、乔志刚、武岩、任永峰、张君、伊风艳、尹春艳、刘晓宇、吴雪琨、刘俊梅。DB15/T2893—20231玉米耐盐碱鉴定与评价技术规程1范围本文件规定了玉米萌发期、苗期耐盐碱性鉴定、鉴定方法、评价标准等技术规范。本文件适用于玉米品种种质资源的耐盐碱性鉴定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。耐盐碱性saline-alkalinetolerance作物在其生长发育和产量形成对盐碱胁迫的反应能力。盐害指数saltinjuryindexofseedlings在盐碱胁迫条件下，是反映盐害率和盐害程度的指标。盐碱胁迫saline-alkalistresstreatment植物受NaCl、Na2SO4、NaHCO3、Na2CO3等盐碱离子形成的胁迫，称为盐碱胁迫。4鉴定方法胁迫溶液制备采用Na2SO4、NaCl、NaHCO3、Na2CO34种单盐按土壤盐分组成类型配比混合盐碱胁迫溶液；胁迫浓度设置为：0.0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%。采用不同浓度的1/2Hoagland盐碱营养液胁迫处理，为了保持各处理浓度不变，每天以2倍对应处理液浇灌上次浇灌积余的盐碱离子，以1/2Hoagland营养液为对照，每个处理4次重复。DB15/T2893—20232萌发期耐盐碱性鉴定4.2.1种子准备玉米种子应符合GB4404.1相关要求。4.2.2种子处理挑选籽粒饱满一致的种子用5%次氯酸钠浸泡15min，用蒸馏水冲洗晾干。4.2.3胁迫处理在15cm培养皿放入发芽纸注入胁迫溶液，待发芽纸吸水饱和时沥去多余溶液，将种子均匀摆放在发芽纸上，每皿10粒种子，每隔1d用称重法补存水分，保持各处理相对浓度不变；每隔2d重新更换一次胁迫溶液。4.2.4发芽调查将发芽皿放入光照培养箱中，在每24h连续提供8h光照条件下，25℃恒温培养，分别在第1d、3d、5d和7d调查发芽种子数。4.2.5耐盐碱率nd=nntn×100%……………………………………………………(1)式中：nd──种子萌发率，1nd、3nd、5nd、7nd分别为第1d、3d、5d、7d的种子萌发率；nn──在特定时间内种子萌发数；tn──种子总数。A=1.00×1nd+0.75×3nd+0.50×5nd+0.25×7nd……………………………………(2)式中：A──萌发指数；nd──种子萌发率，1nd、3nd、5nd、7nd分别为第1d、3d、5d、7d的种子萌发率。GS=GIG0×100%…………………………………………………(3)式中：GS──萌发期耐盐碱率；GI──萌发指数；G0──对照下萌发指数。苗期鉴定4.3.1种子要求玉米种子应符合GB4404.1相关要求。4.3.2种子处理DB15/T2893—20233挑选出籽粒饱满一致的种子用5%次氯酸钠浸泡15min消毒后，用蒸馏水冲洗晾干后置于石英砂盆播内。4.3.3盆栽准备在苗温室内石英砂培养法，挑选出籽粒饱满一致的种子播于事先准备好的石英砂塑料钵（长×宽、×高=25cm×20cm×15cm）中，每盆播种50粒。4.3.4胁迫处理采用Na2SO4、NaCl、NaHCO3、Na2CO34种单盐按土壤实际盐分组成类型配比混合盐碱胁迫溶液；盐碱胁迫浓度设置5个梯度，分别为：0.0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%。采用不同浓度的1/2Hoagland盐碱营养液胁迫处理，为了保持各处理浓度不变每天以2倍对应处理液浇灌上次浇灌残余的盐碱离子，以1/2Hoagland营养液为对照，每个处理4次重复。4.3.5性状调查胁迫处理18d后观察苗情表现情况，详见下表1。表1碱胁迫处理下单株苗情分类苗情类别受害症状0生长正常，无受害症状1生长基本正常，全株几乎无萎蔫或叶缘蜷曲2全株1/4叶片萎蔫或叶缘蜷曲，叶色变黄3全株1/3叶片萎蔫或叶缘卷曲，叶尖、叶缘焦枯4全株1/2叶片萎蔫或叶缘卷曲，叶枯、叶落5全株枯死或接近死亡4.3.6抗逆指标检测4.3.6.1生理指标可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标。4.3.6.2检测方法参照《植物生理生化实验原理和技术》，从植株顶端连续向下取3～4片叶片。5耐盐碱性评价苗期耐盐碱率SS=∑(𝑆𝑇𝑖×𝑆𝑁𝑖)5i5×TN×100%(i=0，1，2，…5)……………………………………(4)式中：SS──苗期耐盐碱率；STi──苗情类别；SNi──每类苗情株数；DB15/T2893—20234TN──检测样本总株数。评价标准根据耐盐指数对材料萌发期耐盐碱性评价，详见下表2。表2萌发期耐盐性分级标准耐盐性盐害指数耐盐级别高耐70.0%～100%1耐盐60.1%～70%2中耐50.1%～60%3敏感40.1%～50%4高感0.0%～40%5根据耐盐指数对材料幼苗期耐盐碱性评价，详见下表3。表3苗期盐碱性分级标准耐盐性盐害指数耐盐级别高耐0.0%～20%1耐盐20.1%～40%2中耐40.1%～60%3敏感60.1%～80%4高感80.1%～100%5综合评价5.3.1因子确定对种子萌发期发芽率、萌发指数、耐盐碱率和苗期叶片中可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指标进行主成分分析，确定耐盐碱性评价指标。5.3.2评价方法5.3.2.1隶属度确定运用隶属函数法对关键特征因子各指标进行标准化处理，然后计算隶属函数值。𝑅(𝑋𝑖)=(𝑋𝑖−𝑋𝑚𝑖𝑛)(𝑋𝑚𝑎𝑥−𝑋𝑚𝑖𝑛)……………………………………(5)反隶属函数值计算公式：𝑅(𝑋𝑖)=1−(𝑋𝑖−𝑋𝑚𝑖𝑛)(𝑋𝑚𝑎𝑥−𝑋𝑚𝑖𝑛)……………………………………(6)式中：Xi──各指标测定值；DB15/T2893—20235Xmin──各测定指标的最小值；Xmax──各测定指标的最大值。当某一指标与玉米耐盐碱性成正相关时，用公式（1）；当某一指标与玉米耐盐碱性成负相关时，则用公式（2）。5.3.2.2权重确定采用标准差系数法，计算标准差系数，归一化后得到每个指标的权重系数。W(j)=P(j)∑P(j)kj=1(j=1，2，…，k)……………………………………(7)式中：W（j）──权重；P（j）──经主成分分析所得到各材料第j个综合指标的方差贡献率；k──提取的主成分个数。5.3.2.3综合评级计算各材料综合评价值，然后从大到小依次进行排序判断耐盐碱能力。Z(j)=∑Z(j)kj=1×W(j)(j=1，2，…，k)……………………………………(8)式中：Z（j）──综合评价值，第j个综合指标的得分值与权重乘积的和。