农业农村部公告第628号-4-2022 转基因植物及其产品环境安全检测 抗簿番木瓜 第4部分：生物多

20221219发布－－20230301－－实施转基因植物及其产品环境安全检测抗病毒番木瓜第4部分：生物多样性影响04中华人民共和国国家标准备案号：XXXX-XXXXＩＣＳ65.020.01BEvaluationofenvironmentalimpactofgeneticallymodifiedplantsanditsderivedproducts—Virus-resistantpapaya—Part3:Impactsonbiodiversity中华人民共和国农业农村部发布农业农村部公告第628号—4—2022CCS农业农村部公告第６２８号—４—２０２２前　　言本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定起草.本文件是农业农村部公告第６２８号—４—２０２２«转基因植物及其产品环境安全检测抗病毒番木瓜»的第４部分.农业农村部公告第６２８号—４—２０２２已经发布了以下部分:———第１部分:抗病性;———第２部分:生存竞争能力;———第３部分:外源基因漂移;———第４部分:生物多样性影响.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.本文件由中华人民共和国农业农村部提出.本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口.本文件起草单位:农业农村部科技发展中心、中国热带农业科学院热带生物技术研究所.本文件主要起草人:谭燕华、梁晋刚、曹扬、董文凤、郭安平、周霞、张雨良、赵辉、张丽丽、霍姗姗.Ⅰ农业农村部公告第６２８号—４—２０２２转基因植物及其产品环境安全检测抗病毒番木瓜　第４部分:生物多样性影响１　范围本文件规定了转基因抗病毒番木瓜对生物多样性影响的检测方法.本文件适用于转基因抗病毒番木瓜田中节肢动物群落多样性、番木瓜主要病虫害的检测.２　规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.农业农村部公告第６２８号—４—２０２２　转基因植物及其产品环境安全检测　抗病毒番木瓜　第１部分:抗病性NY/T２５１９—２０１３　植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南　番木瓜３　术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.４　要求４􀆰１　试验材料转基因抗病毒番木瓜品种(系)和对应的非转基因抗病毒番木瓜品种(系).上述种子或种苗质量达到NY/T２５１９—２０１３的繁殖体要求.４􀆰２　资料记录按农业农村部公告第６２８号—１—２０２２中４􀆰２的要求执行.４􀆰３　试验安全控制措施按农业农村部公告第６２８号—１—２０２２中４􀆰３的要求执行.５　检测方法５􀆰１　试验设计试验小区面积为４０m×４０m,３次以上重复,常规耕作管理,全生育期不喷施杀虫剂.５􀆰２　对番木瓜田节肢动物多样性的影响５􀆰２􀆰１　调查方法节肢动物调查采用直接观察法、陷阱法、粘板法.直接观察法:自番木瓜移栽定植后７d至番木瓜第一批果实成熟期,每月调查１次.每小区采用对角线５点取样法,每点固定３株番木瓜,每株调查番木瓜树干、果实,以及上、中、下各１片叶子上的节肢动物种类和数量.陷阱法:自番木瓜移栽定植后７d至番木瓜第一批果实成熟期,每月调查１次.每小区采用对角线５点取样法,每点埋设３个塑料杯(杯径×高为１５cm×１０cm),杯中放有５％的洗涤剂溶液,不超过杯容积的１/３,间隔０􀆰５m,调查杯中的节肢动物种类和数量,不易识别的种类进行编号,放入７５％乙醇溶液中保存,供进一步鉴定.粘板法:自番木瓜移栽定植后７d至番木瓜第一批果实成熟期,每月调查１次.在每小区沿对角线设１农业农村部公告第６２８号—４—２０２２置５个调查点,在番木瓜植株顶层安插一块２０cm×３０cm的双面粘板,安置５d后收取粘板,带回实验室,显微镜下分类鉴定.５􀆰２􀆰２　调查记录记录所有直接观察到、陷阱法得到的、粘板粘到的节肢动物的名称、发育阶段和数量.５􀆰２􀆰３　结果分析运用节肢动物群落的多样性指数、均匀性指数和优势集中性指数３个指标,分析转基因番木瓜田中节肢动物群落、害虫和天敌亚群落的稳定性.用方差分析比较转基因抗病毒番木瓜与受体材料之间节肢动物群落结构与稳定性是否存在显著性差异.节肢动物群落的多样性指数按公式(１)计算.H＝－∑Si＝１PilnPi(１)􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺式中:H———多样性指数;Pi———Ni/N;S———物种数.注:计算结果保留小数点后２位数字.节肢动物群落的优势集中性指数按公式(２)计算.J＝HlnS(２)􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺式中:J———均匀性指数;H———多样性指数;S———物种数.注:计算结果保留小数点后２位数字.节肢动物群落的均匀性指数按公式(３)计算.C＝∑Si＝１Pi２(３)􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺式中:C———优势集中性指数;Pi———Ni/N;S———物种数.注:计算结果保留小数点后２位数字.５􀆰３　对主要病害影响５􀆰３􀆰１　调查方法自番木瓜移栽定植后７d至番木瓜第一批果实成熟,每月调查１次,调查番木瓜炭疽病、疫病、其他病毒病等主要病害的发病情况.采用对角线５点取样法,每点固定３株番木瓜,观察记录整株植株上炭疽病、疫病、其他病毒病等主要病害的病害情况,记录番木瓜叶片与果实炭疽病发生级别(附录A中表A􀆰１)、番木瓜疫病发生级别(附录A中表A􀆰２).５􀆰３􀆰２　结果分析发病情况用发病率D表示,按公式(４)计算.D＝NT×１００(４)􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺式中:D———发病率的数值,单位为百分号(％);N———病株数,单位为株;２农业农村部公告第６２８号—４—２０２２T———调查总株数,单位为株.番木瓜炭疽病、疫病发病严重程度用病情指数表示,按公式(５)计算.I＝∑(N×R)T×M×１００(５)􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺􀆺式中:I———病情指数;N———各病级株数,单位为株;R———相应病级数值;T———调查总株数,单位为株;M———最高病害级数值.采用方差分析方法,对试验数据进行统计,比较转基因抗病毒番木瓜与非转基因番木瓜品种(系)对主要病害的发病率和病情指数是否存在显著性差异.５􀆰４　结果表述结果表述为“转基因抗病毒番木瓜与非转基因番木瓜品种(系)对番木瓜田节肢动物群落、主要病害的发病率和病情指数存在(或没有)显著性差异”.３农业农村部公告第６２８号—４—２０２２附　录　A(资料性)番木瓜炭疽病和疫病分级标准　A􀆰１　番木瓜炭疽病分级标准见表A􀆰１.表A􀆰１　番木瓜炭疽病分级标准病害级别症状描述０级　无病１级　病斑面积占叶部与(或)果实面积的５􀆰０％以下,病部有水渍状小斑点２级　病斑面积占叶部与(或)果实面积的６􀆰０％~１５􀆰０％,病斑直径扩大达１cm~２cm３级　病斑面积占叶部与(或)果实面积的１６􀆰０％~２５􀆰０％,病斑上出现同心轮纹斑或无轮纹斑,病部凹陷４级　病斑面积占叶部与(或)果实面积的２６􀆰０％~５０􀆰０％,病斑逐渐扩大成圆形轮纹病斑或不规则形,果肉褐色５级　病斑面积占叶部与(或)果实面积的５１􀆰０％以上,果实腐烂,病斑部位硬化,容易挖脱A􀆰２　番木瓜疫病分级标准见表A􀆰２.表A􀆰２　番木瓜疫病分级标准病害级别发病程度０级无病１级茎基部表皮出现黄褐色斑,茎组织完好,叶片正常２级茎基部表皮出现水渍状黄褐色病斑,茎组织变软,叶片少数变黄或萎蔫３级茎基部腐烂,发出腐烂的恶臭气味,叶片脱落４级茎基部腐烂,植株倒伏死亡４