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团体标准T/DALN001-2018辽宁省全株玉米青贮质量评定标准（试行）EvaluationCriteriaforQualityofCornSilageinLiaoningProvince（forTrialImplementation）2018-07-15发布2018-08-01实施辽宁省奶业协会发布前言本标准按照T/CAS1.1《中国标准化协会标准结构及编写规则》的规定编制。本标准由辽宁省奶业协会提出并归口。辽宁省奶业协会与大连和实生物技术应用有限公司对等拥有辽宁省全株玉米青贮质量评定标准的版权。本标准首次发布。本标准起草单位：辽宁省奶业协会大连和实生物技术应用有限公司本标准主要起草人：徐环宇、佟艳、白子金、高林、白春生、杨建、曹志军、甄玉国、王生滨、任海容、辽宁省全株玉米青贮质量评定标准（试行）1范围本标准规定了全株玉米青贮饲料感官指标、质量指标及质量指标测定方法。本标准适用于全株玉米青贮饲料质量评定与分级。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB10468水果和蔬菜产品pH值的测定方法GB/T6435饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定GB/T20194饲料中淀粉含量的测定旋光法GB/T20195动物饲料试样的制备GB/T20806饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定NY/T1459饲料中酸性洗涤纤维的测定NY/T2129饲草产品抽样技术规程中华人民共和国农业部公告第318号饲料添加剂品种目录3术语和定义3.1全株玉米青贮饲料带穗玉米植株，收获调制后，在密闭条件下通过乳酸菌的发酵作用形成的饲草产品。3.2干物质含量鲜样60℃烘干处理48h，再于103℃烘至恒重，称得质量占试样原质量的百分比。3.3籽粒破碎率破碎的玉米籽粒占收获时玉米籽粒比例。3.4pH值青贮饲料试样浸提液所含氢离子浓度的常用对数的负值，用于表示试样浸提液酸碱程度的数值。3.5氨态氮青贮饲料中以游离铵离子形态存在的氮，以其占青贮饲料总氮的百分比表示，是衡量青贮过程中蛋白质降解程度的指标。3.6总氮青贮饲料中各种含氮物质的总称，包括真蛋白质和其他含氮物。3.7青贮添加剂用于改善青贮饲料发酵品质，减少养分损失的添加剂。4技术要求4.1感官要求4.1.1颜色接近原料本色或呈黄绿色，无黑褐色，无霉斑。4.1.2气味为轻微醇香酸味，无刺激、腐臭等异味。4.1.3茎叶结构清晰，质地疏松，无黏性不结块，无干硬。4.2物理指标4.2.1青贮切割整齐，无拉丝。4.2.2玉米籽实破碎率≥90%。4.2.3宾州筛检测上层筛占10%-15%、中层筛65%-75%、下层筛15%-30%。4.3质量分级4.3.1营养指标分级4.3.2发酵指标分级4.3.3综合质量分级分级等级特优级优级标准级常规级普通级干物质，%≥32，38≥32≥30≥30≥28淀粉，%≥35≥32≥30≥28≥26酸性洗涤纤维，ADF%25≥25，27≥27，30≥30，32≥32，35中性洗涤纤维，NDF%≤4040，≤4545，≤5050，55≥55NDF30小时消化率，%NDF≥60≥55，60≥50,55≥45,5045注：1、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、淀粉以占干物质的量表示。2、按单项指标最低值所在等级定级。分级等级特优级优级标准级常规级普通级氨态氮/总氮，N%5≥5，8≥8，10≥10，12≥12，15乳酸，%≥6≥5，6≥4.5，5≥4.0，4.5≥4.0，4.5丁酸，%0000.1≥0.1，0.2注：1、乳酸、丁酸占干物质的量表示。2、按单项指标最低值所在等级定级。全株玉米青贮综合质量分级以达到感官指标和物理指标要求为基准，然后同时评定营养指标与发酵指标，其中某一项指标所在的最低等级即为综合质量分级的等级。4.4青贮添加剂对使用的青贮添加剂做相应说明。标明添加剂的名称、数量等。添加剂须符合中华人民共和国农业部公告第318号的有关规定。5测定方法5.1取样方法玉米青贮饲料分析样品的取样，按照NY/T2129的规定执行。5.2试样制备玉米青贮饲料化学指标分析样品制备，按照GB/T20195的规定执行。发酵品质指标分析样品的制备，分取玉米青贮饲料试样20g，加入180mL蒸馏水，搅拌1min，用粗纱布和滤纸过滤，得到试样浸提液。5.3干物质含量按照GB/T6435的规定执行。5.4淀粉含量按照GB/T20194的规定执行。5.5有机酸含量（乳酸、丁酸、乙酸）液相色谱法测定青贮饲料有机酸含量，参考附录B。5.6中性洗涤纤维含量按照GB/T20806的规定执行。5.7氨态氮含量苯酚—次氯酸钠比色法测定氨态氮含量，参考附录A。5.8酸性洗涤纤维含量按照NY/T1459的规定执行。5.9NDF30小时消化率按照NY/T1459的规定执行5.10pH值将制备的玉米青贮饲料试样浸提液，参照GB10468规定执行。6品质判定玉米青贮饲料样品的营养及感官指标均同时符合时，则判定所代表的该批次产品为该等级；当有任意一项指标低于该等级指标时，则按单项指标最低值所在等级定级。附录A（资料性附录）氨态氮含量的测定A.1试剂A.1.1亚硝基铁氰化钠（Na2[Fe(CN)5·NO]2H2O）。A.1.2结晶苯酚（C6H5O）A.1.3氢氧化钠（NaOH）A.1.4磷酸氢二钠（Na2HPO6•7H2O）A.1.5次氯酸钠（NaClO）：含活性氯8.5%A.1.6硫酸铵[(NH4)2SO4]A.1.7苯酚试剂将0.15g亚硝基铁氰化钠溶解在1.5L蒸馏水中，再加入29.7g结晶苯酚，定容到3L后贮存在棕色玻璃试剂瓶中，低温保存。A.1.8次氯酸钠试剂将15g氢氧化钠溶解在2L蒸馏水中，再加入113.6g磷酸氢二钠，中火加热并不断搅拌至完全溶解。冷却后加入44.1mL含8.5%活性氯的次氯酸钠溶液并混匀，定容到3L，贮藏于棕色试剂瓶中，低温保存。A.1.9标准铵贮备液称取0.6607g经100℃烘干24h的硫酸铵溶于蒸馏水中，并定容至100mL，配制成100mmol/L的标准铵贮备液。A.2仪器与设备A.2.1分光光度计：630nm，1cm玻璃比色皿；A.2.2水浴锅；A.2.3移液器：50μL；A.2.4移液管：2mL，5mL；A.2.5玻璃器皿：试管，所需器皿用稀盐酸浸泡，依次用自来水、蒸馏水洗净。A.3测定步骤A.3.1标准曲线的建立取标准铵贮备液稀释配制成1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mmol/L五种不同浓度梯度的标准液。向每支试管中加入50μL标准液，空白为50μL蒸馏水；向每支试管中加入2.5mL的苯酚试剂，摇匀；再向每支试管中加入2mL次氯酸钠试剂，并混匀；将混合液在95℃水浴中加热显色反应5min；冷却后，630nm波长下比色。以吸光度和标准液浓度为坐标轴建立标准曲线。A.3.2样品的检测向每支试管中加入50μL正文中所述制备青贮浸出液，按检测步骤测定样本液的吸光度。A.3.3水分测定按GB/T6435的规定执行。A.3.4总氮的检测按GB/T6432的规定执行。A.3.5结果计算氨态氮的含量按以下公式进行计算。式中：X：氨态氮含量，单位为占总氮的质量百分比（总氮%）。ρ：样液的浓度，单位为毫摩尔每升（mmol/L）。D：样液的总稀释倍数。M：样品的水分含量，单位为百分比（%）。N：试样的总氮含量，单位为占鲜样的质量百分比（鲜样%）。附录B（资料性附录）液相色谱法测定青贮饲料有机酸含量B.1试剂和材料乳酸、乙酸、丙酸、丁酸标准品，超纯水，色谱纯高氯酸。B.2仪器高效液相色谱仪配备紫外检测器和工作站B.3测定程序B.3.1色谱条件ShodexKC-811色谱柱，3mmol/L高氯酸为流动相，流速1mL/min，SPD检测器波长210nm，柱温50℃，进样量20μL。B.3.2色谱测定采用外标法，用乳酸、乙酸、丙酸、丁酸标准液制作标准工作曲线。根据试样浸提液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作曲线，对标准工作溶液与试样浸提液等体积参插进样测定，标准工作溶液和试样浸提液乳酸、乙酸、丙酸、丁酸的响应值均应在仪器检测的线性范围内。按照色谱条件分析标准品，乳酸、乙酸、丙酸、丁酸的保留时间分别约为8.1min、9.6min、11.2min、13.8min，标准品的液相色谱图见图1。B.3.3空白试验将制备的玉米青贮饲料试样浸提液，通过0.22μm微孔滤膜过滤后，采用高效液相色谱法测定乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量。B.3.4结果计算用色谱工作站计算试样浸提液被测物的含量，计算中扣除空白值。再通过换算浸提液制备过程中对应的样品量，获得乳酸、乙酸、丙酸、丁酸在样品中的比例。