临床检验标本采集规范检验科胡建红“正确的临床医学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。”著名的临床微生物检验专著ManualofClinicalMicrobiology的主编PatrickMurray分析后阶段分析阶段分析前阶段失误的不同分布第一部分检验标本正确采集和运送的重要性•采集标本要选择最佳时间•采集标本要选择最具代表性•采集标本要最大满足要求•重视标本惟一性标志临床检验血液标本原则上晨起空腹时采集,其结果准确可靠,因它避免了摄入成分和生理活动对检测指标的影响。比如需做血脂检查,在化验前24h要禁高脂饮食,12h禁流质。若要做大便隐血试验,则要在收集标本前3天禁动物血饮食。特定时间采血因人体生物节律昼夜的周期变化,所以24h内不同时间所采集的标本其检测结果是不同的,如糖、激素及药物疗效监测等。尿常规采集晨尿,由于肾脏浓缩功能,易发现病理成分.采集标本要选择最佳时间急诊检验采血不受时间的限制,但在检验单上应注明采血时间和急诊字样,以便临床医生根据其特殊性综合分析检验报告。受饮食影响较少的检验项目,如某些抗原、抗体的检测等。细菌培养应尽量争取在抗生素使用前采集标本;临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者,需做血液细菌培养,采血宜在患者发冷、发热期间,越早越好,最好在抗菌治疗前,以正在发冷、发热时或发冷、发热前半小时为宜。。细菌量体温时间上升幅度采集标本要选择最具代表性由于患者标本采集不当,常导致阳性率降低,因此标本的采集应具有代表性,比如大便标本应采取新鲜标本,且选取异常成分的粪便,如含有黏液、脓、血等病变成分的标本取3~5g送检;应避免混有尿液、消毒剂及污水等杂物。比如痰液也要求新鲜,一般检查以清晨第1口痰作标本最适宜,做细胞学检查则以上午9:00~10:00留痰为好。骨髓穿刺、脑脊液穿刺应防止外伤性血液的渗入,还应避免凝固。血标本采集时患者应采取坐位或仰卧位,还应防止压脉带时间过长等。采集标本要最大满足要求抗凝剂、防腐剂的正确应用:临床上很多检验项目涉及到抗凝剂、防腐剂的应用,如血沉检查,但由于抗凝剂比例不当造成血沉减慢的现象也常发生。容器清洁度或无菌程度:如24小时或12小时尿中某成分分析需加防腐剂,而细菌培养的容器绝对不能有防腐剂;微量元素测定对容器洁净度的要求远远高于其他检测。因此标本容器必须干燥、清洁、无污染物、无渗漏。防溶血、防血脂、防污染:溶血标本引起的血细胞计数、血细胞比容、电解质离子及一些酶类、尿素、肌酐、尿酸、血糖等项目的变化临床上经常碰到。脂血标本、被污染标本引起对实验吸光度的干扰,这些都应引起重视。标本运送应注意一些问题:首先标本要专人输送,除门诊患者自行采集的某些标本允许患者自行送外,其他情况原则上一律专人运送。其次送检标本保证安全,防止过度震荡,防止容器破损,防止污染,水分蒸发等。最后保证运送及时性,标本采集后立即送检,标本在室温放置时间直接影响检测结果的真实性。防止过失采集:不可利用输液、输血通道采集血液标本。除急诊抢救外应尽量避免在输液、输血的同时采集标本;如确需抽血要在另一侧肢体抽取。一般要求在输液、输血前或后1小时采集血液标本。重视标本惟一性标志标本采集容器标签上应注明送检科别,床号,患者姓名,与检验单上应相对应,防止张冠李戴。化验单上住院号,项目也应明确.总之,规范实验室标本采集和运送至关重要,除以上涉及到的诸多因素外,还有许多能影响体液成分或干扰测定,如患者年龄、性别、情绪、饮食、运动和药物等的影响,因此在标本采集前应尽可能排除这些因素的干扰,获取准确的检验结果,为临床提供科学可靠的诊断依据。第二部分各种临床检验标本的正确采集方法检验标本的采集是保证检验结果准确的前提。因此,要求各临床科室医护人员、送检者及相关人员认真、严格的按照检验标本的采集方法操作取材。血液常规检查标本1.静脉血采集静脉血标本采集前病人应注意的问题:1)避免剧烈运动,一般主张抽血前24h内不做剧烈运动,清晨取血,住院病人可在起床前采血,匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后采血。2)注意合理饮食。除了急诊或其它特殊原因外,一般主张在禁食12h后空腹取血,延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会引起变化,饮酒实验亦有影响。3)药物的影响:很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果,病人在化验前应尽可能停服对实验有干扰的药物。静脉采血时护士应注意的问题:1)采用一次性真空采血管,多项化验采血顺序应是:血培养→无添加剂管→有添加剂管管。血常规、血凝、血沉抽血量务必准确抽取规定的量,并轻轻颠倒混匀。2)采血时的体位建议以坐位5分钟后取血为宜,止血带使用应少于1分钟,以免引起血液淤滞,造成血管内溶血或血液某些成分改变。3)当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血,以免影响血糖、血钾等的浓度。4)血标本应防止溶血,影响溶血的因素有:用止血带时间过长;抗凝管使用不当或抗凝混合时过度振荡;容器污染;血液中泡沫注入试管;标本放置时间长或突然冷却和受热;离心力过大等。5)正确使用抗凝剂。(一)血常规检验标本一般用EDTA-2K(EDTA-K2•2H2O)1.5~2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝管,紫色帽)采血。采血注意事项:1.应按抗凝管刻度准确采静脉血1.5-2ml,不能超过2ml。2.采血后立即轻轻颠倒混匀(5-8次,不可用强力震荡,以免造成溶血。);3.采血后应尽快送检(为保证结果准确需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过2hWBC形态会发生改变)。(二)凝血检测(PT、APTT、TT、FBG)标本静脉采集抗凝血(真空负压系统采血),抗凝剂用枸橼酸钠(109mmol/L,即32.06g/L,抗凝剂:全血=0.2:1.8)抗凝血(枸橼酸钠抗凝管、蓝绿色帽)。采血注意事项:1.空腹采静脉血(餐后脂血影响检测结果,使因子Ⅶ活化,导致PT延长);2.采血时患者应保持平静状态30min以上(剧烈活动可使因子Ⅷ活化,APTT明显缩短);3.应单独1管血,必须准确采血至刻度线2ml;4.采血后应立即上下颠倒混匀5-10次,不可有凝块;5.采血后应尽快送检(必须2h内检测)。(三)红细胞沉降率(血沉,ESR)检验标本静脉采集枸橼酸钠(109mmol/L,即32.06g/L)抗凝血(枸橼酸钠抗凝管采血,黑色帽)。注意事项:1.单独采1管血,按抗凝管刻度准确采血至2ml(抗凝剂:全血=0.4:1.6);2.采血后立即上下颠倒混合5-10次,不可用强力振荡;3.采血后应尽快送检(为保证结果准确,必须2h内检测)。(四)临床生化检验标本临床生化检验多用非抗凝血标本,应使用真空负压采血管。临床生化检验血标本采集主要注意事项是:1.多项化学检测一般可采1管血;2.采血量视检查项目多少不同而异,单管通常为3.0-5.0ml左右;3.多项检测同时采血时应按下列顺序采血:①血培养;②无添加剂管;③凝血管;④有添加剂管的顺序为:a.橼酸盐管;b.肝素管;c.EDTA管。试管分类抗凝剂类型采血至管子刻度检查项目蓝绿色3.8%枸橼酸钠2ml凝血检查紫色EDTA—K21.5-2ml血常规、血型绿色肝素钠3ml微量元素附:真空采血管采集血液标本一览表黑色3.8%枸橼酸钠2ml血沉黄色分离胶+促凝剂3ml生化免疫类尿液常规检查标本1.尿液常规检查标本应按以下原则进行采集:(1)新鲜晨尿最佳,门诊病人亦可留随机尿;(2)尿液采集于干净带盖容器中,不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿;(3)避免混有经血、白带、精液和粪便;(4)尿液成分定量检查应留取24h防腐混合尿100~200ml(须记取24h尿液总量);2.尿液常规检查标本采集方法:(1)晨尿最好(安静状态下留取清晨第一次尿,浓缩,无其他影响);(2)随机尿较常用(随时留尿,适用于门诊和急诊病人,结果易受多种因素影响);(3)清洁尿(中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿,用于病原微生物学培养、鉴定和药敏);(4)24h尿(用于尿液成分24h定量检查分析,一定要教会病人留取24h尿正确方法)。(5)尿检标本应于2小时内送检。粪便常规检查标本1.一般应为新鲜的自然排出的粪便3~5g,必要时可肛拭子采取;2.送检粪便应盛于洁净带盖的塑料盒中送检,要做好标记;3.要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查;4.检查蛲虫卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前,于肛门周围皱襞处拭取标本,并立即送检;5.做大便隐血试验时,应嘱病人检查前3d内禁食肉类、含动物血的食物及某些蔬菜,禁服铁剂和维生素C等对实验有干扰作用的药物。其它体液常规检查标本浆膜腔积液检查标本(1)浆膜腔积液标本一般由医生无菌穿刺采取;(2)送检标本量:理学检查、化学检查、细胞学检查各留取2ml;细菌学检查用无菌管采集标本,厌氧菌培养留取1ml,结核菌检查留取10ml。(3)标本采集后必须立即送检(否则可出现细胞变性,标本凝集,细菌溶解);(4)用于细胞学检查时,可在标本中加适量EDTA盐抗凝,但还须留取1管不加抗凝剂的标本用于观察积液的凝固性;化学检查标本宜用肝素抗凝。微生物学检验标本微生物学检验标本的正确采集﹑运送及处理,与细菌的培养﹑鉴定结果有十分密切的关系;医生﹑护士﹑检验人员均应重视微生物学检验标本正确采集的有关问题,并有责任向患者及其家属进行正确采集标本的宣传和指导。提高感染样本送检率加强细菌耐药监测关注细菌性疾病的病原学诊断,已成为临床工作者、临床微生物与微生态工作者、药学家和从事感染控制的工作者共同关注的热门焦点。标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关键但由于标本的采集和运送常由护士或医生或病人自己完成,所以也是最不容易做好的事情,而且不知道问题所在之处,造成的后果是:临床医生最不能接受的问题:阳性率低标本收集部位非无菌部位无菌部位眼血液耳脊髓液呼吸道胸膜液消化道腹膜液泌尿道关节液皮肤毛发1.微生物学检验标本采集、运送、验收和处理注意事项(1)标本采集1)申请单标记必须清楚(姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等),以便实验室能够合理选择培养环境和培养基;2)尽量在抗生素应用前采集标本,以避免漏检和提高阳性检出率;3)标本采集应严格执行无菌操作;4)咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本,应加入适量生理盐水保湿送检;5)痰、尿液、伤口拭子等混有正常菌群的标本,采集后应立即送检;6)采集标本的容器必须是无菌培养杯或管。(2)标本运送1)标本采集后应尽快送到微生物实验室;2)标本采集后在室温下超过2h未送达实验室,可视为不合格标本。(3)标本验收1)实验室只能接受和处理合格标本;2)实验室对不合格标本退回必须说明原因,并应及时与临床联系。2.微生物学检验标本采集和处理(1)尿液标本采集和处理通常留取晨起第一次尿液(此时尿液在膀胱内储存4h以上);尿液采集后要及时送检,并保证2h内接种;尿液微生物学检验标本采集方法如下。;1)中段尿采集法:成年男性和女性分别用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用灭菌水冲洗尿道口,然后排尿弃去前段尿液,于带盖的无菌管中留取中段尿液5~10ml2)导尿法:用导尿管导取10~15ml尿液,置灭菌容器中送检;长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿;留置导尿时,用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口,用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检(不可采集尿液收集袋中的尿液送检)(2)粪便标本采集和处理1)采集时间:①腹泻患者于急性期,尽量在用药前采集粪便;②伤寒患者于发病2天以后采集粪便;③怀疑霍乱时立即采集粪便送检。2)采集方法:①自然排便:取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分,2-3g或1-2ml,盛无菌容器内或置于保存液或增菌液内送检;②直肠拭子:用于难以获得粪便或排便困难的患者和婴幼儿,标本采集后插入灭菌试管内送检。(3)痰及下呼吸道标本采集和处理1)自然咳痰法:①晨痰为佳;②先冷开水漱口清洁口腔和牙齿;③再用力咳出呼吸道深部的痰;④痰量不得少于1ml;⑤痰咳出困难时可先雾化吸入NaCl溶液(100g/L,加温到45℃)使痰容易咳出。2)小