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1第二章《基因工程》复习题一、选择题1.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是（D）A修复自身的遗传缺陷B促进自身的基因重组C强化自身的核酸代谢D提高自身的防御能力2.生物工程的上游技术是（D）A基因工程及分离工程B基因工程及发酵工程C基因工程及细胞工程D基因工程及蛋白质工程3.基因工程操作的三大基本元件是:(I供体II受体III载体IV抗体V配体)（A）A.I+II+IIIB.I+III+IVC.II+III+IVD.II+IV+V4.多聚接头（Polylinker）指的是（A）A.含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工DNA片段B.含有多种复制起始区的人工DNA片段C.含有多种SD顺序的人工DNA片段D.含有多种启动基因的人工DNA片段5.下列五个DNA片段中含有回文结构的是（D）A.GAAACTGCTTTGACB.GAAACTGGAAACTGC.GAAACTGGTCAAAGD.GAAACTGCAGTTTC6.若将含有5'末端4碱基突出的外源DNA片段插入到含有3'末端4碱基突出的载体质粒上，又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少，则需用的工具酶是（D）IT4-DNA聚合酶IIKlenowIIIT4-DNA连接酶IV碱性磷酸单酯酶A.IIIB.I+IIIC.II+IIID.I+II+III7.下列有关连接反应的叙述，错误的是（A）A.连接反应的最佳温度为37℃B.连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C.连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD.连接酶通常应过量2-5倍8.T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（D）A.2'-OH和5'–PB.2'-OH和3'-PC.3'-OH和5'–PD.5'-OH和3'-P9.载体的功能是(I运送外源基因高效进入受体细胞II为外源基因提供复制能力III为外源基因提供整合能力)（D）A.IB.I+IIIC.II+IIID.I+II+III10.克隆菌扩增的目的是(I增殖外源基因拷贝II表达标记基因III表达外源基因)（D）A.I+IIB.I+IIIC.II+IIID.I+II+III11.下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是（C）2A.大肠杆菌－繁殖迅速B.枯草杆菌－分泌机制健全C.链霉菌－遗传稳定D.酵母菌－表达产物具有真核性12.考斯质粒（cosmid）是一种（B）A.天然质粒载体B.由λ-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C.具有溶原性质的载体D.能在受体细胞内复制并包装的载体13.某一重组DNA（6.2kb）的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有（D）A.4个B.3个C.2个D.至少2个14.外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是(I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离)（D）A.IIIB.I+IIC.I+IIID.II+III15.提高重组率的方法包括(I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间)（A）A.I+IIB.I+II+IIIC.I+III+IVD.II+III+IV16.识别基因序列不同，但酶切后产生的粘性末端相同的一类酶为（B）A.同工酶B.同尾酶C.同裂酶D.同位酶17.pBR322质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件（ABD）A.AmPr和TetrB.ori复制子C.LacZ标记D.多克隆位点18.λ噬菌体外包装目的基因片段的大小应为（D）A.小于λ噬菌体DNA的50%B.小于噬菌体DNA的75%C.大于λ噬菌体DNA的105%D.为λ噬菌体DNA的75%～105%19.DNA连接酶的功能是(AB)A.恢复3’-OH与5’-P之间的磷酸二酯键B.恢复缺口C.恢复裂口D.可使平末端与粘性末端连接20.PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件(ABCD)A.AmPrB.ori复制子C.LacZ标记D.多克隆位点21.下列属于获取目的基因的方法的是(D)①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取③从受体细胞中提取④利用PCR技术⑤利用DNA转录⑥人工合成A.①②③⑤B.①②⑤⑥C.①②③④D.①②④⑥22.的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是BA．提高受体细胞在自然环境中的耐药性B．有利于对目的基因是否导入进行检测C．增加质粒分子的分子量D．便于与外源基因连接23.有关基因工程的叙述正确的是DA．限制酶只在获得目的基因时才用3B．重组质粒的形成是在细胞内完成的C．质粒都可作为运载体D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料24.哪项不是基因表达载体的组成部分(B)A.启动子B.终止密码C.标记基因D.目的基因25.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法(B)A．基因枪法B．显微注射法C.农杆菌转化法D．花粉管通道法26.以下说法正确的是（C）A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来27.不属于质粒被选为基因运载体的理由是（D）A、能复制B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNA28.有关基因工程的叙述中，错误的是（A）A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶29.有关基因工程的叙述正确的是（D）A、限制酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料30.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（C）A、人工合成目的基因B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达31.下列获取目的基因的方法中需要模板链是（B）A.从基因文库中获取目的基因B.利用PCR技术扩增目的基因C.反转录法D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成32.下列有关基因工程的叙述中，错误的是ACA、DNA连接酶将粘性末端的碱基对连接起来4B、基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C、基因治疗主要是对有缺陷的进行修复D、蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料二、是非判断题1.DNA连接酶是一种能催化二条DNA链之间形成磷酸二酯键的酶，因此该酶既可修复基因序列中的缺口，也可修复裂口。（×）2.质粒提取后，在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高，当为三条带时为纯度不高。（×）3、入噬菌体的插入型载体只有一个单一限制酶切点，替换型载体有2个成对的限制性酶切点。（√）4、原核细胞和真核细胞转录的mRNA均具有与rRNA结合的SD序列，以利于进行有效的转录。（×）5、cDNA文库是包含有细胞中所有mRNA，因此该文库能包含细胞所有的遗传信息。（X）1．基因工程可改变生物或其分子的遗传物质（√）2．通过限制性核酸内切酶和DNA连接酶等作用，在体外将不同来源的DNA片断重新组合成新的DNA分子(重组DNA)。（√）3．基因的“剪刀”是限制性内切酶（√）4．基因的“针线”是DNA连接酶（√）5．基因的“运输工具”是载体（√）6．基因的“剪刀”是DNA连接酶（×）7．基因的“针线”是限制性内切酶（×）8．将目的基因与载体连接过程是由限制性内切酶来完成。（×）9.将目的基因与载体连接过程是由DDNNAA连连接接酶酶来完成。（√）10.通过基因工程菌可生产胰岛素、人生长激素、干扰素等蛋白质药物。（√）三、填空题1、在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显白色，为阳性克隆，未插入基因的克隆显蓝色，为阴性克隆。2、理想的质粒克隆载体应具备以下基本条件，如能自主复制、一种或多种限制酶的酶切位点、筛选标记、分子量小易拷贝。3、点突变的基因系列在碱基替换中，若为一个嘌呤换成另一个嘌呤或一个嘧啶换成另一个嘧啶者称转换，若一个嘌呤换成一个嘧啶或一个嘧啶换成一个嘌呤者称颠换。4、基因表达的四大表达系统分别为大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞、昆虫细胞。5、基因与载体的平末端连接方法有哪些T4连接酶连接法。末端核苷酸转移酶加同聚物尾巴后，再用DNA连接酶进行连接；化学合成衔接物后连接DNA分子。5、目的基因与载体连接方式有哪些1)粘性末端连接；2）平头末端连接；3）人工接头法；4）同源多聚尾连接法6、如何利用抗性标记基因筛选阳性克隆？抗性标记筛选；抗性基因插入失活筛选；LacZ基因失活筛选。7、核酸操作的基本技术有哪些①核酸提取与纯化②核酸的检测与保存③核酸的凝胶电泳④核酸分子杂交8、基因工程所需的基本条件1、用于核酸操作的工具酶；2、用于基因克隆的载体；3、用于基因转移的受体菌或细胞。59、Klenow酶在有dNTP情况下，呈现DNA聚合酶活性，在没有dNTP情况下呈现外切酶活性。10、利用PCR技术扩增目的基因①概念：PCR全称为_____聚合酶链式反应__________，是一项在生物__体外__复制____特定DNA片段___的核酸合成技术②原理：__DNA复制________③条件：_____已知基因的核苷酸序列______四种脱氧核苷酸______一对引物______、_____DNA聚合酶____________________.前提条件：④方式：以_指数____方式扩增，即__2n__（n为扩增循环的次数）⑤结果使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增11．PCR技术扩增过程a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成____单链DNAb、复性（55℃-60℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部__双链______。c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补的__DNA链______。DNA的四种核酸的碱基分别是:胸腺嘧啶、胞嘧啶、腺嘌呤和鸟嘌呤。25．在基因工程中应用的酶类统称为工具酶。四、名词解释1.同尾酶某些限制性内切酶识别的碱基顺序不同，但酶切后产生同样粘性末端的两种酶2.柯斯（C0S）质粒带有λ噬菌体的COS位点和整个pBR322的DNA顺序的大肠杆菌质粒。3.SD序列为mRNA能在细菌核糖体上产生有效结合和转译的特殊序列。4.质粒不亲和性：在没有选择压力的情况下，两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。5.cDNA文库：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。6.穿梭质粒载体：指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记，因而可在两种不同宿主细胞中存活和复制的质粒载体。7.基因(gene)具有特定功能的DNA片段，这些片段有的编码蛋白质，有的编码rRNA、tRNA，有的则是与复制、转录调控有关的DNA序列。8.基因重组:由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合，形成新DNA分子的过程。9.基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品10.目的基因(objectivegene)：又叫靶基因(targetgene)，是指根据基因工程的目的,设计的所需要的某些DNA分子片段，它含有一种或几种遗传信息的全套密码(code)611.基因表达基因表达(geneexpression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的.12.双功能抗体将识别效应细胞的抗