痰热清安全性再研究

痰热清注射液再升级---安全性再评价北京樊栓成凯宝药业七环节保证痰热清用药安全第九届国家药典委员会委员、国家食品药品监督管理局药品审评专家马双成博士指出，质量可控是中药注射剂安全有效的基础和保障。生产企业要积极开展中药注射剂质量标准的研究工作，提高药品标准，确保中药注射剂产品质量。马双成指出中药注射剂发生不良反应主要与以下问题相关：1、剂型选择的合理性；2、药材质量不同；3、辅料质量不同；4、生产工艺落后，灭菌存在问题；5、质量控制项目不全；6、生产过程全过程控制不够；7、临床不合理使用问题。上海凯宝药业10年来对痰热清产品质量持续升级，通过多种手段、协同努力，很好的解决了这7大难题：⑴制剂制备工艺合理痰热清注射剂开创了“依证随方确认提取有效成分”的先进理念，根据治疗痰热阻肺有效组分而配伍。充分考虑到哪些中药适合做注射剂，先研究清楚药材中的有效成分，再分别提取精制、配液，保证了痰热清的高效性和安全性。⑵道地药材痰热清全部选用道地药材。其中，黄芩产于山东沂蒙，其黄芩的含量达到16%以上；熊胆粉产于四川和东北；山羊角产于内蒙古赤峰；金银花产于河南封丘，只用5月份采收的头茬花；连翘产于河南三门峡。⑶不含辅料应用HPLC/分子排阻、HPLC/络合物、HPLC/示差检测器、离子色谱法、气相色谱法等方法检测表明痰热清注射液不含吐温-80、EDTA、柠檬酸等辅料，避免了辅料收入的过敏原。⑷无菌化生产2010年上海凯宝药业建成的新厂，其痰热清生产线就是按照2011年3月1日起开始推行的新版药品GMP标准进行设计。该生产线的中药提取设备、洗烘灌封联动线、真空干燥技术、超滤器设备、自动侦检设备等均采用国际先进设备。新生产线实现了生产流程的全自动化、模块化、流程化，从而避免了人为操作误差、细菌等污染。⑸36项质检标准上市以来，痰热清注射剂不断提升质检标准，质检标准从10多项达到今天的36项内控质检标准，比国家标准高出多项。⑹生产全过程控制凯宝药业巨资引进了“痰热清质量在线检测项目”，成立了“痰热清注射剂全程质量监控数字化生产车间系统”，实现了药品生产的全程数字化控制，充分保证了产品的安全性。⑺坚持开展痰热清安全用药教育活动凯宝药业几年来一直针对临床医生、护士开展中药注射剂安全用药教育工作，举办了多期“医护人员培训班”，为指导广大医护人员正确、规范用药，增强其用药安全意识做出了努力。痰热清注射剂的“罕见级不良反应”充分体现了“药品安全是生产出来的，而不是检验出来的”先进理念。在进入临床使用前，每一支痰热清都经过了千锤百炼，产品安全性得到可靠保障。上海闸北区中医院蔡主任表示：“我们医院经常用到痰热清注射剂，每月要用2千多支，效果好，使用一年多来，还没有出现过不良反应事件。”上海凯宝董事长刘宜善说：“中药注射剂质量标准的提升是个持续的过程，上海凯宝药业将按照国家食品药品监督管理局的有关政策精神，继续推动产品质量标准的持续提升。”研究方法研究成果黄芩提取物HPLC法柱层析分离Q-TOF液质NMR等手段明确了8个成分建立了5种成分含量的专属性测定方法5种成分含量约为干燥提取物的98%金银花提取物HPLC(UV)HPLC-氨基柱高效液相色谱-串联质谱HPLC分离得到4个已知化合物明确了11个化合物结构有机酸类成分约为干燥提取物的28%-39%连翘提取物HPLC-DAD多波长HPLC-蒸发光检测器HPLC-离子阱质谱HPLC-QTQF质谱HPLC-示差检测器UV分离得到2个已知化合物建立12种成分含量测定方法小分子成分约占提取物10%黄酮类成分约占提取物44%山羊角提取物高效液相色谱法高效液相色谱-前衍生法液质联用同位素内标法高分辨率质谱得到31种氨基酸建立12种氨基酸的检测方法蛋白氨基酸约为干燥提取物的70%存在焦谷氨酸熊胆粉提取物红外核磁制备薄层高分辨率质谱HPLC(UV和ELSD)主要成分为熊去氧胆酸与鹅去氧胆酸上述两种成分总量占干燥提取物90%以上痰热清注射液物质基础研究结果总结季申等上海市食品药品药检所重庆大学技术要求总固体中成分可测（%）总固体中明确结构并采及专属性方法可测（%）明确结构并在指纹图谱中可指认（%）痰热清注射液黄芩303014.8金银花2225.9连翘0.80.83.7山羊角151540.7熊胆粉33337.4合计80.880.893国食药监注[2007]743号文件806090痰热清注射液物质基础研究结果总结季申等上海市食品药品药检所重庆大学痰热清注射液安全性研究成果辅料、重金属及有害元素、大分子蛋白质是影响中药注射剂安全性，导致过敏、生物毒性等不良反应发生的主要原因。所以本次物质基础研究还对痰热清注射液成品进行辅料筛查、重金属及有害元素检查、蛋白质专属性测定方法研究，结果发现：1、辅料的筛查目的筛查的辅料方法本品应不含任何辅料排查中药注射剂潜在的安全性隐患吐温-80EDTA亚硫酸钠柠檬酸山梨醇丙二醇各丙三醇HPLC/分子排阻HPLC/络合物HPLC/示差检测器气相色谱法离子色谱法有害元素种类理由结果铜、砷、镉、汞、铅、铊、锑、铬、钒、硒、钾、钠、镁、钙、铝、锰、铁、锌、钡中国药典中规定的有害元素具有显著的生物毒性超量使用具有毒性离子紊乱现象超量易引起伤害铜≤2μɡ/天砷、铅≤1μɡ/天镉、汞含量较低含量较低常量元素未发现异常2、重金属及有害元素检查关注理由研究理由方法水煮醇沉工艺如果由于醇沉不彻底而导致蛋白质残存残存蛋白质可作为抗原或半抗原直接进入血液引起过敏反应中国药典附录中的方法缺乏专属性探索中药注射剂中蛋白质检查的专属性方法SDS-丙烯酰胺凝胶电泳法四级杆-飞行时间串联高分辨质谱3、蛋白脂专属性测定方法的研究痰热清注射液质量标准升级成果为了有效地控制痰热清注射剂内在的质量，痰热清物质基础研究科研人员运用高效液相色谱法、质谱法等技术手段，不仅进一步阐明了痰热清的化学成分，并纳入质量控制体系，进一步提高了痰热清的质控标准。提高后的质量标准情况增修订内容（鉴别）黄芩苷TLC丙氨酸、脯氨酸TLC绿原酸TLC连翘TLC等分别增加对照药材作为参照增修订内容（检查）PH值、色泽、可见异物、不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、重金属、砷盐、炽灼残渣、总固体、鹅去氧胆酸乙醇、乙酸乙脂、正丁醇、异常毒性、过敏反应、溶血与凝聚、热原无菌重金属及有害元素：采用专属性的方法（ICP-MS）进行测定蛋白质、大分子物质检查、聚合物检查增修订内容（指纹图谱）黄芩中黄酮类成分的指纹图谱金银花有机酸类成分的指纹图谱其余药味的指纹图谱4项增修订内容（含量测定）黄芩中黄酮类多成分的含量测定其余药味的含量测定多项鉴别项和检查项的进一步完善，进一步保证了痰热清注射液的安全性。痰热清注射液采用四张指纹图谱与多指标成分定量分析相结合的中药质控手段保证了注射液物质基础的均一和稳定；采用一测多评技术，多成分同时测定，有效控制了产品质量抗炎退热祛痰痰热清注射剂主要临床应用痰热清注射剂由黄芩、熊胆粉、山羊角、金银花、连翘精制而成，方中黄芩上行泻肺火，下行泻膀胱之火，为清热要药；熊胆粉清热，解毒化痰；山羊角平肝熄风以加强退热、解毒、镇痉之功；金银花宣肺解表，清热解毒；连翘解肌透表，清热逐风。主要用于肺炎早期、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作以及上呼吸道感染等疾病。现将痰热清注射液的主要临床应用归纳如下：1.抑菌、抗炎、抗病毒作用1.1抑菌作用体外抑菌试验表明，痰热清对呼吸道有关致病菌：肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、嗜血流感杆菌有一定的抑制作用。体内保护性试验表明，痰热清对小鼠致死性金葡菌感染死亡的保护作用，结果可明显降低死亡发生率。临床研究发现痰热清治疗轻、中度绿脓杆菌肺部感染效果明显；治疗腐生葡萄球菌肺炎具有较好的临床疗效；治疗肺炎支原体肺炎具有较好的临床疗效。1.2抗炎作用痰热清对小鼠急性炎症的产生与大鼠慢性炎症增生有明显的抑制作用。研究证明痰热清能有效预防严重性急性放射性肺炎的发生，推迟放射性肺炎的发生时间，对减轻放射性肺损伤、提高生存质量、保证放疗的顺利进行具有积极意义；痰热清可通过拮抗炎症介质，如TNF-α、IL-1、IL-6，能有效地降低肺及全身炎性反应，使伤后肺水肿减轻，改善氧的通气功能，提高氧分压，降低呼吸频率，使患者尽早脱离呼吸机，提高治愈率。1.3抗病毒作用痰热清可明显降低以鸡胚法检测的流感病毒血凝素滴度。在体内流感病毒感染保护性试验表明，痰热清在一定范围内能降低流感病毒对小鼠的致死率。临床研究结果证明痰热清对麻疹合并肺部感染疗确切；治疗病毒性肺炎，能明显减少啰音，缩短病程，提高治愈率，安全可靠；治疗流感病毒A、流感病毒B、腺病毒急性上呼吸道感染疗效较满意。2.解热作用痰热清对内毒素致热家兔在一定时间内能够降低发热体温，对酵母致热大鼠在一定时间内能够降低发热体温。临床研究证明痰热清治疗非感染性外科手术后吸收热疗效确切，其机制可能是痰热清抑制炎症反应，减少或阻止了内毒素致热源的产生和释放。3.祛痰、镇咳作用痰热清能增加小鼠气管内酚红排出量，表明有一定的袪痰作用。对氨水与SO2致咳小鼠，使用痰热清可观察到小鼠出现咳嗽反应的潜伏期延长，表明有一定的镇咳作用。临床上，痰热清清热袪痰、镇咳作用明显，可以良好地控制患者咳嗽、咳痰等症状，应用于慢性支气管炎急性发作患者，可迅速缩短病程，提高临床治愈率。