DB4113T 057-2024 奶山羊鲜精人工授精技术规范

—2024奶山羊鲜精人工授精技术规范2024-02-01发布2024-03-05实施南阳市市场监督管理局发布—2024I目次前言.................................................................................II1范围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语和定义.........................................................................14种公羊配种前的准备.................................................................15人工授精站的设备条件...............................................................26人工授精前的准备...................................................................27采精...............................................................................38精液品质检查.......................................................................39精液的稀释.........................................................................410精液保存、运输....................................................................411输精..............................................................................412记录工作..........................................................................4附录A（资料性）常温保存稀释液配方...................................................6附录B（资料性）种公羊精液品质检查登记表.............................................7附录C（资料性）母羊输精记录登记表...................................................8—2024II前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由南阳市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：河南健羊牧业有限公司、西北农林科技大学、河南牧业经济学院、西峡县农业农村局。本文件主要起草人：闫志浩、余世锋、史怀平、袁慧、田中、赵娟、朱春梅、王晓琳、赵毅、刘莹、杜翼虎、李君、杨春侠、杨方外、刘晓、隋元成、杜明、齐宝其、李娜、刘玉林、陈良松。—20241奶山羊鲜精人工授精技术规范1范围本文件规定了奶山羊人工授精技术中人工授精站的设备及条件、种公羊配种前的准备，人工授精过程中采精、精液品质检查、稀释、输精及其精液保存运输。本文件适用于奶山羊鲜精人工授精技术操作。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。射精量每次采精所采得的种公羊精液量，单位为mL。精子密度每mL精液中精子数量。有效精子数有效精子数=精子密度×精子活力×输精剂量。精子活力在37℃条件下直线前进运动精子数占总精子数的百分率。精子畸形率畸形精子占视野中总精子数的百分率。4种公羊配种前的准备种公羊选择人工授精用的种公羊经综合鉴定，均应达到一级以上，符合种用标准。种公羊的等级一般应高于母羊的等级。青年公羊调教对于初次用于配种的青年种公羊，须经调教，使其习惯于假阴道采精。—20242种公羊采精训练种公羊在配种前三周应开始采精，第一周可隔三日采精一次，第二周隔二日采精一次，第三周隔一日采精一次，以提高种公羊的性欲和精液品质。5人工授精站的设备条件人工授精操作室5.1.1采精室和输精室面积为10㎡～12㎡。要求地面平整，光线充足，室内应有1～2个输精架。5.1.2精液处理室面积为8㎡～10㎡。要求屋顶、墙壁、地面平整。室温应保持在20℃左右。种公羊舍环境干燥，小圈舍10㎡左右，饲养2-3只种公羊，并有15㎡～20㎡的运动场。待配母羊舍应与输精室相连通，其面积可根据母羊群大小来决定。6人工授精前的准备精液稀释液的配制6.1.1现用稀释液取自产羔2周以上的健康母羊的新鲜奶，经水浴（94～95）℃/消毒15min，降温至35℃～40℃，去除表面奶皮后，加入青毒素1000IU/mL和链霉素1000IU/mL。6.1.2常温保存稀释液稀释液配方见附表A。药液的配制6.2.1酒精及酒精棉球。6.2.20.35‰新洁尔灭溶液。6.2.3润滑剂：取白色医用凡士林二份和液体石蜡油一份混合。6.2.4生理盐水棉球。人工授精器械的洗涤6.3.1人工授精所用器械在每次用完以后，均应彻底洗涤干净，特别是假阴道内胎的油渍及输精器内残留的精液，最后再经清水和蒸馏水各冲洗一次，保持清洁、干燥，存放于具有消毒功能的干燥箱内。6.3.2假阴道内胎、玻璃棒、温度计、金属镊子需用75%酒精棉球擦拭消毒。6.3.3集精杯、稀释液、生理盐水棉球、毛巾、纱布、保存运输精液用的玻璃容器需采用高压蒸馏消—20243毒，115℃消毒30min。6.3.4输精器需经高压蒸汽消毒。当连续给多只母羊输精时，每使用一次，输精器的前段需用75%酒精棉球由前向后擦拭消毒，切勿将酒精挤入输精器内，待酒精干燥后，再用生理盐水棉球擦拭，方可用于另一只母羊输精。6.3.5每次使用的开膣器用新洁尔灭（37℃）溶液清洗干净，之后用生理盐水棉球擦拭，再供另一只母羊输精使用。6.3.6凡是接触精液的器械，如假阴道内胎、集精杯、输精枪、保存运输精液用的容器均应严格消毒，用经灭菌的稀释液冲洗两次，以保持精子的适宜环境。7采精种公羊与台羊的准备7.1.1采精之前，用温热湿毛巾将种公羊阴茎包皮周围擦拭干净。7.1.2选择发情的健康母羊作为台羊，或利用假台羊采精，台羊外阴部应经擦拭消毒，种公羊爬跨以便假阴道采精。假阴道的准备假阴道夹层内注入50℃～55℃、150mL～180mL温水。层内注入适量空气，以使假阴道采精口形成三角形。用经过消毒的温度计检测假阴道内腔温度，以达到39℃～42℃为宜。用玻璃棒蘸取润滑剂，涂抹于假阴道内胎前二分之一段。采精操作采精员蹲于台羊右侧，右手持假阴道与地面成35～40度夹角，紧靠于台羊臀部，当种公羊爬跨于台羊背上并伸出阴茎时，采精员用左手轻握阴茎包皮，将阴茎导入假阴道内。采精完毕后，立即将假阴道竖起，排除空气，取下集精杯，盖上集精杯盖，送往精液处理室。采精频率种公羊每天采精1～2次。每次采精后应间隔4h，再进行第二次采精。8精液品质检查精液的感官检查正常精液为白色或乳黄色，呈云雾状，无味或略带腥味。凡带有腐败臭味，出现红色、褐色及绿色的精液均不可用于输精。精液的显微镜检查8.2.1密度、活力8.2.1.1在显微镜200～400倍下观察，一般采用10级评分方法评定精子活力，以呈直线前进运动的精子数占全部精子的百分率来评定。如果100%的精子呈直线运动评为1.0；90%的精子呈直线运动评为0.9，依此类推。如果精子回旋运动记以“旋”，而呈摆动的精子应记以“摆”；如果全部精子不活动则记以“死”。新鲜精液精子活力一般在0.7～0.8。—202448.2.1.2在100倍显微镜视野内布满密集的精子，精子间空隙很小，很难分清单个精子的活动情况的精液定为“密”级；如果精子间空隙相当于1～2个精子的长度定为“中”级；如果显微镜视野内精子稀疏地散在视野中，精子间空隙很大，彼此间距在3个精子以上的长度，定为“稀”级。8.2.2精子数在显微镜下用血球计数板准确地计算出每毫升精液的精子数。通常每次射精量精子总数为15亿～60亿。9精液的稀释鲜精通常利用羊奶、生理盐水或稀释液(附录A）进行稀释，比例为1：（2～4）倍为宜。调整稀释液的温度应与原精液温度相同，稀释时应将稀释液缓慢地注入原精液，避免精子伤害。精液稀释后，评定精子活力，以检验稀释效果。10精液保存、运输精液保存集精杯作好标记，注明种公羊号、采精时间、密度、稀释倍数、精液量及其活力。长途运输精液的保温瓶周围放置冰水袋，使精液低温保持在2℃～5℃。精液瓶需用纱布或棉套包裹，使精液温度缓慢下降，并稳妥安置于保温瓶内。精液运输精液在运输过程中，严防剧烈振荡，并尽可能缩短途中运输时间。精液送达输精点，输精时再从保温瓶中取出，在室温下使精液温度升高至18℃～25℃，然后放入35℃～37℃温水中升温。经运输和保存的精液，需再经精液品质检查合格后，方能用于输精。11输精母羊输精准备母羊经发情鉴定及健康检查后，才允许给予输精。母羊输精前，外阴部应清洗干净，以0.35‰新洁尔灭溶液或酒精棉球擦拭消毒，等干燥后，再用生理盐水棉球擦拭。输精操作将经过消毒的开膣器轻缓地插入母羊阴道，打开阴道后，寻找子宫颈外口，再将输精器缓慢插入子宫颈外口内，深度0.5cm～1.0cm。每头份的输精量，原精液0.05mL～0.1mL，稀释后精液0.1mL～0.2mL。每头份输精量中直线前进运动的精子数不少于7000万个，精子活力达0.7以上。母羊输精次数，可采用一次试情，两次输精，即早晨试情一次，发情母羊即当时给予输精，下午再输精一次。第二天下午再试情，如果羊继续发情，可再行输精一次。输精器及开膣器在每只母羊使用后，须经消毒才允许为另一只母羊输精。输精母羊须作好记录，并给予标记，便于识别。12记录工作—20245人工授精站及输精点做好种公羊采精记录及母羊配种繁殖记录，记录表见附录B和附录C。各项记录必须准确，并定期进行统计分析。—20246AA附录A（资料性）常温保存稀释液配方常温保存稀释液配方见表A.1、A.2。表A.1常温保存稀释液配方一成分及单位用量脱脂羊奶/mL100青霉素/IU100000链霉素/IU100000表A.2常温保存稀释液配方二成分及单位用量蒸馏水/mL100Tris/g4果糖/g2柠檬酸钠/g1.4卵黄/mL25青霉素/IU100000—20247BB附录B（资料性）种公羊精液品质检查登记表种公羊精液品质检查登记表见表B.1。表B.1种公羊精液品质检查登记表采精日期种公羊号采精员采精量/mL颜色气味pH活力精子密度亿/mL畸形精子率（%）总精子数/亿稀释后总量/mL稀释液量/mL头份数检验员备注—20248CC附录C（资料性）母羊输精记录登记表母羊输精记录登记表