1/59藻油DHA研究报告目录1.藻油DHA的生产情况..........................................................................................31.1.生产工艺和方法....................................................................................................31.2.藻油DHA的主要生产厂家...................................................................................7《发酵生产DHA的方法》........................................................................................102.藻油DHA的市场情况........................................................................................282.1.微藻DHA的应用.................................................................................................282.2.微藻DHA前景及展望.........................................................................................313.藻油DHA有关专利情况.....................................................................................343.1.DHA高产菌株及其应用......................................................................................343.2.一种双鞭甲藻发酵生产DHA的方法.................................................................343.3.一种固料培养裂殖壶菌液体发酵生产DHA的方法.........................................353.4.一种富含DHA微藻粉及其制备方法.................................................................363.5.一种从裂殖壶菌提取并精制富含二十二碳六烯酸的方法..............................373.6.从双鞭甲藻发酵液中提取DHA不饱和脂肪酸的方法.....................................383.7.发酵生产DHA的方法.........................................................................................393.8.一种利用混合碳源发酵裂殖壶菌生产DHA的方法.........................................393.9.从微生物发酵的DHA油脂中分离纯化DHA乙酯的方法...............................403.10.一种非溶剂型高纯度DHA藻油的制备方法...................................................413.11.一种裂殖壶菌发酵液破壁提取其胞内油脂的方法........................................423.12.一种从藻类和真菌细胞中破壁提取DHA的方法...........................................423.13.高密度培养裂殖壶菌发酵生产DHA的方法...................................................433.14.一种高载油量的DHA藻油微胶囊粉及其制备工艺.......................................442/593.15.一种从海洋微藻发酵液中提取DHA的方法...................................................453.16.富含DHA及DPA的油脂及其制备和应用......................................................463.17.含有双长链多不饱和脂肪酸的油脂及其制备和应用....................................473.18.一种萃取分离海洋微藻发酵液提取DHA的方法...........................................483.19.一种适度加工的DHA微藻油脂的制备方法...................................................483.20.循环利用裂殖壶菌发酵清液生产DHA油脂的方法.......................................493.21.干法制取DHA微藻油的方法...........................................................................503.22.用寇氏隐甲藻工业化发酵生产二十二碳六烯酸的方法................................513.23.用裂殖壶菌发酵生产二十二碳六烯酸的方法................................................513.24.一种海洋真菌裂殖壶菌(Schizochytrium)LX0809及其工业应用....................524.藻油DHA有关法规情况.....................................................................................535.结论与建议.........................................................................................................556.参考资料来源.....................................................................................................583/591.藻油DHA的生产情况1.1.生产工艺和方法2010年3月9日卫生部发布的《关于批准DHA藻油、棉籽低聚糖等7种物品为新资源食品及其他相关规定的公告》的附件中,DHA藻油的生产工艺简述为“以裂壶藻(或吾肯氏壶藻或寇氏隐甲藻)种为原料,通过发酵、分离、提纯等工艺生产DHA”。微藻DHA是从海洋藻类筛选纯化得出优质的藻种,利用生物工程技术于不含污染物且可食用的营养液中进行规模化培养,能有效避免外界污染的机会,是纯天然、安全的植物性DHA。目前在发达国家,孕妇、哺乳期妇女和儿童食品中的DHA主要来源于微藻油。藻类可以通过自身发酵合成DHA,因此随着现代科技的发展,人们将海藻养殖在大型不锈钢发酵罐中,这种发酵罐是药品、食品和生物技术产业中所常用的。依照良好生产规范(cGMP),全程控制整个生产过程,保证了藻类干净、环保、不受污染,从而保证生产出安全、高效、无污染的高品质DHA。图片来源:百度文库=Ek1iWzhsIQxXd4mD1RiIG8nU-mQn390-Qgh_pufB8WjETYxnJq6iNOvD_fdoHAF2UMIMgtnroHvggY4-rxAVdr9MvUJ-K0UgfRtSK-EF2ru4/59如何高效地从鱼油及其他海洋动植物中分离、浓缩DHA,是脂肪酸开发应用中的难点和关键之一。目前,实验室和实际生产中应用的和分离方法有低温分级法、尿素包合法、溶剂法、成盐法、分子蒸馏法、超临界气体萃取法、脂酶法及高效液相色谱法等。下面简要介绍其中几种重要的分离方法。(1)低温分级法利用不同的脂肪酸在过冷有机溶剂中的溶解度差异来分离浓缩DHA。将鱼油溶解在1~10倍的无水丙酮中,并冷却至-25℃以下。混合液的下层即形成含有大量饱和脂肪酸及低度不饱和脂肪酸结晶,而上层含有大量高度不饱和脂肪酸的丙酮溶液。将混合液过滤,滤液在真空下蒸馏除去丙酮即可得到DHA含量较高的鱼油制剂。为了提高分离效果可在无水丙酮中添加少量亲水性溶剂如水或醇类。(2)溶剂提取法利用不同脂肪酸的金属盐、在某种有机溶剂中的溶解度差异来分离浓缩DHA。将乙醇、鱼油及NaOH按一定比例混合,然后力热使鱼油皂化。皂化后的混合液经压滤分别得到皂液及皂粒。皂液在搅拌下加人H2SO4至PH为1~2。分离上层粗脂肪酸乙醇混合液,加热回收乙醇,并反复水洗祖脂肪酸至中性,即得DHA含量较高的精制鱼油。(3)尿素包合法脂肪酸与尿素的结合能力取决于其不饱和程度。脂肪酸的不饱和度越高、则与尿素的结合能力越弱。依此原理即可将饱和脂肪酸、低度不饱和脂肪酸与高度不饱和脂肪酸分离开来。在鱼油中加人尿素甲醇(或乙醇)后加热混合、过滤并用适当溶剂萃取滤液,即得萃取液脱去溶剂、真空干燥后即得到DHA含量较高的精制鱼油。尿素包合法是一种比较简便有效的分离方法,但在实际生产中应用时,存在溶剂损耗大、排水和因尿素添加物而引起的废物处理等问题。为此,Kazuhiko开发了一种尿素包合与连续精馏相结合的分离方法,既解决了上述问题,又避免了鱼油因与空气接触而氧化,还可以提高分离效果,适合工业化生产。(4)超临界气体萃取法即将含有DHA的鱼油溶解于超临界状态的CO2中,通过改变温度和压力,达到分离DHA的目的。此法能分离出高纯度的DHA,但对碳数相同而双键数不同的脂肪酸的分离效果较差。为此,可利用银离子能与双键络合形成可逆的络合物的特性,在超临界CO2萃取装置中增加1支AgNO3-硅酸色谱柱,达到将碳数相同而双键数不同的脂肪酸分离的目的。上述分离方法同样适用于通过选择和培养某些真菌和海藻来提取DHA的途径。目前从海洋微藻中提取多不饱和脂肪酸的工艺还处于实验室阶段,目前主要采取以下的步骤:藻体收集——冷冻干燥——脂肪酸萃取——脂肪酸转酯化——分离——纯化。另外,安阳市晶华油脂工程有限公司与湖北福星生物科技有限公司联合发表的《用微生物5/59发酵法提取DHA工艺及技术简介》一文称,“用正己烷溶剂法生产DHA是一个成熟的工艺,我们已在国内承建3家企业,各家均取得了良好的经济效益和社会效益。”其萃取工艺如下:6/597/591.2.藻油DHA的主要生产厂家表1-1藻油DHA主要生产厂家汇总统计表序号公司名称注册资本(RMB:万元)年营业额(RMB:万元)藻油DHA形态藻油DHA年产能(吨)藻油DHA用途藻油DHA报价(元/千克)产品藻油DHA含量(%)有关藻油DHA的专利1浙江亿叠生物科技有限公司8000不详油剂、粉剂二十二碳六烯酸(DHA藻油)2000吨、DHA藻油粉3000吨婴幼儿奶粉、食用油、饮料、保健品、药品以及化妆品制造等领域。7%含量的DHA复配藻油粉(终端产品)约1817。粉剂7%、10%、25%;油剂35%无2山东悦翔生物有限公司6000700-1000粉剂、油剂2100吨