无菌工艺模拟试验--SFDA诺华疫苗王董明

CCD药品认证管理中心无菌工艺模拟试验诺华疫苗王董明药品认证管理中心内容1.培养基灌装的技术要求2.培养基灌装实施要点3.结果解释和偏差调查药品认证管理中心无菌工艺模拟试验定义无菌工艺模拟试验ProcessSimulationTesting（PST）培养基灌装MediaFill采用培养基代替药品进行无菌灌装对无菌工艺进行验证。此模拟工艺称之为“培养基灌装”药品认证管理中心进行培养基灌装的目的验证一个无菌工艺对无菌工艺过程无菌保证水平的综合评估（设备、人员、操作、灭菌过程、环境…）对无菌操作人员进行资格确认确认进行重大变更后对无菌工艺的影响作为问题调查的手段药品认证管理中心培养基灌装测试的频率初始验证：每班次连续做3批验证随后每半年针对不同班次/工艺进行一次再验证所有日常操作人员每年都必须参加一次培养基灌装验证空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验偏差调查的手段药品认证管理中心培养基灌装测试的频率影响无菌灌装过程中无菌保证水平的重大变更需要进行培养基灌装判断：1.灌装层流改造2.胶塞进料装置变更3.终端无菌过滤器改变位置4.灭菌程序变更药品认证管理中心培养基灌装批量培养基灌装容器的数量应当足以保证评价的有效性。批量较小的产品，培养基灌装的数量应当至少等于产品的批量批次量5000瓶，全批量批次量5000瓶，通常5000~10000瓶手工灌装VS隔离器无菌生产工艺跨班次生产，大批量生产药品认证管理中心灌装数量例1：某冻干产品，冻干机容量为30,000瓶，分布在九个层板上，请问：较合理的一次培养基灌装数量为多少？如是初始验证，如何考虑不同层板的分布？例2：某冻干产品为人工灌装，共有三个操作人员具有无菌灌装资格，批量为3000瓶，请问：此种情况较为合理的一次培养基灌装数量为多少？药品认证管理中心生产线运行速度高速运行比较适用于评估需要频繁干扰操作的生产工艺或手工操作多的生产工艺，低速运行则一般适用于评估无菌产品、容器/胶塞在无菌区暴露时间比较长的工艺。药品认证管理中心灌装速度、瓶子尺寸、灌装量几个原则速度慢，产品暴露时间长；速度快，有时造成较多的干扰瓶子大（包括敞口大小），灌装速度慢尽量按产品实际灌装体积，如不可行，体积应能充分接触所有表面、并足够支持微生物生长举例：多规格的瓶子-最慢的速度，最大的瓶子规格;最小的瓶子规格，最快的速度单一规格的瓶子–正常或略慢速度药品认证管理中心11最长允许的灌装时间（如考察操作人员疲劳操作风险）有代表性的正常性操作活动的数量、种类和复杂性，非常规的干扰和各类突发事件（如维修、灌装中断等）冻干过程无菌设备的装配最差条件挑战药品认证管理中心12人员数量及其活动，换班，休息，更衣等具有代表性数量的无菌操作（如添加容器，密封件，无菌原料成分）或者转移设备无菌连接和拆卸样品的无菌收集生产线速度和模具的规格各个工艺步骤的最长持续时间挑战最差条件挑战药品认证管理中心13应当根据产品的剂型、培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基TSB或FTM（澄清）某些情况下应该考虑使用厌氧性培养基应该进行促菌生长实验•标准菌株•环境分离菌培养基选择药品认证管理中心14应当根据产品的剂型、培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基TSB或FTM（澄清）某些情况下应该考虑使用厌氧性培养基应该进行促菌生长实验•标准菌株•环境分离菌培养基选择药品认证管理中心15在20-25℃条件下培养7天(培养真菌)，30-35℃下7天(培养细菌)确保其内壁和瓶塞充分接触培养基培养基促生长试验应由有资质的人员进行检查无缺损的瓶均应该培养，任何不作培养的瓶子都应说明不作培养的原因要进行物料平衡计算培养及读数药品认证管理中心培养基灌装的先决条件洁净室/设备的验证状态确认经过重大维修或变更后进行了生产线的运行确认或性能确认参与培养基灌装的人员接受了培训无菌操作洁净室行为培养基灌装方案明文规定的工艺过程及最差条件药品认证管理中心培养基灌装方案设计分析工艺流程，确定风险因素绘制流程图通过分析确定可能造成产品污染的风险因素灌装时间干扰活动（时间、次数、种类包括停机、维修、调整）冻干过程设备装配（如灌装前的装机）人员数量及其活动无菌操作（如各种无菌部件操作、产品转移）不同班次轮换，着装更换生产中出现的无菌管道连接无菌样品取样灌装速度重量检查容器密闭性（大小、种类、与设备匹配程度）某些特殊操作（如进行清洁前的操作）药品认证管理中心灌装过程流程图灌装部件装配管道排液正式灌装灌装量检查添加胶塞处理倒瓶人员进出班次轮换设置灌装参数停机维修环境监测收集转移冻干压塞暂存压盖人员操作人员操作时间时间风险因素灌装速度灌装时间长短干扰操作及次数人员数量停机操作……转移操作时间暂存位置时间时间药品认证管理中心干扰操作种类：任何进入百级层流的操作都为干扰操作，应包括所有类型的干扰操作，常规的（灌装线装配，称量调节，加胶塞，处理倒瓶，取样，环境监测）非常规的（设备故障，灌装线堵塞，轨道调节，拆卸/替换破损的部件）数量：干扰的次数应该不少于正常生产时发生的次数药品认证管理中心人员人数：模拟无菌区可能容纳最多的人数活动：最多换班次数，不同时间段（日班和中夜班），进行正常操作频率：无菌区工作人员至少每年参与一次成功的培养基灌装药品认证管理中心环境监控和微生物限度控制制定环境监测计划，综合形成书面方案如何制定环境监测计划其他一些因素的考虑方案的批准制定培养基灌装过程的微生物负荷的监控计划,便于偏差调查药品认证管理中心环境监控方案应用风险评估的方法确定关键监控点给产品构成最大风险的位置，如产品暴露位置、直接接触表面人员按实际需要选择合适的监测方法空气浮游菌沉降菌接触碟/棉签法合理制定控制标准体现全面监控、动态监控药品认证管理中心干热隧道胶塞漏斗灌装站风险点-产品暴露区域瓶子裸露区灌装站区域胶塞裸露区至冻干机药品认证管理中心干热隧道胶塞漏斗灌装站例如：在左、中、右各设置一个连续粒子监测点在灌装站左右设置两个浮游菌取样点在左、中、右各设置一个沉降菌取样点在轨道、灌装针头、胶塞盘各处设置多个表面取样点可以参考ISO14644药品认证管理中心25文件记录：过程控制检测和实验室检测结果环境和人员监测结果设备功能（批报警记录，过滤器完整性测试）人员干扰操作、偏差、中断等--发生时间和持续时间培养基报废记录生产线清场记录过程录像培养基灌装过程记录药品认证管理中心26无菌生产区域管道系统冻干机过程中的微生物泄露培养基的撤出和报废应当采取措施保证验证不能对生产造成不良影响培养基灌装结束后的清场和清洗药品认证管理中心风险点解释控制方法配制溶液的注射用水温度高于６０℃高温会抑制微生物生长将配制培养基的注射用水冷却到室温，在室温下（20-25℃）配制正常生产溶液ｐＨ值偏高或偏低酸性或碱性环境不利于微生物生长培养基的pH调整到适合微生物生长的范围配制好的溶液在低温下保存低温会抑制微生物生长培养基在储存容器中常温保存抑菌影响分析---物料准备，储存过程抑菌因素影响分析药品认证管理中心风险点解释控制方法生产过程中使用惰性气体（如氮气）保护产品大多数需氧微生物，惰性气体有一定的抑菌作用用压缩空气或空气来代替惰性气体培养基灌装量偏少西林瓶内壁不能被完全接触，微生物不能生长10ml西林瓶灌装至少2-4ml培养基，以保证足够量培养基用于培养抑菌影响分析---灌装抑菌因素影响分析药品认证管理中心风险点解释控制方法对设备的清洗、消毒和灭菌消毒剂会杀灭微生物对设备的清洗、消毒和灭菌在灌装前后进行，灌装前进行消毒要避免设备上的消毒剂残留。正常生产时消毒剂（如喷洒消毒酒精，对操作人员手部消毒）的使用，消毒剂会杀灭微生物对于模拟试验过程中消毒剂（如喷洒消毒酒精）的使用，应该注意不能超出正常生产时的使用频率，不能将消毒剂直接接触到培养基上。班次轮换，清场消毒消毒剂会杀灭微生物对于两班次灌装，中间不进行消毒清场。抑菌影响分析---中间过程抑菌因素影响分析药品认证管理中心风险点解释控制方法抽真空过低真空度有抑菌作用。过低真空度还会导致培养基失水。灌装好的西林瓶放入冻干机，放置十小时以上模拟冻干过程。但不进行抽真空的模拟操作，保持冻干机内正常气压低温冷冻低温会抑制微生物生长不进行冷冻操作，保持常温抑菌影响分析---冻干抑菌因素影响分析药品认证管理中心培养基灌装的接受标准培养基模拟试验的目标是不出现长菌，且遵循以下原则：1.灌装少于5000支时，不应检出污染品；2.灌装在5000至10000时：(1)有1支污染需进行调查，并考虑重复培养基灌装试验(2)2支污染需进行调查，并可即视作再验证的理由3.灌装超过10000支时：(1)1支污染需进行调查(2)2支污染需进行调查，并可即视作再验证的理由4.发生任何微生物污染时，均应进行调查。药品认证管理中心培养结果阳性调查当培养基灌装出现阳性结果时，不管是否符合合格标准，都必须进行调查，科学评估工艺的可靠性以及上市产品可能存在的风险。发现任何阳性结果样品均属应进行调查。分离到的微生物应鉴别到种。调查过程中应详细分析可能的产生阳性结果的原因。对于超出标准的结果，应当在调查清楚原因后再次进行培养基灌装。药品认证管理中心培养结果阳性调查如果未达到接受标准:生产需要被暂停。在工艺重新确认前的产品不得放行。在培养基灌装之后生产的到下一次成功的培养基灌装之间的产品都需要被进行回顾，评估其无菌失败的风险。在该次培养基灌装和上一次成功的培养基灌装之间的产品也需要被进行回顾，评估其无菌失败的风险。必要时，需制定纠偏和预防性措施，并进行工艺的重新确认。药品认证管理中心污染调查举例发现污染瓶的调查应该从人、机、料、法、环各个方面进行调查。（1）生产环境监测数据（粒子、浮游菌、沉降碟等）（2）对人员的监测结果（3）高效过滤器的完整性检测数据（4）层流台性能数据（气流流速、压差记录等）（5）生产房间监控数据（空气流向、工作台面气流方向速度）（6）人员培训情况，操作资质和能力（7）干扰模拟的执行情况（8）无菌室生产用具和其他相关物品的储存情况药品认证管理中心污染调查举例（9）微生物鉴定结果，至少要鉴定到属。有条件的话可以鉴定到种以帮助确定来源（10）清洁消毒流程的执行情况（11）设备仪器的校验结果（12）生产前后产品过滤器的泄露测试数据（13）生产过程发生的偏差（14）设备的CIP/SIP的情况（15）培养基的培养研究（16）生产线和培养基的历史数据分析药品认证管理中心污染调查举例根据调查分析确定可能引起污染的原因，针对性制定有效措施。所有调查行动、改进措施和结果都应当形成正式文件记录。药品认证管理中心培养基灌装失效培养基灌装试验结果被认作无效的情况不应该频繁发生，更不能直接将失败的培养基灌装结果视为无效在符合明确的书面规程要求的情况下才能做出试验无效的判定，此时，应给出支持文件并充分说明理由，并且在实际生产中遇到类似情况时也应同样处理。失效=无测试注意:如果不可接受的情况发生，最好先停止培养基灌装，再判断是否是失效.药品认证管理中心培养基灌装失效以下是可能造成培养基灌装失效结果的问题:培养基促生长试验失败在无菌生产区域的物理条件发生问题(例如断电、HEPA发生泄漏)培养基灌装过程中一些违反规程的操作，这些操作可能造成批生产中止/报废培养基灌装可能因为上述的任何一个或所有类似其他原因造成失效,这些问题可能造成灌装的中止或失效。但是，培养基灌装中止的事件需要有详细的说明记录。