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第七节园林植物的组织培养育苗•概述1繁殖速度快2繁殖脱毒苗3不受季节限制组织培养繁殖的基本原理•细胞全能性•植物体中每个完整细胞核的细胞，都具有该植物的全部遗传信息和产生新的完整植株的能力。•体细胞（植株的一部分）完整植株组培条件•组培室的建立准备室接种室培养室植物组织培养设备1.灭菌设备：高压蒸气灭菌锅用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。工作原理：在密闭的蒸锅内，0．1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。使用方法：首先检查灭菌锅内是否有水，而且水刚好淹住加热器，然后放入灭菌材料，对称拧紧灭菌锅上的螺丝，关闭放气阀通电。待压力上升到0．05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。三次放气后，关阀再通电，压力表上升达0．1-0．15Mpa时，维持20min后，断电，待压力降至零时，打开入入气阀，取出灭菌材料。注意事项：①对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间；②对于一些布制品，如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好，高压灭菌20-30min；③高压灭菌前后的培养基，其pH值下降0.2-0.3单位。因此，调PH值时，可适当调高0.－0.3个单位。2.接种设备：无菌超净工作台用于培养材料的消毒及接种。使用前，将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启，灭菌15min后，关闭杀菌按钮，打开照明按钮，即可在上面进行操作。电炉推车灭菌器接种器具酒精灯培养瓶封口膜3.培养设备①带日光灯的培养架，主要用于接种后材料的培养。②恒温箱：又称培养箱，可用于原生质体和酶制剂的保温，也可用于组织培养材料的保存及暗培养。③摇床与转床：在液体培养基中，可改善培养基中的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获得单个细胞。但注意要设定适合的温度及转速。4.驯化设备①温室②防虫网室5、其它辅助设备①培养基灌装机及洗瓶机③除湿机：使培养室的湿度保持在定的范围内。②空调机：用于接种室和培养室温度的控制。④烘箱：用于干燥洗净后的玻璃器皿，还可用80℃的温度烘干组织培养植物材料以测定干物质。⑤冰箱：用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的储藏，细胞组织和试验材料的冷冻保藏，以及某些材料的预处理。⑥纯水机与蒸馏水发生器：是实验室必备的仪器。⑦天平和显微镜：天平包括分析天平，电子天平，药物天平等，用于制备母液时培养基组成成分的称取。如一些需要量少的激素和微生素类物质，天平的精确度要到0.0001g，这就要求精确度更高的分析天平。显微镜包括解剖镜，生物显微镜，倒置显微镜等。如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。⑧酸度计：用于校正培养基和酶制剂的PH。培养基成分•基本组成•无机元素–1大量元素：NPKCaMgS–2微量元素:FeBZnCuMoCl•有机成分–维生素肌醇氨基酸•糖–蔗糖葡萄糖果糖•琼脂（0.5~0.8%）–琼脂粉–琼脂条•植物生长调节剂•细胞分裂素类–KT6-BAZT•生长素类–IAAIBANAA2,4-D•赤霉素类–GA3•天然添加物–椰子汁酵母提取液土豆汁麦芽提取物等•水–蒸馏水纯净水–自来水•pH值（5.6~5.8）–1mol/LHCl或NaOH•其它–吸附剂（活性炭）–抗氧化剂（Vc柠檬酸等）培养基种类•MS培养基•Miler培养基•Nitsch培养基•H培养基•White培养基•N6培养基培养条件•温度：25℃左右•光照：3000lx~10000lx•时间：12~16h操作技术组培苗工厂化生产的经营与管理一、经营思想•经营思想是从事经营活动、解决经营问题的指导思想，它是随着生产力发展而发展的。在经营思想指导下形成经营管理理论，经营管理理论用于指导生产经营实践，不断促进生产力发展。二、市场营销（一）、经营策略（二）、市场预测（三）、产品的营销1．市场需求的预测2．市场占有率的预测生产规模与生产计划1、试管苗增殖率的估算增殖率：是指植物快速繁殖中间繁殖体的繁殖率。估算试管苗的繁殖量，是以苗、芽或未生根嫩茎为单位，一般以苗或瓶为计算单位。年生产量（Y）决定于每瓶苗数（m）、每周期增殖倍数（X）和年增殖周期数（n），其公式为：Y=mXn2、生产计划的制定制定的要点：1）对各种植物的增殖率应做出切合实际的估算；2）要有植物组织培养信不过各的技术储备；3）熟悉各种组培苗的定植时间和生长环节；4）要掌握组培苗可能产生的后期效应。全年生产量=全年出瓶苗数×炼苗成活率根据植物组织培养的技术路线，拟定工艺流程：如：茎尖→表面消毒→接种诱导培养基→茎尖生长→病毒检测鉴定→培养无根小植株→培养生根→完整小植株→炼苗20-25天→移栽成活。3、工厂化生产的工艺流程成本核算与效益分析一、成本核算的方法二、效益分析1．成本核算2．产销对路3．规模生产，提高利润降低成本提高效益的措施1.掌握熟练的技术技能，制定有效的工艺流程，提高生产效率2.减少设备投资，延长使用寿命3.降低器皿消耗，使用廉价的代用品4.节约水电开支5.降低污染率，提高成品率6.提高繁殖系数和移栽成活率7.发展多种经营，开展横向联合8.商品化生产的经营管理•1、商业化经营管理思想•2、市场营销经营策略•3、市场预测：(1)市场需求预测；(2)市场占有率预测。•4、试管苗增殖率年生产量（Y）决定于每瓶苗数（m）、每周期增殖倍数（X）和年增殖周期数（n），其公式为：Y=mXn•5、生产计划的制定：全年生产量=全年出瓶苗数×炼苗成活率•6、成本核算和效益分析：1）成本核算；2）产销对路；3）规模生产，提高利润。•7、降低成本提高效益的措施。小结：