生产环境监控

内容一．洁净区环境监测1，洁净区级别标准2，洁净区的验证和监测3，洁净区环境监测方案4，环境监测仪器、设备、培养基二．趋势分析和质量回顾1，警戒限和纠偏限的设定2，趋势分析3，质量回顾三．口服药品环境监测四．环境监测结果超标案例分析五．常见问题探讨1洁净区环境监测2洁净区年度级别确认测试项目风速或风量测试换气次数高效检漏静压差测试气流方式温度相对湿度照度噪声3悬浮粒子测试沉降菌测试浮游菌测试表面微生物测试1，洁净级别及标准洁净级别悬浮粒子最大允许数/米3Atrest/静态Inoperation/动态Grade≥0.5μm≥5.0μm≥0.5μm≥5.0μmA352020352020B3520293520002900C3520002900352000029000D352000029000不作规定Notdefined新版GMP（2010修订）和EU-GMP、WHO-GMP2010建议稿标准一致。42，洁净区验证和监测悬浮粒子的要求：附录1无菌药品第九、十条1、A级区确认时的采样量不少于1m32、洁净区的动态监测悬浮粒子的动态监测关键操作的全过程，对A级区进行粒子监测A级区的监测频率、取样量，及时发现人为干预、偶发事件及任何系统的破坏B级区：类似于A级区，采样频率、采样量可以调整C级区：质量风险管理原则确定D级区：一般不作要求，（法规：必要时）对于C/D级区的自净时间应达到规定要求52，洁净区验证和监测取样量和取样点ISO14644-1B.4.2节有明确的采样量的计算公式：采样量（升）=(20/级别中最大粒子限度）×1000，显然对于A级，采样量为(20/20)×1000=1米3从上式中可见，级别要求越低，取样量就越小取样点数由B.1.1公式：取样点数,A为洁净区面积，例如10米×5米的区域，取样点应为8（取整数）取样点均匀分布，位于工作面高度注意：这里仅指在洁区划分时加以采用6ANl取样点的确定-GB洁净区（室）空气悬浮粒子、浮游菌及沉降菌的最少取样点数面积m2洁净级别10010000100000300000102~3222≥10~204222≥20~408222≥40~10016422≥100~200401033≥200~400802066≥400~1000160401313≥1000~20004001003232≥20008002006363来源：GB/T16292-16294，20107级别b浮游菌CFU/m3沉降碟（90mm）CFU/4小时c接触碟（55mm）CFU/碟5指手套CFU/手套A1111B10555C1005025－D20010050－81，洁净级别及标准微生物控制动态标准微生物的要求：附录1无菌药品第十一条监测方法有：1，空气浮游菌监测沉降菌法--被动法定量空气浮游菌采样法--主动法2，环境表面监测表面取样法（如棉签擦拭法和接触碟法）3，人员监测表面取样法（接触碟法）92，洁净区的验证和监测1，空气浮游菌监测沉降菌法--被动法沉降碟在空气中的暴露时间4小时监控整个灌装过程只能给出定性和半定量的数据应结合空气浮游菌的数据，对沉降碟的结果进行评价定量空气浮游菌采样法--主动法撞击式，离心式和膜过滤（明胶）取样仪应取一定体积的空气（取样体积应有代表性）仪器应经过校验102，洁净区的验证和监测2，环境表面监测：表面取样法应对接触产品表面、设备、地面、墙面等定期监测接触蝶法：适用于平整表面取样面积25cm2培养基略有凸起，高于碟子边缘，便于取样培养基中应含有中和剂/保护剂棉签擦拭法：适用于不规则表面取样面积~25cm2定性或定量表面样应在无菌操作结束时取以最大限度地降低无菌制造过程中关键表面污染的风险112，洁净区的验证和监测2，洁净区的验证和监测3，人员监测表面取样法（接触碟法），取样时间一般为：工作结束，离开洁净区前取样处理异常情况后（取样后重新更衣或更换手套）生产过程中随时监测特别注意：不得在刚消毒过后取样122，洁净区验证和监测每个手套(5只手指)胸口处衣帽结合处帽兜额头处靴子与工作裤接口处前臂13无菌区人员更衣确认和监测其它事项①每个受训者必须经过3次更衣试验确认合格后才能进入无菌操作区。②资格确认合格的操作员工每年需重复一次更衣试验。③当有已确认合格的人员有违反更衣程序趋向时，须重复l～3次更衣试验。④连续3次监测不合格人员，取消相关资质，需重新培训和进行更衣验证。⑤在连续10次监测中，如有4次不合格的人员，取消相关资质，需重新培训和进行更衣验证。采样点参考标准（CFU·皿）采样点参考标准（CFU·皿）手套≤3口罩≤10胸口≤5前额≤5前臂≤5靴子—裤子接合处≤5无菌区人员监测合格标准142，洁净区验证和监测3，环境监测方案洁净区应制定系统的环境监测方案，包括动态监测和静态监测。关键项目：悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物。取样计划的影响因素：产品类型、生产过程、设施/工艺设计、生产密度、人为干扰、环境监测历史数据等。取样点的选择主要取决于洁净室的设计和生产要求。环境监测计划案例。环境监测动态标准。15环境监测方案环境监控整体要求洁净区监测年度洁净级别确认日常环境监测动态监测静态监测无菌生产区A/B最终灭菌C级的主要功能间C级区域D级区域16取样区域取样频率百级或更严Class100orbetterroomdesignations1次/班毗邻百级区如万级SupportingareasimmediatelyadjacenttoClass100(e.g.，Class10，000)1次/班其它辅助区域－10万级Othersupportareas2次/周可能与产品/容器接触区域Potentialproduct/containercontactareas2次/周10万级或以下orlowerOthersupportareastoasepticprocessingareasbutnon-productcontact1次/周参考：USP34－1116从表中可以看出，美国药典中没有明确B级，但有100级、1万级、10万级甚至更低级别，划分比较灵活，按需要而定。美国药典微生物监测频率17环境监测方案环境监测案例监控区（洁净度级别）监控频率监控项目最终灭菌产品生产区域称量配料、配液（C级区）每周一次空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌[1]表面微生物灌封间（C/A级区）每周两次空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌[1]表面微生物操作者手套表面微生物轧盖间、洗塞间（C/A级区）每周一次空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌[1]表面微生物操作者手套表面微生物容器精洗区（D级区）两周一次空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌[1]表面微生物[1].每月一次18环境监测案例监控区（洁净度级别）监控频率监控项目非最终灭菌产品生产区域称量配料、配液（C/A级区）每周两次空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌[1]表面微生物无菌灌封辅助区（C级区）每周两次空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌[1]表面微生物无菌灌封间(B/A级区)每班一次每批一次空气悬浮粒子空气浮游菌空气沉降菌表面微生物操作者手套和操作服表面微生物[1].每月一次19环境监测案例监控区（洁净度级别）监控频率监控项目取样间(C/A级区)每周一次每次取样空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌表面微生物微生物实验室无菌实验室(B/A级区)每次实验空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌表面微生物操作者手套表面微生物限度检查实验室（C/A级区）每次实验空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌[1]表面微生物操作者手套表面微生物抗生素效价测定室（D级区）每周一次空气悬浮粒子[1]空气浮游菌空气沉降菌表面微生物[1].每月一次20洁净区监测的位置取样位置选择时考虑因素：哪些部位的微生物污染最可能对产品质量造成不良影响？在生产过程中，什么地点最容易长菌？哪些地方是清洁、消毒或灭菌时最难覆盖/接触或最难奏效的部位？什么活动会导致污染的扩散？在某一部位的取样操作，足以导致测试数据的差错或污染产品？取样只应在生产结尾换班时进行吗？21洁净区监测的位置应符合“GB16292-2010”~“GB16294-2010”的要求基于风险的设计监测点设置在潜在风险最大的位置a)药品b)容器c)连接处d)人流和物流经过的地方e)监测点靠近“工作高度”22注：GB16292—16294，分别是洁净区悬浮微粒子、浮游菌、沉降菌的监测。洁净区监测的位置23系统取样点环境空气（灌装线）接近敞开和/或者已灌装的容器洁净室空气最接近工作区域水使用点表面（厂房）地面、门把手、墙、帘子表面（设备）灌装线、控制面板、供胶塞的料斗压缩空气离开压缩机最远点无菌检查系统最接近真空源的接口灌装线操作人员至少要检手指印单向流（例如，单向流罩）靠近活动最多的区域示例洁净区监测的位置示例：无菌灌装线取样点应在产品或组件暴露的区域周围取样，如：在灌装针头处将产品装载入冻干腔室处胶塞供料桶无菌部件进行连接操作的部位操作人员频繁活动处（不影响生产过程）注意：靠近产品，但不接触产品的位置24粒子在线监测布置图例25123传感器低于机器，采样管伸入灌装操作区内粒子在线监测布置图例灌装后冻干前监测点位置：药瓶是半封闭状态（敞口）保证灌装后，冻干前的环境区域是受控的。正确的取样点位置：靠近传送带。26浮游菌、沉降菌取样点沉降菌、浮游菌：监控点位置，高度一般为离地80cm左右，或操作台面。浮游菌、沉降菌监控点的设置根据生产工艺及污染风险综合考虑。27洁净区表面微生物取样点C级区取样点：一般为地面、墙面及操作人员十指手套。对C级下的局部A级区取样宜在生产结束后进行，避免造成污染。地面取样墙面取样灌装机（A级）产品转移（A级）28洁净区表面微生物取样点B级区接触碟取样位置应能及时发现潜在污染风险，在受污染可能性较高的位置布点。无菌分装设备门进出B级区门把手仪器、设备操作键、触摸屏等传递窗门把手29-30-文件记录中应包括：–监测时间和日期–测试方法的参考依据–测试点的活动情况–设备标识–位置–卫生级别–标有取样点的区域图–取样点–测试结果–评估人员–结果读取日期–警戒/纠偏限度–培养温度和培养时间文件和记录30-31-文件记录中应包括:–培养基有关信息–污染菌鉴别结果–复核人–数据报告–历史数据回顾–变更控制系统–设备校验日期–各限度的确定原理与具体分析–调查/纠偏措施的文件记录文件和记录314，环境监测常用仪器/设备/培养基32沉降菌/浮游菌直径：90mm浮游菌监测AirIDEAL3P100升/分悬浮粒子监测PMSLasairⅡ28.3升/分表面微生物监测直径：55mm2500模块化控制器ModbusTCP/IP真空泵Airnet5104-20MA信号HUB6180XIO欧陆显示器工作站粒子在线监测仪33可以增加浮游菌采样空气悬浮粒子连续监测系统的要求：欧盟GMP附录1、中国GMP（2010）附录1-在确认级别时，应使用采样管较短的便携式尘埃粒子计数器，避免≥5.0μm悬浮粒子在远程采样系统的长采样管中沉降。在单向流系统中，应当采用等动力学取样头。欧盟GMP附录1-使用远程采样系统时，必须根据粒子在管路中的损失来考虑管长和管子的弯曲半径PIC/SPI032-2-强调≥5.0μm悬浮粒子在远程采样系统的长采样管中沉降效应粒子在线监测注意点34适用于圆弧表面取样外盖带锁扣35表面带有锁扣，可以避免因取样结束后平皿意外跌落等麻烦具有一定的韧性，可以进行适当弯曲，适合不规则表面或圆弧取样预制培养基特殊预制平板使用前擦拭后36预制培养基无菌擦拭棒SCD培养基颈部保护套拭子使用方法：1、拔除下端保护套，取出拭子用无菌液体润湿2、擦拭取样表面（一般为25cm2）3、取样结束后将拭子放回保护套4、将擦拭棒颈部掰断，上端SCD培养基流入保护套中并浸没拭子5、将整个擦拭棒放入培养箱