第一章中药鉴定学的发展史1古代中药鉴定知识历代重要本草著作:1、《神农本草经》我国已知最早的药物学专著2、《本草经集注》后世药物分类的导源3、《新修本草》世界上最早的一部由国家颁布药典4、《证类本草》我国现存最早的完整本草,是今天研究宋以前本草发展最完备的参考书。5、《本草蒙筌》作者:陈嘉谟;特点:注意地道药材,对各药的制法记叙颇祥。6、《本草纲目》按药物自然属性,自立分类系统,有纲、目为自然分类的先驱2中药鉴定学研究方法和技术不断提高20世纪70年代以前:传统的性状鉴别为主80年代:显微鉴别和理化鉴别80-90年代:光谱、色谱及电子显微技术90年代:分子生物学技术近年:计算机技术用于中药鉴定学,DNA分子遗传标记技术、中药指纹图谱3中药鉴定学的发展方向1、中药材、中成药质量标准规范化研究2、中药鉴定新技术新方法研究3、中药材GAP标准研究4、中药材资源开发研究4第二章中药的采收、加工一、中药的采收二、中药的加工三、中药的贮藏5第一节中药的采收1、确定适宜采收期(1)有效成分含量高,药用部分产量变化不大;有效成分有一显著高峰期,药用部分产量变化不大,此含量高峰期,即为适宜采收期。如槐米:槐树的花蕾,芦丁(2)有效成分含量与药用部分产量高峰期不一致时,有效成分的总含量达最大值;如:牡丹皮,丹皮酚5年=3年安徽铜陵牡丹皮采收年限在移栽第4年的8月下旬-9月中旬61、确定适宜采收期(3)全草类药材不能单凭一种器官确定:有效成分存在于各个器官(4)有毒成分中药,以有效成分总含量最高、毒性成分较低为宜。72、采收的一般原则(植物)(1)根及根茎类:秋、冬(2)茎木:秋、冬或全年(3)皮类:春末夏初(4)叶类:开花前;果实未成熟前(5)花类:在花完全盛开前(6)果实种子类:果实---果实成熟:女贞子(冬季)山茱萸(秋末冬初果皮变红)种子---果实成熟:牵牛子(7)全草:茎叶茂盛时墨旱莲:夏秋季(8)藻、菌、地衣:视品种而定茯苓:立秋82、采收的一般原则动物一般规律:全年采收其它:依品种而定矿物全年可采9第二节中药的加工10第二节中药的加工一、加工的意义(1)保证质量(2)便于临床用药调剂和有效成分的煎出(3)利于运输、储藏、保管(4)消除或降低毒性、刺激性或其它副作用(5)利于药材商品标准化112、常见的加工方法(1)拣选(2)漂洗(3)切片(4)去壳(5)蒸、煮、烫(6)熏硫(7)干燥:晒干、烘干、阴干、远红外加热干燥、微波干燥(8)发汗122、常见的加工方法发汗:药材在加工过程中,用微火烘至半干或微煮、蒸后,堆置起来发热,使其内部水分外溢,变软、变色、增加香味或减少刺激性,有利于干燥。如:茯苓个7~9月挖出后,除去泥沙,堆置“发汗”,摊开晒干,反复再“发汗”至干13第三节中药的贮藏影响中药质量的一个主要因素14变质现象(1)虫蛀(2)霉变:含糖类(3)变色(4)走油(5)风化(6)自燃:(7)挥发性成分挥散15第四章中药鉴定一、中药鉴定的依据二、中药鉴定的一般程序三、中药鉴定方法四、中药质量标准的制定16第一节中药鉴定的依据《中华人民共和国药典》《中华人民共和国卫生部药品标准》《中成药部颁标准》《进口药材部颁标准》其它转正标准、地方标准等17第二节中药鉴定的一般程序分三步1.取样2.鉴定3.结果18第三节中药鉴定方法四大鉴别方法一、来源(基源)二、性状三、显微四、理化19一、来源鉴定应用植(动、矿)物的分类学知识,确定中药的正确学名。分三步:1.采集实物,观察形态2.核对文献,对照鉴定3.核对标本,确定学名20二、性状鉴定通过眼观、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试的方法,鉴别药材的真伪优劣。也叫经验鉴定.十要素:形状大小颜色表面质地断面气味水试火试21二、性状鉴定1.形状:通过肉眼观察药材形状。(骨碎补呈扁平长条状)2.大小:一般药材的大小均在一定的范围之内(长5~15cm,宽1~1.5cm,厚0.2~0.5cm)3.颜色:在描述时一般采用复合色。以后色为主观察药材形状(呈棕褐色或暗褐色)22二、性状鉴定4.表面:是药材形状特征的主要部分。比如:防风的蚯蚓头等。23二、性状鉴定5.质地描述药材质地的几种方式颗粒性;致密;疏松;角质性;质轻;质硬;纤维性;质重;质软;树脂性;粉性;24防风的凤眼二、性状鉴定6、断面:药材折断时的现象平坦、显纤维性、颗粒性、胶丝、裂隙、断面的特征如:防风的凤眼;25二、性状鉴定7.气:闻到的气味,香气,清香,辛浊等。8.味:口尝,每种药材都有其独特的气味。如:乌梅黄连、黄柏、甘草、党参26二、性状鉴定9、水试:用水浸泡药材,观察水的特征和药材本身的特征以及变化。西红花:水泡后柱头呈喇叭状,水染成橙黄色。10、火试:有些药材火烧之后,能产生特殊的气味、颜色、烟雾、闪光和响声等现象。通过火烧产生的特征和现象鉴别。27二、性状鉴定1.油点:药材断面或柑类果皮上呈现的油润点状,为含挥发油的分泌腔。2.亮银星:指有些药材的表面常析出结晶,在阳光下可见点状闪光。如牡丹皮。3.疣点:药材表面较细小的不规则类圆形或半圆形突起。4.瘤状突起:药材表面的较粗大的不规则类圆形或半圆形突起285.种脐:种子脱离果实留下的疤痕。6.粉尘:药材折断或破碎后飞扬出来的粉状物质。7.粉性:药材含丰富的淀粉,呈细微的颗粒状。8.铁骨:指药材体重而坚实不易折断。如三七9.铜皮:指药材的外皮呈灰黄色,似金属铜的颜色,如三七2910.黏性:药材含有黏液质或糖类,具有黏手感。11.菊花心:指药材断面的放射状纹理,有时指放射状的维管束,如丹参;有时指放射状裂隙,如防风。12.隔瓤:指木瓜剖面中心部分所见凹陷的棕黄色子房室,常与果肉相连,把种子隔开成数室。女贞子有时具有双仁,也称隔瓤。301.定义利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状及内含物,鉴定药材品种和质量包括两种:组织鉴定粉末鉴定三、显微鉴别31三、显微鉴别2.组织鉴定:通过观察药材的切片鉴别其组织构造特征,适合:完整药材或粉末特征相似的同属药材的鉴别。3.粉末鉴定:通过观察药材的粉末制片鉴别其细胞分子及内含物的特征。适合:破碎、粉末状药材或中成药的鉴别。32(一)组织构造与细胞形态鉴别制片类型1、横切片和纵切片目的:观察组织构造。常用横切片三、显微鉴别33三、显微鉴别2.解离组织片目的:观察细胞的完整形态,使组织中各细胞之间的细胞间质溶解,细胞分离。34三、显微鉴别3、表面片目的:鉴别叶类药材,花类,果实类和全草类药材,观察各部位的表皮特征方法:取其叶片、萼片、花冠、过皮或种皮制成表面片354、粉末片目的:鉴定药材和以原粉入药的中成药方法:水合氯醛透化片粉末少许,加水合氯醛加热透化2-3次,加稀甘油,封片。透化目的:①溶解淀粉粒、蛋白质、叶绿体、树脂、挥发油等;②使已收缩细胞膨胀。③水合氯醛是优良透明剂。稀甘油目的:①避免析出结晶;②保新。粉末片要求粉末细度:药材80-100目,成药一般120目,粉碎时应全部过筛。三、显微鉴别3637三、显微鉴别5、花粉粒与孢子制片目的:观察花粉、花药或孢子囊群6、矿物药制片目的:观察矿物药方法:磨片、粉末38(二)细胞内含物和细胞壁检测:1、细胞内含物(1)淀粉粒:醋酸甘油或蒸馏水装片偏光镜观察;(2)糊粉粒:甘油装片加碘显棕或黄棕色,加硝酸汞显砖红色(3)菊糖:70%乙醇或水合氯醛液不加热立即观察(形成球形结晶)三、显微鉴别39三、显微鉴别(4)草酸钙结晶:加硫酸渐溶,析出针状结晶;(5)碳酸钙(钟乳体):加稀盐酸溶解,有气泡产生;(6)硅质细胞:硫酸不溶;(7)粘液细胞:钌红显红色;(8)脂肪油、挥发油或树脂:苏丹Ⅲ橘红、红色或紫红色;乙醇脂肪油不溶解,挥发油溶解。40三、显微鉴别2、细胞壁性质检查(1)木质化:间苯三酚及盐酸显红色或紫红色;(2)木栓化或角质化:加苏丹Ⅲ,放置或微热呈橘红至红;(3)纤维素:加氯化锌碘试液或加碘再加硫酸液蓝或紫色;(4)硅质化:加硫酸无变化。41(三)显微测量测定某一特征的大小,如:草酸钙结晶;显微定量。(四)电子显微镜42①能够直接观察样品表面的结构,样品的尺寸可大至120mm×80mm×50mm。②样品制备过程简单,不用切成薄片,有的粉末和某些新鲜材料可直接送入观察。③样品可以在样品室中作三度空间的平移和旋转,因此,可以从各种角度对样品进行观察。④景深大,图象富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比透射电镜大几十倍。43⑤图象的放大范围广,分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍,它基本上包括了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射电镜之间,可达3nm。⑥电子束对样品的损伤与污染程度较小。⑦在观察形貌的同时,还可利用从样品发出的其他信号作微区成分分析。44定义:利用某些物理的、化学的或仪器分析方法,鉴定中药的真实性、纯度和品质优劣程度,统称为理化鉴定。(一)物理常数的测定(二)常规检查(三)一般理化鉴别(四)色谱法四、理化鉴定45(一)物理常数的测定测定内容:相对密度、旋光度、折光率、硬度、粘稠度、沸点、凝固点、熔点等。适合:挥发油、油脂、树脂类、液体类(蜂蜜)、加工品类(阿胶)药材如:蜂蜜中掺水就会影响粘稠度,使比重降低。461、水分测定方法:四种烘干法、甲苯法、减压干燥法、气相色谱法如:骨碎补不得过15.0%2、灰分测定(二)常规检查47(二)常规检查3、膨胀度检查膨胀度是衡量药品膨胀性质的指标系指按干燥品计算,每1g药品在水或其他规定的溶剂中,在一定的时间与温度条件下膨胀后所占有的体积毫升数。如:蛤士蟆油水泡后可膨胀15倍。484、酸败度检查对象:含油脂类成分5、色度检查对象:含挥发油类成分的中药“走油”。如:白术,药典规定检查色度,比色鉴定法检查有色杂质的限量6、有害物质检查有机农药、黄曲霉素、重金属、砷盐等49(三)一般理化鉴别1.显色反应;甘草粉末硫酸橙黄色2.沉淀反应;生物碱碘化汞钾沉淀3.泡沫反应;皂苷50(三)一般理化鉴别4.微量升华;利用中药化学成分可升华的性质鉴别牡丹皮针状结晶5.显微化学反应粉末、切片等载玻片化学试剂沉淀、颜色等如:黄连加硝酸变红(硝酸小檗碱)6.荧光分析中药化学成分紫外光、自然光荧光51(三)一般理化鉴别荧光分析的四种情况:(1)中药饮片、粉末、浸出物紫外光灯。如:国产沉香与进口沉香浙贝母粉末显亮淡绿色(2)本身不产生荧光酸、碱或其它化学方法处理紫外光灯下产生荧光。如:枳壳喷0.5%醋酸镁甲醇溶液显淡蓝色52(三)一般理化鉴别(3)检查某些中药的变质情况地衣、真菌(4)观察中药化学成分存在的部位。如:黄连:小檗碱成分金黄色荧光木质部尤为显著53(四)色谱法纸、柱、薄层、气相、液相色谱等。54(四)色谱法1、TLC:对照品、对照药材、样品同法、同板对比对照品色谱在相应的位置上样品有相同颜色的斑点。55TLC实例:56(四)色谱法2、气相色谱法GC:流动相为气体(氮气)。57GC实例:58(四)色谱法3、高效液相色谱法HPLC流动相为液体(氮气)。59HPLC实例:60(七)浸出物测定对象:有效成分不明确或尚无精确定量方法的中药。降香的乙醇浸出物不得少于8.0%;黄芪的水溶性浸出物不得少于l7.0%;61(八)含量测定常用的分析方法:滴定法容量法重量法分光光度法气相色谱法高效液相色谱法薄层扫描法薄层-分光光度法等。62五、新技术和新方法(一)DNA分子遗传标记技术(1)聚合酶链式反应(PCR)技术(2)限制性内切酶酶切片段长度多态性(RFLP(3)随机扩增多态性DNA(DNARAPD)任意引物PCR(AP-PCR)技术(4)DNA测序方法63(二)中药指纹图谱技术:20头三七三七剪口三七花64(四)组织化学色谱法显微操作器取出细胞中的结晶、油滴色谱分析鉴定出化学成分(五)计算机技术65应明确的几个概念:1)中药:在中医基本理论指导下用于防病治病的药物,包括药材和成方制剂(常用中药500多种,400种植物药,60种动物药,48种矿物药)。2)草药:民间地区性用药,没有经过深入的化学药理及临床研究。3)中草药;中药与草药