溶出度试验影响因素及溶出度方法开发

溶出度试验影响因素及溶出方法验证1.溶出速率的定义Noyes-whitney方程：dW/dt=kS(Csat-Csol)试中：dW/dt-溶出速率K-溶出常数S-固体的表面积保持溶出介质的体积至少是饱和溶液体积的3倍。则基本可以满足漏槽条件。2.表面积的影响固体制剂非崩解型固体和崩解型固体溶出试验中表面积S随时间t的变化s表面积非匀质的崩解性固体制制剂的崩解过程颗粒颗粒的解聚过程微粒匀质的，不含辅料的片剂非崩解型溶出过程溶解的活性成分向溶出介质中扩散的过程溶出度仪的影响因素1.晃动的影响A.与TIR值小于2.0mm的结果相比，晃动偏差TIR值为1.0～2.0mm，水杨酸片和泼尼松片的溶出量分别增加约5%。B.溶出度仪设计中需注意两个因素1.要求转轴必须垂直；2.转轴应有两个固定点，仪器顶部到转轴卡盘的距离至少应不低于卡盘至转篮或桨叶的距离。2.转轴的直线度a.转轴的直线度是控制晃动的关键仪器指标，应确保其直线度b.溶出度仪的涉及要求桨叶或篮体的顶端距卡盘的距离至少要6英寸（15.2cm）。3.其它搅拌装置的变动因素A.篮杆和桨杆是精密部件，使用时应小心，这些精密仪器在实验室的抽屉中存放时，会破坏不锈钢桨表面的。引起弯曲和变性。应有适当的支架供转轴存放。B.桨叶应没有锐角。尖锐部分会引起涡流而不是层流。取用或放置篮时只能接触篮的上部边框，随着时间的增加，特别是在酸性介质时，筛网的孔径会有变化。可用放大镜检，必要时需更换篮。4.振动4.1振动的来源A实验室中能产生振动的仪器，包括通风橱和离心机，空调，风扇，离心机等。B.人员走动，关门，开门。C.早期水浴加热和溶出仪连在一起，目前的溶出度仪设计都采用外置循环泵与水浴连接。4.2应将盛有溶出介质的溶出杯的各种来源的振动水平降低到0.1mil。5.搅拌装置的准直度转轴的轴线与溶出杯的中心轴线间的偏离和倾斜对溶出介质流体动力学影响严重，可使溶出结果差异达到±25%。影响结果很明显。6.溶出杯中转轴的中心度7.搅拌速度规定转速一般不得过4%，转速的变化对溶出速率的影响几乎是线性的。8.篮法的变动由于表面张力的作用，有时会在标准转篮的顶部形成较大的气泡。当旋转的网篮下降进入溶出杯时，可能不会发生气泡，但这种操作不符合USP（711）的要求。网篮底部的气泡在篮体转动后会自动消失。如果在试验过程中产生气泡或气泡消失，分析人员应注意观察记录。9.溶出介质的影响A.溶解气体的释放是影响溶出结果的主要变动因素之一。FDA的科学家们在早期就提出，如果在溶出杯、转轴、篮或桨偶然出现闪亮现象，警示我们可能是溶解的气体释放，可能影响检测结果。泼尼松片在溶出介质不脱气的情况下，溶出速率的相对标准偏差增加10%。溶解的气体对溶出结果的影响程度没有一定的规律。B.脱气的方式加热，通氦气，加热并通氦气，加热并超声，加热并抽真空，超声并抽真空，超声。研究结论显示加热处理并通氦气是效果最好的脱气方式。经典的煮沸技术可以将饱和溶解氧降低55%。C.介质的体积的影响；缓释迟释制剂需回补，应有防止溶媒挥发的装置。D.温度的影响10.吸附在收集供试品前，让足够多的样本溶液通过滤器，是吸附点饱和，这样过滤后溶液中的药物没有损失。应选择吸附性质已知的过滤器。溶出度试验方法的建立和验证1.初步评估1.1过滤的兼容性过滤的作用是除去未溶解的制剂及辅料，如果不过滤样品会继续在溶剂中溶出，要求取样后立即过滤。过滤器的选择：1.考虑孔径的大小，从0.20to70µm均可，如果样品的粒径较小的话，可以调整使用孔径更小的滤膜。滤膜的兼容性：滤膜的吸收：滤膜的回收率，滤膜上样品的损失量和样品溶液的浓度有关，应考虑不同浓度下滤膜的吸收。滤膜对药物的吸附有饱和性，可以采用弃去初滤液的方式收集样品。1.滤膜应提前用溶出介质润湿。2.考虑滤膜中的提取物干扰样品的测定，可以采用比较过滤液和未过滤液的样品。3.滤膜孔径的选择应考虑需过滤的体积和粒径，使用大粒径的滤膜过滤少量样品会引起样品的损失，使用粒径小的滤膜会增大压力和引起滤膜堵塞。4.采用对照品溶液与过滤后对照品溶液；供试品溶液与过滤后供试品溶液进行比较过滤的影响。1.2在不同介质的溶解性和稳定性1.2.1药物两个重要的性质，一个为溶解性以及在特定pH下的稳定性。选择溶出介质组成时，应考察缓冲盐、pH值以及表面活性剂对药物溶解性和稳定性的影响。A建立溶出度方法时，应使其满足漏槽条件，B不建议使用水相-有机相混合溶剂，但经过相关验证该类溶出介质亦可接受。C，纯化水作为溶出介质，并不理想，首先，水质决定于水源，pH不可控；其次，pH值的变化可能发生在日间，甚至在试验过程中受药物原辅料的影响发生改变，使用于溶出速率不受溶出介质影响的药物。D口服剂型的溶出特点应在1.2-6.8的pH范围内，稀盐酸、缓冲盐（磷酸盐和醋酸盐、水)进行考察（缓释制剂为1.2-7.5）。还应考察缓冲盐及酸浓度对溶解性等的影响。E.溶出介质中个别含有一定比例的表面活性剂(十二烷基硫酸钠，聚山梨酯)以增加溶解性，表面活性剂的使用和浓度，应在多个浓度水平进行考察，一般应在其临界胶束浓度之上，常见的表面活性剂的浓度见下表：Table1.CommonlyUsedSurfactantswithCriticalMicelleConcentrationsSurfactantCMC(%wt/volume)ReferenceAnionicSodiumdodecylsulfate(SDS),Sodiumlaurylsulfate(SLS)0.18%–0.23%(2–4)Taurocholicacidsodiumsalt0.2%(3)Cholicacidsodiumsalt0.16%(3)Desoxycholicacidsodiumsalt0.12%(3)CationicCetyltrimethylammoniumbromide(CTAB,Hexadecyltrimethylammoniumbromide)0.033%–0.036%(0.92–1.0mM)(5,6)Benzethoniumchloride(Hyamine1622)0.18%(4mM)(2)NonionicPolysorbate20(Polyoxyethylene(20)sorbitanmonolaurate,Tween20)0.07%–0.09%(3,7)SurfactantCMC(%wt/volume)ReferencePolysorbate80(Polyoxyethylene(20)sorbitanmonooleate,Tween80)0.02%–0.08%(3,7)Caprylocaproylpolyoxyl-8glycerides(Labrasol)0.01%(4)Polyoxyl35castoroil(CremophorEL)0.02%(8)Polyoxyethylene23laurylether(Brij35)0.013%(9)Octoxinol(TritonX-100)0.01%–0.03%(3,10)ZwitterionLauryldimethylamineN-oxide(LDAO)0.023%(11)在使用表面活性剂时需关注其级别和纯度，不同来源的吐温80可能影响HPLC测定时的系统适用性。在钾盐0.5M和SDS合用时，会有沉淀产生。溶出介质和装置的选择可参考FDA数据库中的溶出方法：FDA.Recommendeddissolutionmethods.体积和溶媒根据溶出度测定法（711），当胶囊或糖胶片的溶出度因明胶交联引起检查结果不符合规定时，可在溶出介质中加入适量的酶，见胶囊溶出度测试及相关质量属性（1094）.在溶出介质的选择过程中，需注意样品在测定过程中应稳定。在某些情况下可在溶出介质中加入抗氧剂等，如果样品很易降解，监控降解杂质或是同时监控制剂是合适的。采用原位光谱技术优于HPLC法。药典中的篮法和桨法一般采用溶出介质为500-1000ml，个别情况下可以采用2-4L；往复筒法（装置3），流通池法要求较低量的溶出介质100-200ml。二，方法开发2.METHODDEVELOPMENT1.METHODDEVELOPMENT2.1Deaeration2.2Sinkers2.3Agitation2.4StudyDesign2.4.1TimePoints2.4.2Observations2.4.3Sampling2.4.4Cleaning2.5DataHandling2.6DissolutionProcedureAssessment2.ANALYTICALFINISH3.1SampleProcessing3.2Filters3.3Centrifugation3.4AnalyticalProcedure3.5SpectrophotometricAnalysis3.6HPLC3.4.AUTOMATION4.1MediumPreparation4.2SampleIntroductionandTiming4.3SamplingandFiltration4.4Cleaning4.5OperatingSoftwareandComputationofResults4.6CommonDeviationsfromtheCompendiaProceduresThatMayRequireValidation三．方法验证3.1专属性/空白干扰应验证辅料、其它活性成分及降解产物对测定结果无显著干扰，空白包括除活性成分之外的辅料和包衣（还有油墨、沉降蓝及胶囊壳），空白干扰的测定可称取空白样品的混合粉末并溶解或分散在溶出介质中，空白干扰不得过2%。对于缓释制剂，空白干扰试验使用空白制剂优于混合粉末，因空白制剂比混合粉末更接近药品对各辅料的释放过程。如空白辅料干扰大于2%，为避免干扰必须对方法进行改进：①选择其它波长；②使用更长的波长以扣除基线；③使用HPLC法。3.2线性范围应配制药物不同浓度的溶液，其浓度范围应涵盖药物释放时的最低和最高浓度。对照溶液配制时，可使用有机溶剂以提高药物溶解性，待测溶液中有机溶剂不得过5%，否则应进行验证。3.3准确度/回收率准确度通常需制备不同的样品，应包含药物及制剂中其它所有成分（如辅料、包衣材料及胶囊壳），其浓度范围应涵盖释放过程中可能出现的最低和最高浓度。取对应量的对照贮备溶液而非药物粉末置溶出杯中。测得的回收率应在加入量的95%～105%。制备多个浓度梯度的溶液可有助于试验。迟释制剂在检查酸中释放量时存在特殊情况。不高于10%的限度应经过验证。3.4精密度试验重复性是指对对照溶液或样品溶液进行重复测定。中间精密度：尽可能使用含量均匀度良好的药品进行测定，如无法获得，则可使用空白片和活性药物成分测定中间精密度。至少两个人员进行操作，分别配制不同的对照品溶液和溶出介质。通常操作人员应使用不同的溶出度仪，分光光度计或高效液相色谱仪。两组同浓度溶出度测定结果的平均值之间的应符合以下规定，溶出度低于85%的时间点，绝对误差应不高于10%，溶出度高于85%的时间点，绝对误差应不高于5%。3.5对照品和样品溶液的稳定性对照溶液和供试溶液稳定性可接受的限度为98-102%。3.6溶出曲线的制备与原研药溶出曲线比较，采用四个pH范围的溶出介质，绘制溶出曲线生物等效性和溶出特性在FDA文件中发现的生物不等效的药品记录中，有80%的产品溶出度差。一个活性成分的溶出度特性并不表示其溶出结果与药品的生物利用度之间有严格的相关性。比如一个快速溶解的药物，可能其溶出度结果和生物利用度不具有相关性。只有当溶出速率与人体吸收速率相当或低于人体吸收速率时，溶出速率才能成为限速步骤。只有在这种情况下，溶出结果才与生物利用度之间有明确的秩序相关性。溶出度试验是药品研发和批间质量控制的一种重要且很有价值的工具。FDA指导原则：口服固体速释制剂豁免体内生