第四章生药的鉴定第一节生药鉴定的目的和意义生药鉴定:是在继承中医学理论和实践的基础上,应用现代科学技术手段来研究生药的来源、性状、显微特征、理化特征等方面的一项重要基础工作。鉴定生药品种的真伪优劣,保证患者用药的安全与有效。生药鉴定的目的和意义:中药的同名异物和同物异名现象普通存在,直接影响到生药的质量,影响到化学成分、药理作用等研究的科学性和制剂生产的正确性,以及临床应用的有效性和安全性。1)生药中同名异物现象例如:各地商品生药,如“白头翁”有多达20种以上不同的植物来源,分属于毛茛科、蔷薇科、石竹科、菊科等;正品应为毛茛科植物白头翁的根。正品“白头翁”含皂苷,有抑制阿米巴原虫生长的作用,临床治疗阿米巴痢疾有效,而属于石竹科及菊科的一些同名异物白头翁则均无抑制阿米巴原虫的作用。“王不留行”有12种,“独活”有15种以上,“贯众”有58种,“金银花”有20种,“沙参”有36种,“石斛”有48种植物来源。现今各地所用“贯众”分属于多个不同的科,其中鳞毛蕨属绵马鳞毛蕨、欧鳞毛蕨等同属植物的根茎及叶柄基部有间隙腺毛,所分泌的油树脂中含有驱绦虫成分绵马酸类,而属于其它科属的未见有间隙腺毛和类似成分。2)生药中同物异名的现象如:益母草,在东北称坤草,又叫楞子棵;在江苏称天芝麻或田芝麻,浙江叫三角胡麻,青海叫千层塔,四川叫血母草等。大血藤科植物大血藤的茎,有的地方称“红藤”,有的称“鸡血藤”,而豆科植物鸡血藤在某些地区又称“大血藤”。3)在生药商品流通中,以次充好、以假充真,特别是一些贵重生药,时有发现伪品或掺假现象。贵重生药,如麝香、血竭、熊胆、羚羊角、番红花、冬虫夏草等。如砂仁近年来由于用量增加,药源趋紧,致使一些非正品砂仁混入市场,造成品种混乱,影响疗效;又如以亚香棒虫草、香棒虫草、地蚕、人工伪制虫草及用白僵蚕冒充冬虫夏草等。因此,有必要对同名异物、同物异名的生药,通过调查研究,加以科学鉴定,澄清品名,尽量做到一药一名,互不混淆,保证生药的真实性,以及疗效和用药安全。开展生药的品质评价,制订生药的鉴别依据和质量标准十分重要;对来源单一的常用生药及其类同品以及进口生药,也都需要进行鉴定研究,制订可供鉴别、检验的依据和标准,以保证质量。开展生药的鉴定研究,在发掘新药源和寻找进口生药的代用品方面,也有重要意义。血竭,产于印度尼西亚等地,进口生药。经考查发现,剑叶龙血树在我国云南应用迄今已有500余年历史,经鉴定研究以“广西血竭”为名入药。第二节生药鉴定的依据和一般程序一、生药鉴定的依据《中国药典》局颁药品标准地方药品标准二、生药鉴定的一般程序一、生药的取样1、取样前详细记录品名、产地、规格、等级及包件式样是否一致,检查包装的完整性、清洁程度及有无水迹、霉变或污染等情况,作详细记录。2、取样原则:总包件少于5件,逐包取样;总包件5~99件,取样5件;总包件100~1000件,按5%取样;超过1000件的,超过部分按1%取样;贵重药无论多少件,要逐包取样。3、破碎的、粉末状的或大小在1厘米以下的生药,用采样器取样,每包至少在不同部位取2~3份样品。4、将抽取的样品混匀(总样品),依对角线划×,分为四等份,取对角两份。重复操作至足够完成必要的试验及留样数(平均样品)。平均样品的量不少载实验所用量的3倍数,即1/3实验分析,1/3供复核,1/3留样保存。(二)杂质检查杂质包括非药用部位、沙石、泥块、尘土等,算重量百分比。杂质重量百分比(%)=*100%杂质重量供试品重量第三节生药鉴定的方法一、来源鉴定应用植(动、矿)物的分类学等知识,对生药的来源进行鉴定,确定其正确的学名,以保证应用品种的准确无误。以原植物鉴定为例1、观察植物形态对具有较完整植物的标本,应注意其根、茎、叶、花、果实等器官的观察,对繁殖器官(花、果、孢子囊、子实体等)应特别仔细,可借助放大镜或解剖显微镜,观察微小的特征,如毛茸、腺点的形态构造。同时注意对药用部位进行观察。2、核对文献根据检品的形态特征及其产地、别名、效用等线索,可查阅相关的中草药书籍和图鉴,加以分析对照。重要参考文献、著作:《中国植物志》、《中国高等植物图鉴》、《新华本草纲要》、《中国中药资源丛书》;《中药志》、《中华本草》、《中国药材学》、《常用中药材品种整理和质量研究》、《全国中草药汇编》、《中药鉴定学》等。3、核对标本当确定未知种是什么科属时,可以到有关植物标本馆核对已定学名的该科属标本。要得到正确的鉴定,必须要求标本馆中已定学名的标本正确可靠。二、生药的常规检查1、杂质检查包括非药用部位、沙石、泥块、尘土等,算重量百分比。2、水分测定烘干法、甲苯法、减压干燥法3、灰分测定总灰分测定酸不溶性灰分4、浸出物测定水溶性浸出物醇溶性浸出物醚溶性浸出物5、挥发油测定甲法——适用于比重小于1.0的挥发油测定;乙法——适用于比重大于1.0的挥发油测定。三、生药的限量检查1、砷盐的检查不得过百万分之十2、重金属的检查铅、铜、铬、3、农药残留量的检查主要为有机氯和有机磷类六六六——不得过百万分之0.2滴滴涕(DDT)——不得过百万分之0.2五氯硝基苯(PCNB)——不得过百万分之0.14、其他有害物质的检查大黄RadixetRhizomaRhei两千多年前,大黄就作为我国特产的药材而闻名于中外,成为国际性生药。据记载:我国在公元前2700年已有大黄应用。公元前114年已经陕西运往欧洲。马可波罗(1250~1323年)旅游东方时记载:“中国凉州(今甘肃)产大黄甚丰”。17世纪英国所用大黄为中国经印度运往英国。1687~1762年间,俄国政府以中国大黄为专卖品,鉴别甚严,并以本品为主制订了“莫斯科标准”,凡不适于该标准的尽行剔去。由上可见,大黄在历史上就在欧洲享有盛誉。历史1、大黄始载于《神农本草经》,列为下品。因根大而色黄而故名。以后历代本草均有记载。2、吴普谓:“生蜀郡(今四川)北部或陇西(今甘肃)。八月采根,根有黄汁。”3、苏颂谓:“以蜀川锦纹者佳。……根如芋,大者如碗,长一二尺。……四月开黄花(与今药用大黄相符)亦有青红似荞麦者(与今掌叶大黄和唐古特大黄相符)。综上所述:在植物来源方面:历代本草所载的大黄主要是掌叶组的大黄,结合本草附图,可认为与现今药用的正品大黄相符。在质量方面:古本草认为以四川北部和甘肃的大黄为好。关于混淆品:在唐代已发现河北产大黄与正品大黄不同,与现在河北产商品“山大黄”(原植物为华北大黄RheumfranzanbachiiMunt.)相当。来源为蓼科(Polygonaceae)植物掌叶大黄RheumpalmatumL.唐古特大黄RheumtanguticumMaxim.exBalf.药用大黄RheumofficinaleBail1.的干燥根及根茎。注:Rheum(大黄属)由Reuma“河”而来,示在伏尔加河的Rha地方有产。为多年生高大草本,根状茎及根部肥厚,黄褐色。直立,粗大,中空。叶片掌状半裂,每裂片具粗齿。圆锥花序顶生,分枝帖于茎,花小,紫红色或带紫红色。果枝聚拢,瘦果具三棱。掌叶大黄唐古特大黄药用大黄三种大黄的不同点:主要是叶片和花的区别掌叶大黄——叶片掌状半裂,每裂片具粗齿,圆锥花序顶生,分枝帖于茎,花小,紫红色或带紫红色。唐古特大黄——极似掌叶大黄,但其叶片掌状深裂,裂片再分裂,裂片通常窄长,呈三角状披针形或窄线形(呈鸡爪状,故名鸡爪大黄)。药用大黄——与掌叶大黄相近,但本种叶片浅裂,(一般仅达1/4)浅裂片大齿形或宽三角形,花较大,黄白色。产地掌叶大黄主产于甘、青、藏、川等地,多为栽培。唐古特大黄主产于青、甘、藏、川等地,野生或栽培。药用大黄主产于川、贵、云、鄂、陕等省,栽培或野生。前2种习称“北大黄”,后者习称“南大黄”。商品中以掌叶大黄产量大,唐古特大黄次之,药用大黄较少。采收加工选择生长3年以上的植物,在秋季上冻之前或春季大黄未发芽前采挖,除去泥土,切去茎或细根,刮去粗皮,横切成段或片,纵切成瓣,加工成卵圆形或圆柱形进行干燥。晒黄—晒后发汗,再晒,反复进行至干。炕黄—微火炕成5至6成干,发汗,凉干。阴黄—切片后用绳子穿起,挂在屋檐下通风处阴干。圆柱形、圆锥形、块片状、马蹄形。表面黄棕色(未去粗皮者表面棕褐色,有横皱纹及纵沟)蛋结表面光滑,有类白色网状纹理(有的形容为槟榔花纹,又称锦纹大黄)。断面黄棕色;根茎髓部有星点(异型维管束),根无星点,有放射状纹理。气清香,味苦涩,嚼之粘牙,有砂粒感,唾液染成黄色。以质坚实、气清香、味苦而微涩者为佳。性状鉴定掌叶大黄横向切断面星点皮部名词术语:锦纹:指药材表面或横切面上类白色薄壁组织与红棕色射线及星点交互排列形成的织锦状纹理,习称锦纹,如大黄。星点:指大黄根茎横切面上髓部的异形维管束呈暗红色的星芒状小点,习称星点。显微鉴别根茎及横切面:偶有残存的木栓层皮层窄韧皮部宽广,粘液腔外大内小木质部导管非木化髓部宽广,有内韧式的异型维管束;根无髓部,无异型维管束薄壁组织中含淀粉粒及草酸钙簇晶粉末特征:大型的草酸钙簇晶,直径可达190um,棱角大多短钝。大型的网纹导管多,非木化,亦有具缘纹孔及螺纹导管。淀粉粒众多,单粒圆球形、长圆形,脐点大多成分蒽醌衍生物游离型:为抗菌成分。大黄酸(rhein)、大黄素(emodin)、大黄酚(chrysophanol)、芦荟大黄素、大黄素甲醚等。结合型:为主要泻下成分。双蒽酮甙:番泻甙(sennoside)A、B、C、D。泻下作用最强。游离蒽醌类的葡萄糖甙。具一定的泻下作用。鞣质类有没食子酰葡萄糖、没食子酸、d-儿茶素等。为收敛成分,具收敛止血的作用。尚含四种大黄酸甙(rheinosides)A、B、C、D。亦为泻下成分。理化鉴别微量升华:本品粉末少量,进行微量升华,可见菱状针晶或羽状结晶,加碱显红色。(蒽醌类成分)荧光鉴别:药材新鲜断面于紫外光灯下观察,显浓棕色荧光。粉末的稀乙醇(40%)浸出液,滴于滤纸上,再滴加稀乙醇扩散后呈黄色或淡棕色环,置紫外光灯下观察,显棕色或棕红色荧光,不得显持久的亮蓝紫色荧光。检查羟基蒽醌衍生物:粉末用稀盐酸与乙醚提取,分取乙醚层,加碳酸氢钠试液,碱液层显红色。返回薄层鉴别对照品:大黄酸、大黄药材吸附剂:硅胶H薄层板展开剂:石油醚-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)1、在与大黄酸对照品色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光斑点。(置氨气中熏后,日光下检视,斑点变为红色。)2、在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的五个橙黄色荧光斑点。供试品色谱中质量评价干燥失重:不得过15.0%灰分:总灰分不得过10.0%;酸不溶性灰分不得过0.8%土大黄苷:取本品粉末甲醇浸液点于滤纸上,置紫外光灯(365nm)下检视,不得显持久的亮紫色荧光。浸出物:热浸法测定水溶性浸出物含量,不得少于25.0%含量测定:HPLC测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的总量,不得少于1.5%2005年版中国药典规定第三节原植(动)物鉴定1、生药真实性鉴定,包括原植(动)物鉴定、性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定及生物检定等项。2、生药纯度检定是检查样品中有无杂质及其数量是否超过规定的限度。中国药典附录部分收载的药材取样法,药材检定通则,药材及成方制剂显微鉴别法,药材炮制通则,杂质检查法,水分测定法,灰分测定法,浸出物测定法,挥发油测定法,色谱法(层析法)等,都是生药鉴定方法的依据。原植(动)物鉴定1、观察植物形态:完整植物的标本,注意器官的观察,繁殖器官的微小特征;药用部位,产地实物观察对照。2、核对文献:《中国药典》《中药彩色图集》和《中药薄层色谱图集》以及《药名词汇》等书籍。3、核对标本:植物标本馆第四节性状鉴定生药性状鉴定是运用人体的感官看、摸、闻、尝及水试、火试等直观的方法,对生药的性状,包括形态、大小、色泽、表面、质地、断面、气味等特征作为依据而进行鉴别的方法。性状鉴定主要观察完整的生药及饮片。性状鉴定内容:1、形状(shape,form)