院内感染监测与操作1、手的微生物监测采样时间:在接触患者或从事医疗活动前进行。采样方法:被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水的棉拭子一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两遍(一只手涂擦面积约30cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部位,将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。采样面积按平方厘米(cm2)计算。细菌菌落总数检查:1ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂培养,放35℃温箱内24~48h计数菌落。手细菌菌落总数(cfu/cm2)=平板上菌落数×采样液稀释倍数采样面积(cm2)(cfu:是菌落形成单位,将稀释后的一定量的菌液通过涂布的方法,让其内的微生物单细胞分散在琼脂平板上,待培养后,每一活细胞就形成一个菌落。就表示每毫升菌液中含有多少单细胞。)卫生手消毒:≤10cfu/cm2外科手消毒:≤5cfu/cm2一般医护人员手不得检出大肠杆菌、金黄色葡萄球菌;洁净手术室、其他洁净场所、非洁净手术室、骨髓移植室、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、ICU、烧伤病房、血液病病区等工作人员手不得检出铜绿假单胞菌;母婴同室、新生儿室及儿科病房工作人员手不得检出沙门氏菌,溶血性链球菌。2、物体表面的微生物学监采样时间:消毒处理后4h内采样。采样面积:被采表面100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。采样方法:用5cm×5cm的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有灭菌生理盐水的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1~4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭子装入5ml采样液的试管内送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。细菌菌落总数检查:1ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂培养,放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。物体表面细菌菌落总数(cfu/cm2)=平板上菌落数×采样液稀释倍数采样面积(cm2)洁净手术室、其他洁净场所、非洁净手术室、骨髓移植室、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、ICU、烧伤病房、血液病病区等:物体表面细菌菌落总数≤5cfu/cm2。儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析室、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等:物体表面细菌菌落总数≤10cfu/cm2。一般的物体表面不得检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌;母婴同室、早产儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。3、空气消毒效果的监测采样时间:选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。采样方法:自然沉降法,国内大多数医院采用。采样高度:与地面垂直高度0.8~1.5m。布点方法:室内面积≤30m2,设一条对角线上取3点,即中心一点、两端各距墙1m处取一点;室内面积30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。采样方法:用9cm直径的普通营养琼脂平板,在采样点将平板盖打开,把盖子扣在平板的边缘上,暴露5min后送检培养,每个被监测的房间菌落数以平均数计算各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标1.I类区域-洁净手术室(分成4个等级):I特别洁净手术室—手术区0.2个/30min•φ90皿,周边区0.4个/30min•φ90皿;Ⅱ标准洁净手术室—手术区0.75个/30min•φ90皿,周边区1.5个/30min•φ90皿;Ⅲ一般洁净手术室—手术区2个/30min•φ90皿,周边区4个/30min•φ90皿;Ⅳ准洁净手术室—手术区5个/30min•φ90皿;2.Ⅱ类区域:非洁净手术部(室)、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤4cfu/(15min•直径9cm平皿)。3.Ⅲ-IV类区域:儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心(室)、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4cfu/(5min•直径9cm平皿)。新规范的检测单位复杂,分别为:XXcfu/(5min·直径9cm平皿)、XXcfu(15min·直径9cm平皿)、XXcfu/(30min·直径9cm平皿)。不同的区域采样时间的要求是不相同的,参考范围也不相同的。所以,在送检的空气平板上必须标明采样的地点和时间。(原参考范围:Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3,Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3)b、层流手术室空气监测细菌菌落数卫生标准(表)手术室分类卫生标准(以沉降法为标准)手术区周边区Ⅰ级特别洁净手术室0.2个/30min0.4个/30minⅡ级标准洁净手术室0.75个/30min1.5个/30minⅢ一般洁净手术室2个/30min4个/30minⅣ级标准洁净手术室5个/30min5个/30min层流手术室空气监测沉降法空气采样选择平皿数(表)被测区域洁净度级别最少培养皿数(9cm,以沉降30min计)100131000510000310000023000002被测区域洁净度级别最少培养皿数(9cm,以沉降30min计)1001310005100003100000230000025、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测a、所有蒸汽和环氧乙烷气体的灭菌器至少每周1次用活芽胞杆菌作灭菌效果评价,干热灭菌每月监测1次。采样时间:与被消毒或灭菌物品同时监测。布点方法:小型灭菌器选1个包装物品放入指示剂,置最底层中央;中型灭菌器选3个包装物品放入指示剂,上层中央放一个,下层前后各一个;大型灭菌器选5个包装物品放入指示剂,上、中层中央各放1个,下层前、中、后部各放1个。监测方法:采用卫生部批准的化学指示剂和嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC7953、ATCC12980或SSIK31株)作为生物指示剂。6、紫外线消毒效果监紫外线灯管辐射强度值的测定:1、开启紫外线灯5min后,按说明书操作,将测定波长为253.7nm的紫外线强度测定仪(指定有效期内)探头置被检紫外线灯下垂直1m的中央处,仪表稳定后所示数据即为紫外线灯管的辐射强度值。其中30W直管型紫外灯新灯管辐射强度值≥90微瓦·秒/cm2,使用中辐射强度值≥70微瓦·秒/cm2;150W高强度紫外线新灯的辐射强度值≥200微瓦·秒/cm2。70微瓦·秒/cm2。2、紫外线强度指示卡监测法(四环R牌)【性能与原理】紫外线强度指示卡由紫外线光敏色块、标准色块和卡片纸组成。紫外线光敏色块以涂有聚乙烯膜的卡片纸为片基,将对波长253.7nm的紫外线敏感的化学物质和辅料均匀的涂布于片基上制成涂料卡,并粘贴在卡片纸中央制成。标准色块的辐照强度值分别为90微瓦·秒/cm2和70微瓦·秒/cm2,印制在紫外线光敏色块的两侧。受到规定波长的紫外线照射后,光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色。【使用范围】检测紫外线灯辐照强度值(90微瓦·秒/cm2和70微瓦·秒/cm2)是否达到使用要求。用于紫外线辐照强度值的日常监测,以便了解紫外线灯使用情况和及时进行更换。【使用方法】测定时,打开紫外线灯管5min待其稳定后,将指示卡置于距紫外线灯管下方垂直1m中央处,将有图案一面朝向灯管,照射1min。受到规定波长的紫外线照射后,卡片纸中央的紫外线光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色。将其与标准色快相比,即可测知紫外线辐照强度值是否达到使用要求。使用中的旧灯管,辐照强度值≥70微瓦·秒/cm2时,可继续使用,辐照强度值<70微瓦·秒/cm2时,应更换成新灯管。【注意事项】1、紫外线强度指示卡检测结果只能在监测当时观察,随后光敏色块会逐渐褪色,且褪色后的指示卡不得重复使用。为备查,应将结果及时记录下来。2、开启包装后,未用完的指示卡应及时用黑纸包装好。防止指示卡与化学物质和塑料膜直接接触。3、置室内、阴凉、干燥处、避光保存。