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抗凝剂的原理及适用范围手工法与仪器法测定RBC方法学评价项目优点缺点显微镜法设备简单、价格低，适用于基层和分散就诊者费时、重复性较差，准确性取决于操作者技术水平，误差散在血细胞分析仪法操作简便、效率高，重复性好，适合于大批标本检测仪器较贵，准确性取决于仪器的性能及工作状态HICN测定Hb的原理与注意事项原理：在溶血液中，Hb（除SHb外）的亚铁离子被高铁氰化钾氧化，Hb成为Hi，Hi与氰离子反应生成棕红色HiCN，在540nm处有最大吸收峰，且其吸光度与溶液浓度成正比而检出Hb浓度。/注意：分光光度计必须符合WHO标准，否则：1HiCN参考液制作标准曲线或者计算K值2带标准直接计算测定Hb的方法学评价1.HiCN法：ICSH和WHO推荐参考方法操作简便，结果稳定可靠，可测多种Hb（SHb除外），可直接定值/缺点：剧毒，不能测SHb，对HbCO转化慢，脂血、高球蛋白、高白蛋白、血小板增多可导致Hb假性增高2.SDS法：临床首选/优点：试剂无毒,缺点：ε未定，需依赖HiCN法间接得出结果，SDS会破坏WBC，不能用于WBC计数RBC、Hb测定的临床意义1.RBC、Hb降低（低于参考值下限指示贫血）1)生理性减少（生理性贫血）1、6个月-2岁婴幼儿（造血原料不足）2、妊娠中、晚期（血液稀释）3、老年人（造血功能减退）2）病理性减少：RBC生成少、破坏多、丢失多2．RBC、Hb升高1）生理性增多：新生儿、高原生活、剧烈运动（缺氧）；成年男性比女性高（雄性激素水平较高）2）病理性增多1、相对性增多：血液浓缩：如剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤患者2、绝对性增多：慢性心肺疾病、真红，RBC可达（7-10）×1012/L贫血病因分类：1、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移等2、造血原料缺乏：如缺铁性贫血、巨幼贫3、红细胞破坏增加：各种溶血性贫血4、红细胞丢失过多：急、慢性失血Hct的方法及意义方法主要为离心法：温氏法和微量法/意义：略高：1血液浓缩：如大量出汗、呕吐、腹泻、大面积烧伤；2红细胞增多症：如真红，有时可高达80%3新生儿,降低：各种贫血，但减少程度不一定与RBC一致.可用作真红、输血及输液疗效观察指标。用作计算MCV和MCHC血液流变学指标之一，增加表明血液粘稠度增高。哪些指标可用来鉴别贫血的种类，如何鉴别网织红细胞临床意义1、判断骨髓红系造血功能1）增多：骨髓造血旺盛：溶血性贫血↑↑；急性失血性贫血↑；缺铁贫和巨幼贫正常或轻度↑2）减少：骨髓造血功能低下：绝对值15×109/L：再障2、作为贫血治疗的疗效观察指标1）缺铁贫和巨幼贫治疗后，先Ret↑，后RBC和Hb逐渐↑2）溶血和失血性贫血治疗后：Ret逐渐降低，已得到控制；持续高值，未控制或加重。3、网织红细胞成熟指数（RMI）骨髓造血的早期标志4、未成熟网织红细胞比值（IRF）5、RPIESR影响因素+意义1）血浆因素增快：纤维蛋白原、球蛋白、胆固醇、甘油三酯减慢：清蛋白、糖蛋白及卵磷脂2）红细胞因素红细胞的数量和形态3）其他因素血沉管的位置，温度/临床意义：1、生理性血沉增快:老年人,妇女月经期,妊娠三个月以上血沉逐渐增快可达30mm/h2、病理性血沉增快1）各种炎症：急性细菌性炎症、风湿热、结核活动期2）组织损伤及坏死：心肌梗死增快，心绞痛正常（鉴别）3）良、恶性肿瘤的鉴别：恶性肿瘤多增快，良性肿瘤多正常4）高球蛋白血症：SLE、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等5）贫血：越重越快6）高胆固醇血症：动脉粥硬化、糖尿病等3、减慢：真性红细胞增多、脱水、DICWBC：中性粒数量变化：多数情况一致，也可以不一致1）中性粒生理性增多1、年龄2、日间变化：下午较高3、剧烈运动、激动、严寒、暴热等4、妊娠、分娩2）中性粒病理性增多1、急性感染：化脓性球菌最常见2、严重的组织损伤及大量血细胞破坏；严重的烧伤、大手术后、心肌梗死、急性溶血3、急性大出血：内脏破裂、宫外孕破裂4、急性中毒：化学药物、代谢性中度5、恶性肿瘤6、白血病3）中性粒减少1、某些感染：伤寒、副伤寒、流感2、某些血液病：再障3、慢性理化损伤：X射线、氯霉素4、自身免疫性疾病：SLE5、脾功能亢进淋巴细胞的临床意义1）淋巴细胞增多1、绝对增多：某些病毒或细菌所致的传染病；某些传染病恢复期；肾移植排异反应前期；急淋、慢淋；某些慢性感染2、相对增多：再障、粒缺2）淋巴细胞减少：放射线、肾上腺皮质激素；N↑可导致L↓（相对）单核临床意义增多：1、某些感染：亚急性感染性心内膜炎、急性感染的恢复期、肺结核2、某些血液病：单核细胞性白血病、恶性组织细胞病、淋巴瘤及MDS嗜酸粒1、增多超敏反应；寄生虫病；某些皮肤病；血液病：如慢粒2、减少伤寒、副伤寒、大手术后；长期使用肾上腺皮质激素嗜碱粒增多：慢粒、嗜碱性粒细胞性白血病嗜酸性粒细胞直接计数原理+意义：采用嗜酸性粒细胞稀释液讲血液稀释一定倍数，红细胞和大部分其他白细胞被破坏，E着色，充池计数经换算得每升血液中E数/意义1、生理变化1）劳动、寒冷、饥饿、神经刺激，E↓（肾上腺皮质激素组织骨髓释放E，并促使血中E向组织浸润）2）日间变化：白天较低，夜间较高；上午波动较大，下午比较恒定。2、嗜酸性粒细胞增多1）过敏性疾患：支气管哮喘、血管神经性水肿、食物过敏2）寄生虫：钩虫、蛔虫等3）某些传染病：猩红热4）慢粒白血病5）某些恶性肿瘤：淋巴系统恶性疾病（如霍奇金）、肺癌3、嗜酸性粒细胞减少伤寒、副伤寒、大手术后严重组织损伤以及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后。4、嗜酸性粒细胞计数的其他应用1）观察急性传染病的预后：2）观察手术和烧伤病人的预后3）测定肾上腺皮质功能白细胞分类原理三分类：电阻抗法,五分类：多项技术联合检测1电阻抗法：溶血处理后白细胞体积，区别小细胞群（L），中间细胞群（M、E、B）和大细胞群（N）2光散射与细胞化学计数联合白细胞分类计数过氧化物酶染色：活性E、N、M依次降低，L、B无活性3容量、电导、光散射（VCS）白细胞分类法,电阻抗法测量体积V,高频电磁针测量细胞内部结构电导C,光散射S区别细胞颗粒的结构和颗粒的质量4阻抗与射频技术联合白细胞分类法DC通过四个不同的检测系统:嗜酸粒检测系统；嗜碱粒检测系统；淋巴、单核、粒细胞检测系统；幼稚细胞检测系统5多角度偏振光散射白细胞分类技术0°前角光散射测细胞大小10°狭角光散射测细胞结构90°垂直光散射测细胞的内部颗粒和细胞成分90°消偏振光散射将E从其他白细胞中分离出来血细胞分析仪的检测参数及意义(1)RDW红细胞体积分布宽度：参考14.9%/1、用于贫血的形态学分类（RDW/MCV）2、诊断缺铁贫。95%以上缺铁贫RDW异常。小细胞低色素贫血、RDW正常则缺铁贫可能不大。3、缺铁贫与轻型地贫的鉴别。前者RDW增高，后者正常。(2)MPV平均血小板体积：参考7.6-13.2fl/结合PLT的变化，MPV越大，新生血小板越多1、增大：血小板破坏增多，骨髓纤维化、血栓性疾病、脾切除、慢粒等2、减少：骨髓造血功能损伤致血小板减少常用筛选实验BT、PLT、APTT、PT、D-D临床应用BT：延长：血管壁异常；血小板异常；血管性血友病等,缩短：心梗、脑血管病变及DIC等PLT：生理变化：早晨较低，午后较高；剧烈运动后较高；月经、妊娠有改变；静脉血比毛细血管血高。/病理变化：1）血小板减少（PLT100×109/L）血小板生成障碍：再障、放射性损伤、急性白血病,血小板破坏或消耗增多：ITP、DIC,血小板分布异常：脾肿大、血液被稀释2）血小板增多（PLT400×109/L）原发性增多：慢粒、真红反应性增多：急性化脓性感染、急性大出血等APTT：1推荐应用的内凝筛选实验2延长1）Ⅷ、Ⅸ和Ⅺ减低，能检出Ⅷ：C小于25%的轻型血友病2）Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ严重缺乏，如肝病，维生素K缺乏3）抗凝物质：口服抗凝剂、血循环中存在病理性抗凝物质等4）纤溶活性增强3缩短1）高凝状态，如DIC的高凝期2）血栓性疾病，如心、脑血管病变，深静脉血栓等4检测肝素治疗的首选指标PT1延长1）先天性凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏2）获得性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K缺乏、纤溶亢进、DIC晚期3）血中抗凝物质增加，口服抗凝剂、肝素等2缩短:DIC早起，心梗、脑血栓行测好难过,3INR是用于监测口服抗凝药的首选指标D-D增高：继发性纤溶（鉴别原发）。血栓性疾病、肿瘤,溶栓治疗的监测：D-D显著升高尿液检验目的？1.泌尿系统疾病诊断及疗效判断2.其他系统疾病的诊断及鉴别诊断3.安全用药监测4.重金属中毒检查（职业病防护）5.健康体检尿液标本采集有哪些种类、方法和临床应用？１.晨尿:①首次晨尿:肾脏浓缩功能评价,有形成分、化学成份(HCG).②二次晨尿:细菌培养、有形成分计数.２.随机尿适于门诊、急诊。３.计时尿①3h尿:6-9am.尿有形成分排泄率;②餐后2h尿：病理性尿胆原、糖尿、蛋白尿等③12h尿：晚上8点-次晨8点,:Addis计数、蛋白排泄率等。④24h尿：大容器(＞4L),防腐,收集完全,测尿总量,混匀,适量送检(50ml)；尿中化学成分、T.B排出量,电解质等。4.特殊尿标本①尿三杯试验②无菌尿液：细菌培养、药敏等。尿液标本采集质量保证1.尿液采集标准操作规程（SOP）2.检验项目选择与申请3.患者准备:告知、控制4.标本采集：器材、运送5.人员职责尿液标本保存有哪些方法1.低温冷藏:2℃～8℃，6h内，有形成分保存。2.冰冻－20℃～－70℃，离心，除去有形成分，冰冻上清液(化学成分)。3.化学防腐①甲醛:有形成分形态固定。②甲苯尿化学成分定性或定量。③麝香草酚:有形成分镜检、尿浓缩T.B、化学成分。④浓盐酸化学成分定量。⑤其他：冰乙酸:戊二醛:碳酸钠尿液理学检查有项目及临床意义①尿量：1.少尿：400ml/24h或17ml/h，无尿:100ml/24h。肾前性少尿：休克、心衰、脱水。肾性少尿：急性肾炎、肾衰。肾后性少尿：尿路梗阻2.多尿2.5L/24h肾性多尿：慢性肾炎、慢性肾衰早期等。内分泌性多尿：尿崩症、甲亢。代谢性多尿:糖尿病②尿色及透明度:1.血尿:泌尿生殖系统疾病：炎症、结石等/全身性疾病：血友病等/邻近器官疾病/药物不良反应。2.血红蛋白尿:血管内溶血，如蚕豆病、输血反应等3.肌红蛋白尿:肌肉组织广泛损伤、变性，如急性心梗等。4.胆红素尿:见于阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。5.乳糜尿:寄生虫（丝虫）或非寄生虫（结核、肿瘤、创伤、手术等）。6.脓尿/菌尿:泌尿生殖系统感染。7.结晶尿:正常尿、结石、痛风、药物等③尿比密方法+评价：1.比重计法：需校正;操作繁、标本量大、影响（温度,蛋白,葡萄糖等）2.折射仪法：标准化，标本少，自动温度补偿；需校正蛋白、葡萄糖,标准参考方法3试带法:简便，但干扰多，测定范围窄，精密度差，过筛试验临床意义：1.SG↓：低比密尿SG＜1.015见于尿崩症、慢性肾炎等。/比密低而固定：SG固定于1.010±0.003,呈等渗尿，表示肾实质严重损害。2.SG↑见于：急性肾小球肾炎.糖尿病.肾前性少尿疾病如高热、脱水等④尿渗量1.评价肾脏浓缩稀释功能:等渗、低渗尿见于肾小管、肾间质疾病，尿崩症等。2.鉴别肾前性或肾性少尿:肾前性少尿：Uosm＞450mOsm/kg.H2O,肾性少尿：Uosm＜350m3.利用渗透清除率计算自由水清除率尿蛋白定性试验+原理+评价+注意事项①试带法:（筛查。）②加热醋酸法：加热加酸→蛋白沉淀/准确,A、G均敏感；灵敏度较低,操作较繁。③磺基水杨酸法(SSA):蛋白质NH4+＋磺酸根－→蛋白盐沉淀/简便，灵敏度高，多种蛋白均反应；推荐确诊实验。尿蛋白定量试验+评价①磺基水杨酸-硫酸钠比浊法：线性范围窄,影响多，欠准确。②双缩脲比色法：对A/G均敏感；灵敏度较低，操作繁。③丽春红S染料结合法：灵敏度很高，对A/G均敏感，线性范围宽，干扰少；但操作繁。④其他：免疫法、尿蛋白电泳/灵敏、特异，前景好。蛋白尿临床意义１.肾小球性蛋白尿：原发性肾小球损害性疾病、肾病