HE染色步骤

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HE染色法是苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)的首个字母缩写。苏木精是碱性染料,使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。伊红是酸性染料,使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成份着红色。常规he染色步骤:(1)二甲苯(Ⅰ)15min(2)二甲苯(Ⅱ)15min(3)二甲苯:无水乙醇=1:12min(4)100%乙醇(Ⅰ)5min(5)100%乙醇(Ⅱ)5min(6)80%乙醇5min(7)蒸馏水5min(8)苏木精液染色5min(9)流水稍洗去苏木精液1-3s(10)1%盐酸乙醇1-3s(11)稍水洗10-30s(12)蒸馏水过洗1-2s(13)0.5%伊红液染色1-3min(14)蒸馏水稍洗1-2s(15)80%乙醇稍洗1-2s(16)95%乙醇(Ⅰ)2-3s(17)95%乙醇(Ⅱ)3-5s(18)无水乙醇5-10min(19)石炭酸二甲苯5-10min(20)二甲苯(Ⅰ)2min(21)二甲苯(Ⅱ)2min(22)二甲苯(Ⅲ)2min(23)中性树胶封固注:①第(11)、(12)步可省去,(13)步冲水时间需延长至20-30min。②第(21)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定10~30s(2)稍水洗1~2s(3)苏木精液染色(60℃)30~60s(4)流水洗去苏木精液5~10s(5)1%盐酸乙醇1~3s(6)稍水洗1~2s(7)促蓝液返蓝5~10s(8)流水冲洗15~30s(9)0.5%曙红液染色30~60s(10)蒸馏水稍洗1~2s(11)80%乙醇1~2s(12)95%乙醇1~2s(13)无水乙醇1~2s(14)石炭酸二甲苯2~3s(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s(17)中性树胶封固。

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