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-5-第1章绪论细菌的形态与结构名词解释微生物：是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学或电子显微镜放大几百或几万倍才能观察到的微小生物的总称。医学微生物学：是研究与人类疾病有关的病原微生物的基本生物学特性、致病性、免疫性、微生物学检查及特异性防治原则的一门学科。中介体：是细菌细胞膜向内凹陷，折叠、卷曲成的囊状结构，扩大膜功能，又称拟线粒体。多见于革兰阳性菌。质粒：是染色体外的遗传物质，为双股环状闭合DNA，控制着细菌的某些特定的遗传性状。异染颗粒：用美兰染色此颗粒着色较深呈紫色，故名。用于鉴别细菌。荚膜：某些细菌在其细胞壁外包绕的一层粘液性物质。鞭毛：细菌菌体上附有细长呈波浪弯曲的丝状物。鞭毛染色后光镜可见。菌毛：菌体表面较鞭毛更短、更细、而直硬的丝状物。电镜可见。芽胞：某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个圆形或椭圆形的小体。简答题1.简述微生物的种类。细胞类型特点种类非细胞型微生物无典型细胞结构、在活细胞内增殖病毒原细胞型微生物仅有原始细胞的核、缺乏完整细胞器细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体真核细胞型微生物有完整上的核、有完整的细胞器真菌-6-2.简述细菌的大小与形态。大小：测量单位为微米（μm）1μm=1/1000mm球菌：直径1μm杆菌：长2~3μm宽0.3~0.5μm螺形菌：2~3μm或3~6μm形态：球形、杆形、螺形，分为球菌、杆菌、螺形菌。3.分析G+菌、G-菌细胞壁结构与组成特点及其医学意义。细菌细胞壁构造比较G+菌G-菌粘肽组成聚糖骨架四肽侧链五肽交联桥同左同左无特点三维立体框架结构，强度高二维单层平面网络，强度差含量多，50层少，1~2层其他成分磷壁酸外膜：脂蛋白、脂质双层、脂多糖医学意义：1、染色性：G染色紫色（G+）红色（G-）2、抗原性：G+：磷壁酸G-：特异性多糖（O抗原/菌体抗原）3、致病性：G+：外毒素、磷壁酸G-：内毒素（脂多糖）4、治疗：G+：青霉素、溶菌酶有效G-：青霉素、溶菌酶无效4.简述L型菌的特性。1、法国Lister研究院首先发现命名。2、高度多形性，不易着色，革兰阴性。3、高渗低琼脂血清培养基2-7天荷包蛋样、颗粒、丝状菌落。4、具致病性，常在应用某些抗生素（青霉素、头孢）治疗中发生，且易复发。5、临床症状明显但常规细菌培养（-），予以考虑L型菌感染-7-5.分析溶菌酶、青霉素、链霉素、红霉素的杀菌机制。溶菌酶：裂解-1,4糖苷键，破坏聚糖骨架。青霉素：竞争转肽酶，抑制四肽侧链和五肽交联桥的连接。以上两者主要是抑制G+菌。链霉素：与细菌核糖体的30S亚基结合，干扰蛋白质合成。红霉素：与细菌核糖体的50S亚基结合，干扰蛋白质合成。6.为什么G-菌的L型菌比G+菌的L型菌更能抵抗低渗环境？G+菌细胞壁缺陷形成的原生质体，由于菌体内渗透压很高，可达20—25个大气压，故在普通培养基中很容易胀裂死亡，必须保存在高渗环境中。G-菌细胞壁中肽聚糖含量较少，菌体内的渗透压(5—6个大气压)亦比G+菌低，细胞壁缺陷形成的原生质球在低渗环境中仍有一定的抵抗力。7.叙述细菌的特殊结构及其医学意义。荚膜：a、抗吞噬作用——为重要毒力因子b、黏附作用——形成生物膜c、抗有害物质的损伤作用鞭毛：a、细菌的运动器官b、鉴别细菌（有无鞭毛、数目、位置）c、抗原性——H抗原，细菌分型d、与致病性有关（粘附、运动趋向性）菌毛：普通菌毛：粘附结构，可与宿主细胞表面受体特异性结合，与细菌的致病性密切相关。性菌毛：a、传递遗传物质，为遗传物质的传递通道。b、作为噬菌体的受体芽胞：a、鉴别细菌（有无芽胞、位置、大小、形状）b、灭菌指标（指导灭菌，以杀灭芽胞为标准）8.分析细菌芽胞抵抗力强的原因。1、含水量少（约40%）—繁殖体则占80%2、含大量的DPA（吡啶二羧酸）3、多层致密膜结构-8-第2章细菌的生理名词解释热原质：热原质（致热源），是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热原质即其细胞壁的脂多糖。菌落：单个细菌分裂繁殖成肉眼可见的细菌集团。分为三型：1.光滑型菌落2.粗糙型菌落3.粘液型菌落简答题1.简述细菌的生长繁殖条件。营养物质：①水②碳源③氮源④无机盐⑤生长因子（有些细菌需要）温度：37℃pH：7.2～7.6气体：①对O2要求(专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌）②对CO2要求：5~10%CO2渗透压2.分析专性厌氧菌必须无氧培养的原因。因为细菌在有氧环境中进行物质代谢常产生超氧阴离子和过氧化氢，两者都有强烈的杀菌作用。厌氧菌因缺乏过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶或氧化还原电势高的呼吸酶类，故在有氧时受到有毒氧基团的影响，就不能生长繁殖。3.叙述细菌的群体生长方式。分裂方式：二分裂a.迟缓期:1~4h,分裂作准备b.对数期:8~18h后,几何级数增长,研究细菌最佳c.稳定期:有害代谢产物积累，活菌数不增加d.衰退期:死亡数繁殖数-9-4.分析细菌的代谢产物及其医学意义。1.热原质（致热源），是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。2.毒素及侵袭性酶：①、外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；②、内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。③、侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。3.色素：由某些细菌产生的，含不同颜色，有助于进行细菌鉴别，分为水溶性和脂溶性两类。4.抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。抗生素大多由放线菌和真菌产生。5.细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。6.维生素：由细菌合成，供自身需要，也可分泌到周围环境5.分析细菌在培养基中的生长情况。㈠液体培养基大多数细菌在液体培养基生长繁殖后呈现均匀浑浊状态，少数链状的细菌呈沉淀生长，专性需氧菌呈表面生长，常形成菌膜。㈡固体培养基生成菌落：单个细菌分裂繁殖成肉眼可见的细菌基团。菌落分为：光滑型菌落粗糙型菌落粘液型菌落㈢半固体培养基有鞭毛的细菌沿穿刺线呈羽毛状或云雾状混着生长。无鞭毛细菌只能沿穿刺线呈明显的线状生长。-10-(CopyrightBy临床082班制作团队)第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全名词解释消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。灭菌（sterilization）：杀死物体上所有微生物的方法。无菌操作（antiseptictechnique）：防止微生物进入人体或其他物品的操作技术。简答题1.简述湿热灭菌效果大于干热灭菌的原因。（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性（2）湿热的穿透力比干热大（3）湿热的蒸汽有潜热效应2.比较（方法、效果、使用物品）常用的三种消毒灭菌方法（煮沸法、高压法、紫外线法）。种类方法效果用途煮沸法100ºC沸水5~10分钟消毒饮水和食具高压法高压蒸气灭菌器103.4Kpa121.3ºC，15~20分钟灭菌耐高温、耐湿物品（基础培养基、生理盐水、手术辅料等）紫外线法=260~266nm的紫外线照射消毒适用于空气和物体表面消毒。-11-3.简述化学消毒剂的杀菌机制。（1）使菌体蛋白变性和凝固-------酚、醇、酸硷、醛类，重金属盐类（高浓度）。（2）干扰细菌的酶系统及代谢（破坏-SH，酶失活）--------氧化剂、重金属盐类（低浓度）。（3）损伤菌细胞膜-------表面活性剂、酚类（低浓度）。4.简述影响消毒剂消毒灭菌效果的因素。微生物的种类微生物的物理状态微生物的数量消毒剂的性质、浓度与作用时间温度酸碱度有机物第4章噬菌体名词解释毒性噬菌体：能在宿主菌细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌的噬菌体。温和噬菌体：噬菌体基因与宿主菌染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代。该种状态称溶原状态。该噬菌体称温和噬菌体。前噬菌体：整合在细菌基因组中的噬菌体基因组。第5章细菌的遗传与变异名词解释转座子：是一类在细菌的染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分，是基因组中一段特异的具有转位特性的独立的DNA序列。高频重组菌（株）：F质粒整合到细菌的染色体中可使该菌能高效地转移染色体上的基因。-12-游离DNA直接摄取整合简答题1.简述质粒的主要特性。⑴质粒具有自我复制的能力。⑵质粒能编码某些特定性状。⑶质粒可自行/人工丢失与消除。⑷质粒可通过接合、转化或转导等方式在细菌间转移。⑸质粒的相容性与不相容性。2.列举细菌常见的质粒。致育质粒（F质粒）耐药质粒（R质粒）毒力质粒（Vi质粒）细菌素质粒（Col质粒）代谢质粒3.分析细菌基因转移与重组的方式（转化、接合、转导）。1.转化：供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取，并将其整合到受体菌基因中，使受体菌获得新的性状。供菌体受菌体转化因子+感受态细菌→吸附→进入重组菌：复制为突变株、原型株影响转化的因素：①供、受体的基因型——亲缘关系愈近，转化率愈高。转化的DNA片段（转化因子）分子量小于1×107，不超过10~20个基因。-13-遗传物质（质粒）②受菌的生理状态——只有处于感受态时，才能摄取转化因子。感受态是因为其表面有一种吸附DNA的受体。出现在细菌对数生长期后期。③环境因素——Ca2+、Mg2+、cAMP等维持DNA稳定，促进转化。2.接合：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（质粒）从供体菌转移给受体菌。能通过接合方式转移的质粒有：F质粒、R质粒、Col质粒、Vi质粒。①F质粒的接合：F质粒通过性菌毛从F+菌变成F-菌。高频重组菌是指F质粒整合到细菌的染色体中可使该菌能高效地转移染色体上的基因。F’质粒是指F质粒从染色体上脱离并带有染色体上几个临近基因。②R质粒的接合：R质粒有耐药传递因子（RTH）和耐药（r）决定子组成。耐药传递因子与F质粒相似，编码菌毛的产生和通过菌毛转移。耐药（r）决定子编码对抗菌药物的耐药性。3.转导：以温和噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA转移到受体菌内，使受体菌获得新的性状。供体菌受体菌分为普遍性转导和局限性转导。①普遍性转导：由于错误的包装将细菌染色体任何部位基因包装入噬菌体头部，并将其注入受体菌内。有两种结局：完全转导（外源性DNA片段与受体菌的染色体整合并随染色体而传代。）流产转导（外源性DNA片段游离在胞质中既不能与受体菌染色体整合，也不能自行复制。）②局限性转导：所转导的只限于供体菌染色体上特定的基因。4.比较普遍性转导和局限性转导。温和噬菌体供菌体受菌体经性菌毛-7-区别要点普遍性转导局限性转导发生时期裂解期溶原期转导的遗传物质供体菌染色体DNA的任何部位供体菌染色体DNA的特定部位转导后果完全转导或流产转导受体菌获得供体菌DNA特定部位的遗传特性转导频率10-5~10-7频率较普遍转导增加（10-4~10-6）-8-5.分析“影印试验”。先将抗生素敏感细菌接种在不含抗生素的琼脂平板上，待长出单个菌落后，取一块包有无菌丝的压模，在琼脂平板表面轻轻按印使压模丝绒表面黏附细菌菌落印迹，再将此菌落印迹平行按压到含有抗生素的琼脂平板上。经培养后，平板上敏感菌被完全抑制，但仍有耐药菌株菌菌落的出现。然后在原无抗生素平板上找到耐药菌的相应菌落，将此菌落移种到含有抗生素的肉汤中培养，可见细菌生长。在整个实验中，该细菌从未接触过抗生素，但已具有对抗生素的抗性。影印试验证明突变是自发的、随机的，突变是细菌在接触抗生素之前已发生，抗生素仅起筛选突变株的作用。6.采用营养缺陷型菌株，设计一种细菌突变性状的筛选方法。用含组氨酸的选择培养基筛选His-细菌7.叙述细菌遗传变异在医学上的实际意义。1.在疾病的诊断、防治中的应用诊断：注意细菌因变异而出现的非典型菌株，防止误诊。治疗：防止耐药菌株的扩散。预防：疫苗的制备。2.在测定致癌物中的应用Ames试