cobas-HPV检测介绍

cobasHPV检测介绍费茂贵2014-7-24IVDMolecularRoche主要内容宫颈癌简介CobasHPV实验性能CobasHPV检测的临床应用1•宫颈癌在全球妇女的癌症死因中高居第二位。全球每年新产生约51万病例，死于宫颈癌的妇女约有20万。•在中国近13万例，约占世界新发病例的1/4、占亚洲1/2。•在中国每年约有2—3万的妇女死于宫颈癌。宫颈癌的临床背景3阴道宫颈子宫卵巢宫颈癌输卵管人乳头状病毒（HPV）•目前根据DNA同源性将HPV分为100多种亚型，约35种型别与生殖道感染(如：生殖器疣等)有关，约20种型别与癌症相关。•与宫颈癌相关的高危型HPV(high-riskHPV,orhrHPV)有14种：16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59,66,68•低危型有6，11，40，42，43，44•来自世界各地的宫颈癌组织标本的研究发现，HPV16、18型感染率最高（占70%）HPV是引起宫颈癌的主要因素超过99%的宫颈癌都检测到HPV45HPV16+，18+有更高的宫颈癌风险宫颈癌发生模式（四个阶段）•HPV一过性感染•HPV持续感染（VS.清除）•持续感染向CIN发展（两状态互为共存）•发展为浸润癌筛查的目标阶段主要内容宫颈癌简介CobasHPV实验性能CobasHPV检测的临床应用2CobasHPV检测原理基于q-PCR的全自动检测cobas®x480核酸提取仪cobas®z480PCR扩增仪FDA,CFDA,CEcobasHPV的检测原理风险分层,对每一份标本质控通道1通道24531333935515256585966681618通道3通道4检测HPV16检测HPV18检测β-globin内质控检测12hrHPV12hrHPV指除HPV16/18型外的其他12种高危型HPVSamplePrepSetupAmp/DetectDailyMaint8hr9hr4hr5hr6hr7hr1hr2hr3hr94Samplescomplete188Samplescomplete160min120min160min120min160min282Samplescomplete120min检测通量1批88个样本，一天3批282个样本结果准确可靠内质控：Beta-globulin(B球蛋白）高保守的靶标选择,优化的PCR引物、探针设计避免假阴性防止了低危型的交叉反应AmpErase抑制遗留的扩因子防止PCR反应中遗留的扩因子可能产生的污染罗氏cobas高风险HPV检测－提供准确可靠的结果主要内容宫颈癌简介CobasHPV实验性能CobasHPV检测的临床应用1HPV检测的临床应用ASCUS人群管理（2013ASCCP）意义不明的非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）的管理阴性≥ASC常规筛查（3年内细胞学检查）阴道镜不充分阴道镜检查未观察到上皮病变，首选颈管取样充分阴道镜检查转化区有上皮病变，可接受颈管取样HPV阳性（管理方式与LSIL相同）HPV阴性重复联合检测间隔3年参照ASCCP指南管理重复细胞学，间隔1年（可接受）HPV检测（首选）MassadLS,EinsteinMH,HuhWK,etal.2012updatedconsensusguidelinesforthemanagementofabnormalcervicalcancerscreeningtestsandcancerprecursors[J].Obstetrics&Gynecology,2013,121(4):829-846.HPV检测的临床应用术后随访(2013ASCCP)诊断性切除术或转化区消融术诊断性切除术阴道镜充分阴道镜不充分，CIN2,3复发，或颈管取样为CIN2,3联合检测12个月和24个月连续两次联合检测均为阴性重复联合检测3年内常规筛查任何检测异常阴道镜结合颈管取样MassadLS,EinsteinMH,HuhWK,etal.2012updatedconsensusguidelinesforthemanagementofabnormalcervicalcancerscreeningtestsandcancerprecursors[J].Obstetrics&Gynecology,2013,121(4):829-846.HPV检测的临床应用HPV联合细胞学筛查（2012年ASCCP/ACS/ASCP）SaslowD,SolomonD,LawsonHWetal.AmericanCancerSociety,AmericanSocietyforColposcopyandCervicalPathology,andAmericanSocietyforClinicalPathologyscreeningguidelinesforthepreventionandearlydetectionofcervicalcancer.AmJClinPathol.2012Apr;137(4):516-42.人群推荐筛查方法＜21岁不筛查21～29岁每3年一次的单独细胞学筛查30～65岁每5年一次的HPV和细胞学联合筛查（优先推荐）每3年一次的单独细胞学筛查（可接受的）65岁近10年有连续3次阴性细胞学结果或连续2次阴性联合筛查结果且末次筛查在近5年内的65岁女性,停止筛查。HPV检测的临床应用HPV检测联合细胞学筛查（2012年ASCCP/ACS/ASCP）HPV&Pap*Pap≥LSILHPV+&Pap-HPV-&ASC-USHPV-&Pap-HPV+&ASC-US阴道镜间隔5年筛查间隔3年筛查HPV16/18+HPV16/18-HPV16/18分型立即重复联合检测间隔12个月HPV+或≥ASCHPV-&Pap-阴道镜间隔3年筛查重复联合检测间隔12个月*Pap指细胞学检查CobasHPV一次检测，即可完成指南推荐的两个步骤：高危型筛查+HPV16/18分流HPV检测的临床应用HPV检测初筛（2014年4月FDA批准）Inwomen25yearsandolder,thecobasHPVTestcanbeusedasfirstlineprimarycervicalcancerscreeningtesttodetecthighriskHPV.cobasHPV临床应用初筛的临床实验依据ATHENA•美国最大规模的(子宫颈癌)注册研究•入组人群：＞47000人份•参与的临床研究中心：分布于美国23个洲，61临床研究中心•参与专家组成员：PhilipCastle,PHD（2012ASCCP指南更新小组成员），ThomasC.WrightJr,MD（前ASCCP主席）等•历时：4年，2008-2009年横断面研究（~47000人）及2009-2012年纵观研究（~8600人）•耗资：1亿美金•已发表文献：12篇47,000名妇女2008年5月–2009年8月随访1年随访2年随访3年2009–20102010–20112011–2012随访阶段（阴道镜）基础阶段（细胞学+cobasHPV）Dataonfile,ATHENAStudy.RocheMolecularSystems,Inc.HPV-其他12高危HPV+HPV18+051015202530HPV16+25.2%（21.7,28.7）11.0%（7.1,15.4）5.4%（4.5,6.4）0.3%（0.1,0.7）CIN3+累计发生率（%）基线1年2年3年随访时间cobasHPV临床应用初筛3年随访数据HPV检测的临床应用cobasHPV检测用于一线初级筛查（2014年3月FDA委员会推荐）HPV16/18+常规筛查HPV-细胞学12hrHPV+间隔12个月重复联合检测NILM≥ASC-US≥25岁cobasHPV检测阴道镜阴道镜cobasHPV检测应用评价PhilipCastle,PHD“罗氏cobasHPV检测较液基细胞在宫颈癌筛查方面，更可靠也更有效”——柳叶刀-肿瘤学CastlePE,StolerMH,WrightJrTC,etal.Performanceofcarcinogenichumanpapillomavirus(HPV)testingandHPV16orHPV18genotypingforcervicalcancerscreeningofwomenaged25yearsandolder:asubanalysisoftheATHENAstudy[J].Thelancetoncology,2011,12(9):880-890.cobasHPV检测应用评价ThomasC.Wright,Jr.,MDCoxJT,CastlePE,BehrensCM,etal.Comparisonofcervicalcancerscreeningstrategiesincorporatingdifferentcombinationsofcytology,HPVtesting,andgenotypingforHPV16/18:resultsfromtheATHENAHPVstudy[J].Americanjournalofobstetricsandgynecology,2013,208(3):184.e1-184.e11.ThomasC.Wright,Jr.,MD美国哥伦比亚大学病理学系主任、美国阴道镜检查与宫颈病理学会（ASCCP）主席美国妇产科界的知名学者。“使用cobasHPV检测时，HPV16/18型阳性妇女应进行阴道镜检查，而其他12种hr基因型阳性时应在12个月后重复进行细胞学检查和hrHPV检测。该策略目前由ACOG推荐。ATHENA研究数据支持该意见，由于cobasHPV检测时能获得风险分层信息，未来该方法在美国会变得越来越广泛。”cobasHPV检测应用评价中国工程院院士：郎景和“如果说HC2开始了一场HPV检测及提高妇女健康和防治宫颈癌的革命，那么新方法cobas4800HPVDNA检测，则是推动了宫颈癌筛查技术的新进展。”“该检测已获得美国FDA、欧盟CE认证和中国SFDA批准，在宫颈癌筛查及诊疗领域将拥有广阔的应用前景。”cobasHPV检测应用评价中国医学科学院肿瘤研究所主任：乔友林教授“与目前临床大量使用的其他同类试剂相比，罗氏HPV检测试剂系统不仅能检测到高风险亚型，还能鉴别两种风险度最高的HPV亚型——HPV16和HPV18亚型，因而可以帮助临床医师更好的找到感染者，判断她们患癌的近期和远期风险。及时发现早期病变，及时治疗，以达到防止宫颈癌发生的木的。”检测应用评价复旦大学附属妇产科医院宫颈科主任：隋龙教授全国已有近50家合作单位复旦大学附属妇产科医院沈阳市妇婴医院中国福利会国际和平妇幼保健院河北省医科大学第二附属医院上海市东方医院铁法矿物局总医院嘉定妇幼保健院新疆医科大学第一附属医院嘉定中心医院河北联合大学附属医院上海市松江区中心医院盘锦市中心医院杨浦市东医院北京地坛医院潍坊市妇幼保健院北京朝阳医院江苏省中西医结合医院郑州大学第一附属医院浙江大学附属邵逸夫医院中国中医科学院西苑医院杭州艾迪康南昌大学第一附属医院万州三峡中心医院武汉兰卫(黄石实验室)潍坊医学院附属医院厦门大学附属第一医院玉溪市人民医院北京大学深圳医院江苏省人民医院海南医学院附属医院瑞安红会医院河池市人民医院南京临床核医学中心深圳市滨海医院北京中日友好医院咸阳市第一人民医院唐山工人医院佛山市南海区中医院沈阳军区总医院武安市第一人民医院北京大学第一医院邢台市临床检验质量管理与控制中心新乡市第一人民医院福建省漳州市医院CobasHPV检测总结全自动，高通量严格质控，多重防污染经过大规模