时间分辨免疫荧光层析试纸条简介1上海瑞亿技术有限公司倪小琴2016.3.1目录时间分辨免疫荧光层析技术荧光标记物检测原理时间分辨荧光层析法优势及现状2时间分辨免疫荧光层析技术用稀土-镧系元素标记抗原或抗体,使抗原抗体在膜上反应,并呈现出一定的颜色,通过信号强度来分析待测物浓度的简便和快速的方法。镧系元素螯合物在紫外光源的激发下能发射特殊的荧光可消除普通荧光的干扰提高检测的灵敏度3时间分辨免疫荧光层析技术取代了第一代胶体金、彩色乳胶和第二代荧光微球技术实现了定性到定量的转变提高了检测的稳定性和灵敏度更广的应用前景4荧光标记物稀土-镧系元素,常用的有Eu、Tb和Sm,而Eu(铕元素)是在标记抗原抗体中应用最广的元素。镧系元素相比传统的荧光素标记物:具有较宽的激发光谱带和较窄的发射光谱带荧光寿命长荧光光谱的Stocks位移较大,200nm左右以上特点可有效排除激发光和非特异性荧光的干扰,提高信噪比和灵敏度。5荧光标记物6Stokes位移衰变时间检测原理当将含有待测抗原(抗体)的样品滴在加样区,待测样品中的抗原(抗体)与结合垫中的纳米微球标记的抗体(抗原)结合并通过毛细作用向前层析,当达到检测区后,与检测线上固定的抗体(抗原)结合,形成微粒-抗体-抗原-抗体夹心复合物并被固定在检测线上,而多余的纳米微球标记物继续向前层析,与固定在质控线二抗结合。通过检测线和质控线荧光强度的强弱及其比值,即可分析出样品中待测物的浓度。7YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYAYAYAYAY阴性阳性样品垫玻纤垫NC膜T线C线吸水纸8试纸条工作原理图检测原理时间分辨荧光层析法优势及现状方法学名称时间分辨荧光免疫层析胶体金试纸条标记物镧系元素胶体金标记方法重复性好,批间差小批间差大复合物稳定性化学键结合,稳定物理吸附,不稳定结果判断定量定性灵敏度高低抗干扰能力强弱信噪比高低检测范围宽窄9时间分辨荧光层析法优势时间分辨荧光层析法优势及现状生产厂家产品目录上海执诚生物科技股份有限公司D-二聚体、N端脑钠肽前体、全程C-反应蛋白光景生物科技(苏州)有限公司D-二聚体、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌红蛋白(MYO)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)上海溯源生物技术有限公司人甲胎蛋白和游离人绒毛膜促性腺激素β亚基10时间分辨荧光层析法现状11