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ZENBlueLite简易使用手册应用工程师王玥•此简要说明参照UserGuideZEN2011BlueVersion完成，简单介绍了ZENLite的常用功能和基本操作，谨供Zeiss用户在日常使用中参考。•如用户仍存在其他使用问题请参考UserGuideZEN2011BlueVersion或致电地区工程师做进一步咨询。也可致电售后服务热线400-6800-720.•祝各位用户使用愉快！应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册2目录•ZEN2011主界面•单色图像拍摄•彩色图像拍摄•拍摄实用技巧•Camera默认参数设置•录制样品的动态变化•图像的简单处理•截取图片中感兴趣的区域•添加标注•手动测量•图片叠加•多通道图像的展示•生成对比图像•图像保存•图像输出应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册3ZEN2011主界面标题栏工具栏菜单栏左侧工具栏状态栏右侧工具栏图像显示区域图像控制区域应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册4单色图像拍摄1(此方法适用于配置AxioCamMRm等单色CCD的用户)•双击桌面上的图标ZEN2011(Blueversion)启动软件。•通过目镜观察样本，找到感兴趣的视野，手动将光路切换至相机。在Camera主页面下进行图像拍摄。确认ActiveCamera下拉菜单中已选择使用适当的CCD。在状态栏左下角的比例尺列表中选择当前使用的放大倍数。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册5单色图像拍摄2点击Live按钮，进行图像预览。点击SetExposure按钮，自动设定曝光时间。根据预览窗口中显示的图像，调节微调焦螺旋，使图像清晰。点击Snap按钮，进行图像拍摄。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册6彩色图像拍摄1(此方法适用于配置AxioCamMRc5，ERc5，ICC等彩色CCD的用户)•双击桌面上的图标ZEN2011(Blueversion)启动软件。•通过目镜观察样本，找到感兴趣的视野，手动将光路切换至相机。在Camera主页面下进行图像拍摄。确认ActiveCamera下拉菜单中已选择使用适当的CCD。在状态栏左下角的比例尺列表中选择当前使用的放大倍数。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册7彩色图像拍摄2点击Live按钮，进行图像预览。点击SetExposure按钮，自动设定曝光时间。根据预览窗口中显示的图像，调节细准焦螺旋，使图像清晰。在Camera工具栏中，点击WhiteBalance下的Auto按钮，软件将自动完成图像的白平衡。如果对自动白平衡效果不满意，可以点击Pick按钮，用鼠标点击预览图像的空白区域，软件将自动计算补偿值，完成白平衡。也可以勾选ShowChannels复选框，手动调节红绿蓝三通道的补偿值。如果使用彩色CCD拍摄荧光图片，建议点击WhiteBalance下的3200K按钮，将白平衡参数恢复至初始值，进行拍摄。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册8彩色图像拍摄3再次点击SetExposure按钮，根据白平衡参数重新确定曝光时间。点击Snap按钮，完成图像拍摄。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册9拍摄实用技巧点击SetExposure后，软件自动计算所得的曝光时间将显示在Camera工具栏下的Exposure输入框中。也可以在此输入框中根据需要自定义曝光时间，然后直接点击Snap按钮拍摄，从而保证各实验组拍摄条件相同。勾选AutoExposure，软件将默认在拍摄前自动计算曝光时间。如果觉得自动曝光所得的图片亮度过高，可以在AutoExposureIntensity输入框中减少百分数，软件将在自动曝光时，相应缩短曝光时间，降低图片亮度。如果图像亮度不均匀，可勾选SpotMeter复选框。将预览窗口中出现的红色虚线方框移至感兴趣区域，点击SetExposure按钮，软件将根据感兴趣区域的亮度自动计算曝光时间。Camera默认参数设置•在Camera工具栏中，除曝光时间（Exposure）和彩色CCD特有的白平衡（WhiteBalance）参数外，还有拍摄模式，拍摄区域，触发方式等一系列系统默认参数设置。如果不慎修改，将影响图像采集的效果。•如果出现误操作，可以点击Camera工具栏Settings下的Default按钮，恢复原始设置。•如果用户常用某种特定的Camera设定参数，可以点击右侧的工具按钮，将参数保存起来。在此后的每次应用中，从下拉菜单中选择使用保存好的参数文件。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册11录制样品的动态变化•如果需要观察样品的连续变化，可以使用MovieRecorder工具栏的录像功能。•依前所述，调节好曝光时间和白平衡参数。•点击MovieRecorder工具栏中的StartMovie按钮，软件将会按照设定的曝光时间联系拍摄图片，形成动画。此时，StartMovie按钮上方会出现Stop按钮。•用户可根据需要点击Pause暂停拍摄，或点击Stop按钮停止拍摄。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册12图像的简单处理•在图像下方的Display工具栏中可以调节直方图对角线上白色节点，改变对角线的起止位置和斜率，从而改变图像的亮度和对比度。•注意：只有在图像拍摄完成后，才能通过这种方法调节图片的亮度和对比度！由于这种方法只改变了图像显示的亮度，而不改变图像数据信息，在图像预览时，调节直方图不能改变拍摄所得图片的效果！荧光图像建议调节参数：对角线左下角节点右移至第一个峰右侧，以压制背景；对角线右上角节点左移至峰结束的位置，以增强信号亮度；左侧第二个节点略向下移，增大Gamma值，进一步压制背景。明场图像建议调节参数：对角线左下角节点右移至第一个峰右侧，以增强信号；对角线右上角节点左移至峰结束的位置，以提亮背景；左侧第二个节点略向上移，减小Gamma值，增强图片整体亮度。选取图片中的感兴趣区域•图像拍摄完成后，在图像下方的Graphics工具栏中，使用ROI按钮，截取感兴趣的区域，形成一张新的图片。感兴趣区域ROI选择按钮。点击此按钮，在图像中用红色虚线方框框选感兴趣区域，使用Ctrl+Shift+C按钮，可将方框中的图像剪贴成一张新的图片。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册14添加标注•图像拍摄完成后，在图像下方的Graphics工具栏中，选择添加比例尺，箭头，文字说明等常用注释。从左至右，依次为文本框，比例尺，箭头和方框的添加按钮。在图像上选中添加好的标注点击右键，选择FormatGraphicalElements，可以更改线条颜色，字体大小等注释格式。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册15手动测量1在图像下方的Graphics工具栏中，选择方框，圆形，不规则形状等常用测量工具。从左至右，依次为方框，圆形和不规则形状的添加按钮。注意：在菜单栏的Graphics菜单中，还提供了直线，点数等其他测量工具。在Measure图像显示界面中，使用选择的测量工具在图像上框选感兴趣的区域。注意：不规则形状需要以左键点击定义各个拐点，右键点击闭合曲线。在Graphics工具栏的工具列表中勾选M复选框。在图像的右侧将出现测量结果列表。手动测量2点击Measure图像显示界面下方Measurement工具栏中的CreateDocument按钮。软件将测量结果生成一个新的图表文件。在菜单栏File菜单中，选择Save，在Save对话框中选择保存文件格式.xml，可将此图表文件保存为Excel文件。注意：调节直方图，改变图像的显示亮度不会改变测量所得的图像灰度！应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册17手动测量3在新生成的图表文件下方的General工具栏中，可选择显示方式。从左至右依次为只显示数据，只显示图和同时显示数据和图的显示模式按钮。从左至右依次为散点图，折线图，柱形图，饼图和环形饼图的图形格式按钮。如选择在图表文件中添加图，需点击图表文件下方ChartDataSource工具栏中的NewDataSource按钮，在数据列表中点击绘图所需数据的列名字母(A,B,C…)，点击ChartDataSource工具栏中的Add按钮，将其加入数据源列表中。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册18图片叠加如需将拍摄所得的二张图片叠加起来，可以在Processing主页面的Method工具栏中搜索AddChannel选项。选中该选项后，该方法名称将出现在Single按钮的上方。打开需要叠加的两张图片，在Input工具栏中点击白色三角形按钮，打开图片列表，分别将两张图片选人Input工具栏。点击Method工具栏上方的Apply按钮，软件将根据两张输入的图片，生成一张新的叠加图片。注意：如果需要叠加三张或三张以上的图片，需要先叠加任意两张，然后用新生成的叠加图像再与其他图像逐一叠加，最终生成所有图像的叠加图像。19多通道图像的展示应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册20•多张图片叠加成多通道图像后，在Gallery图像显示界面中，可以同时显示各通道和叠加通道的图像。•在GalleryTools工具栏中，勾选ShowMerged复选框将显示各通道叠加图像。•勾选Burningraphics后，点击Create按钮，可以将Gallery图像显示界面中的多张图像整合在一张新的图像上。生成对比图片如需合成多张图像同时显示的对比图片，可点击图像显示区域右上角的对比图像按钮，新建对比图片窗口。在对比图片窗口下方的SplitDisplay工具栏的Arrangement输入框中设定排列格式，并勾选SynchronizeDimension复选框，使图像按照相同比例显示。从右侧工具栏中，将图像拖入指定位置。点击SplitDisplay工具栏中的Create按钮，即可生成对比图片。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册图像保存点击工具栏中的保存按钮，或右侧工具栏左下角的保存按钮，均可打开保存对话框，在指定的文件夹中保存打开的图片。在菜单栏的File菜单中选择Save，也可以保存图片。注意：请务必将图片保存为默认的*.czi格式，以保存所有原始图像信息。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册22图像原始信息的显示•以.czi格式保存的图像文件，其原始信息均保存在Info图像界面中。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册23图像输出1如需将原始图片导出成TIF或JPEG图片，可以在Processing主页面的Method工具栏选择Export/Import菜单下的SingleFileExport。选中该选项后，该方法名称将出现在Single按钮的上方。打开待导出的图片，在Input工具栏中点击白色三角形按钮，打开图片列表，将图片选人Input工具栏。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册24图像输出2在Parameters工具栏的Filetype下拉菜单中选择文件格式。通常选择TIFF格式。默认勾选Convertto8Bit，使其成为Windows可接受的图片格式。勾选此复选框，在输出图像中保存调节好的对比度和注释。点击此按钮，打开保存路径对话框，选择目的文件夹保存图片。勾选此复选框，在指定文件夹下以图像名称创建文件夹，保存输出的文件。点击Method工具栏上方的Apply按钮，输出指定图像。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册25图像输出3如需将原始时间序列文件导出成视频动画，可以在Processing主页面的Method工具栏选择Export/Import菜单下的MovieExport。选中该选项后，该方法名称将出现在Single按钮的上方。打开待导出的时间序列文件，在Input工具栏中点击白色三角形按钮，打开图片列表，将文件选人Input工具栏。应用工程师王玥ZENBlueLite简易使用手册26图像输出4在Parameters工具栏的Mode下拉菜单中选择文件格式