细胞工程名词解释细胞工程cellengineering是以细胞生物学和分子

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细胞工程名词解释细胞工程(cellengineering)是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科。动物细胞培养(animalcellculture):是指从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞后,模拟动物体内的生理条件,在体外无菌、适当的温度、湿度、酸碱度、气体环境及一定营养条件下,使其不断地生长、增殖并维持其正常的结构和功能的一种技术。动物器官培养(organculture):是指对离体的整个器官、器官芽基或器官的一部分进行体外培养,构成器官的不同组织仍保持着它们原来的结构与功能,因而培养的器官在结构、功能上与体内相应的器官非常相近。动物组织培养(tissueculture):是指取自动物体的某种组织,不经细胞分散处理,对组织团块直接进行体外培养,组织中的细胞与其邻近的细胞、细胞外基质仍然保持着原本的联系,且细胞一直保持原本已分化的特征,组织的结构和功能在培养过程中无明显的变化。原代培养(primaryculture):从有机体取得的材料(细胞、组织或器官)在培养容器培养到第一次传代前,即为原代培养或初代培养。汇合(confluent):指在培养容器中培养的细胞彼此汇合形成单层。接触抑制(contactinhibition):体外培养的正常动物细胞,在生长过程中达到相互接触时停止分裂和运动的现象。外植快(explant):用于初始体外培养而切下的一小块组织或器官。传代(passage):将细胞从一个培养容器移植到另一个培养容器中,也称为传代培养或再培养(subculture)。细胞系(cellline):原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。如果细胞系不能继续传代或传代次数有限,称为有限细胞系(finitecellline)。如果细胞系可以连续传代培养,称为连续细胞系(continuouscellline)或无限细胞系(infinitecellline)。由原细胞系分离出的具有与原细胞系不同性状的细胞系称为亚系(subline)细胞株(cellstrain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物称为细胞株。如果细胞株不能继续传代或传代次数有限,称为有限细胞株(finitecellstrain)。如果细胞株可以连续传代培养,称为连续细胞株(continiouscellstrain)。由原细胞株分离出的具有原株性状不同的细胞株称为亚株(substrain)。克隆(clone):由单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体。克隆形成率(cloningefficiency):向细胞培养容器内接种单细胞悬液后所形成的克隆数占接种细胞总数的百分比。克隆形成率(%)=克隆数/接种细胞总数×100%集落形成率(platingefficiency):细胞接种到培养容器内所形成的集落数占接种细胞总数的百分比。如果能够肯定每个集落均起源于单个细胞,则可使用另一专业术语-克隆形成率。集落形成率(%)=集落数/接种细胞总数×100%细胞一代时间(cellgenerationtime):单个细胞两次连续分裂的时间间隔。群体倍增时间(populationdoublingtime):处于对数生长期(logarithmicphaseofgrowth)的细胞,其数目增加一倍所需的时间。例如:在此期间,细胞从1x106个细胞增加到2x106个细胞的时间间隔。贴壁依赖性(anchorage-dependent):细胞需贴附于底物或支持物上才能生长的性质。贴壁依赖性细胞(anchorage-dependentcell):某些种类的动物细胞在进行体外培养时,只有贴附于不起化学作用的惰性物体(如玻璃、塑料等)表面时,才能生存、生长并维持其功能,这种类型的细胞被称为贴壁依赖性细胞。大多数的动物细胞均属于此类细胞。非贴壁性(anchorage-independent):细胞不需贴附于底物或支持物上才能生长的性质。非贴壁依赖性细胞(anchorage-independentcell):某些种类的动物细胞在进行体外培养时,其生存、生长并不需要贴壁,可在培养液中悬浮生长,这种类型的细胞被称为非贴壁依赖性细胞。血液、淋巴组织细胞、肿瘤细胞、杂交瘤细胞、转化细胞系等都属于此类细胞。贴壁率(seedingefficiency,attachmentefficiency):一定数量的细胞接种到培养容器内,在一定时间内,贴壁细胞数占接种细胞总数的百分率。饱和密度(saturationdensity):在特定培养条件下,每平方厘米(单层培养)或每毫升培养基(悬浮培养)可达到的最大细胞数。体外转化(invitrotransformation):细胞在体外培养过程中,如果在形态、抗原、增殖或其它特性方面发生了与原细胞不同的、可遗传的变化,这种现象称为体外转化。体外恶性转化(invitromalignanttransformation):细胞在体外培养过程中获得了致瘤性,当把这种细胞接种于适当的动物体内时,可产生肿瘤,这种现象称为体外恶性转化。血清是由血浆去除纤维蛋白后形成的一种复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清的组成及含量会随供血动物的种类、性别、年龄、生理条件和营养条件的不同而不同。水解乳蛋白(lactalbuminhydrolysate)为乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物,含有丰富的氨基酸,是常用的天然培养基。使用时配制成0.5%的的溶液,可以与合成培养基按1:1的比例混合,可用于许多细胞系和原代细胞的培养。胚胎浸出液(embryonicextract)是早期动物细胞培养中应用的一种天然培养基,可以明显地刺激细胞的迅速增殖。随着合成培养基的不断改良和普遍应用,现已很少使用。合成培养基是根据天然培养基的成分,将不同的化学物质按一定的比例混合后,人工配制而成的。细胞融合:指用自然或人工方法、使两个或更多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。细胞杂交(cellhybridization)特指用人工方法把不同类型的两个或两个以上细胞合并成一个细胞的技术。细胞杂交所得到的融合细胞叫杂交细胞(hybridcell)或细胞杂交体(cellhybrid)。基因定位:同种属的细胞融合时,常会出现一个亲本细胞的染色体被优先排除,而另一个亲本的染色体被选择性留下,即染色体分离的现象。由此,可根据表型和与表型特征相对应的基因在特定染色体上。抗体是由B细胞受抗原刺激后所分泌的蛋白质。抗体分子:由四条肽链所组成,两条重链(H链)两条轻链(L链)。结合区:抗体分子上有两个抗原结合区单克隆抗体(monoclonalantibody,简称McAb):将能够产生抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖力的骨髓瘤细胞融合在一起,形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长,又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子,就是单克隆抗体。骨髓瘤细胞:一般不分泌抗体,能在体外无限繁殖和连续继代培养,且为HPRT-或TK-。多用BALB/C小鼠的骨髓瘤细胞。免疫方法:体内法或体外法。体淋巴细胞:经过免疫处理的淋巴细胞,多用大鼠或小鼠。体内法:对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内,可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后,注入到动物体内。3-4天后,在无菌条件下可以取出脾或淋巴结制成悬液,存活率在95%以上的可以用于融合。体外法:直接提取大、小鼠淋巴细胞,调整为107个/ml,加适当浓度抗原,3-4天后,收集被刺激的淋巴细胞。将供体的卵子与精子在体外受精、体外培养受精卵(胚胎)、然后将发育到一定程度的胚胎移植到受体,得到各种动物。由于体外受精一般都是在试管内进行,所以成为试管动物(InVitroAnimal),也称为“体外受精动物”。培养系统是指用无机物和有机物,按一定要求配制而成,并在使用时添加一定比例的蛋白类物质、氨基酸和抗生素而组成的动物早期胚胎体外培养液。克隆(clone)是指通过无性繁殖的手段,从一个动物细胞获得遗传背景相同的细胞群或个体群的过程。八中必须氨基酸(缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苏氨酸、赖氨酸)精子获能的方法:高离子强度液(HIS)、钙离子载体法和肝素处理法。(一)卵母细胞的离体采集方法:抽吸法、切割法、剥离法、腔前卵泡(卵母细胞)收集(二)卵母细胞的活体采集方法:手术法、腹腔镜法

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