什么是色谱分离技术?色谱分离技术又称层析分离技术或色层分离技术,是一种分离复杂混合物中各个组分的有效方法按分离原理分为吸附色谱和分配色谱按操作条件分为柱色谱、薄层色谱、纸色谱等柱色谱薄层色谱色谱分离技术发展简史1960年,俄国M.CTswett创立色谱分离技术20世纪30年代,对叶绿素、胡萝卜素等色素的分离———液相色谱技术的应用20世纪40年代,色谱学发展成为一门新学科色谱分离技术已成为生命科学、材料科学、环境科学必不可少的研究手段色谱分析方法的基本原理吸附色谱:吸附剂表面对不同化合物吸附能力不同,不同化合物在同一溶剂中溶解度也不同。分配色谱:不同化合物在两种不相混溶的液体中分布情况不同。它相当于一种溶剂连续萃取的方法。这两种液体就是固定相和移动相固定相与移动相的作用易溶于移动相的化合物移动速率快易溶于固定相的化合物移动速率慢固定相和移动相使混合物得以分离如何填充柱色谱的色谱柱?注意事项?在锥形瓶中称量7g,并用10mL95%乙醇调匀。在色谱柱中加入5mL乙醇。打开色谱柱活塞,控制流速1滴/s,将氧化铝一次性加入,并用有橡皮塞的玻璃棒轻敲侧壁使其填装均匀。待氧化铝全部下沉后,通过转动轻敲使柱顶形成均匀平面,然后在表面轻轻覆盖一张圆形滤纸32OAl填充色谱柱时的注意事项色谱柱的直径为其长度的1/4-1/10填充时不能留有气泡、断层、暗沟,否则会影响显色的均匀,也不能太紧,否则会使流速过慢。柱色谱常用洗脱剂及其洗脱能力一般极性较大的溶剂易将样品洗脱下来乙烷、石油醚<环己烷<四氯化碳<三氯乙烯<二硫化碳<甲苯<苯<二氯甲烷<三氯甲烷<乙醚<乙酸乙酯<丙酮<丙醇<乙醇<甲醇<水<乙酸选择洗脱剂时,常用一系列极性依次逐渐递增的溶剂,选择洗脱剂时用一系列极性依次增强的溶剂,采用柱色谱分离甲基橙和次甲基蓝时,因为乙醇的极性小于水,洗脱能力小于水,所以先用乙醇、后用去离子水。不可以将乙醇和去离子水的次序调换。乙醇的洗脱能力小于水,水容易将两者洗脱出来,所以分离效果差。设计实验纸层析法分离绿叶中的植物色素实验目的学会科学方法的拓展掌握各色谱方法的区别和联系体会色谱分离技术的发展历程动手分离几种天然色素和有机物实验原理绿色植物的叶子中主要含有叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素等色素这些色素不溶于水、易溶于有机溶剂,故可用乙醇提取。极性:叶绿素b叶绿素a叶黄素胡萝卜素,根据相似相溶原理,在有机溶剂中的溶解度大小规律同上。可用纸层析法进行分离实验材料与试剂新鲜的绿叶(菠菜叶片)碳酸钙、石英砂、丙酮、层析液(石油醚、丙酮、苯的体积比为20:2:1)托盘天平、干燥的定性滤纸、研钵、毛细吸管、100mL烧杯、试管、培养皿盖铅笔、剪刀实验步骤装置图注意事项研磨时要迅速、层析时要加盖,因为层析液是有毒性且易挥发的有机溶剂。画滤液细线时,以细、直、浓绿为标准,上次画线干燥后再重复画2-3次滤液细线不能触及到层析液预计现象滤纸条上出现四条颜色、宽度不同的色带最宽:叶绿素a最窄:胡萝卜素距层析液端最近:叶绿素b距层析液端最远:胡萝卜素