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移液器规范使用培训深圳华大基因研究院实验平台2012年更是从事生物学研究“未来战士”手中的“枪”！移液器是实验者手中的工具！一、移液器种类和品牌二、移液器使用和注意事项三、移液器示范操作（真人演示）四、移液器的检测和维护主要内容一、移液器种类与品牌移液器具种类滴管移液管移液器移液器手动移液器电动移液器单道移液器多道移液器按照操作动力方式分类按照孔道数量分类按照排液方式分类空气排代式（华大常用）活塞排代式常用移液器品牌1.Gilson（吉尔森）2.Eppendorf(艾本德）3.Rainin（瑞宁）4.Brand（普兰德）5.Thermo（雷勃）6.Dragonmed（大龙）……Eppendorf2.5ul单道移液器构造图单道移液器构造图Eppendorf100ulGilson单道移液器构造多道移液器构造1控制钮第一档：液体体积计量，吸入并排出液体第二挡：吹出吸嘴内剩余液体2调节钮用于设定移液量，对固定移液器而言，此钮仅用于调节功能3弹射键弹除吸嘴4调整开孔对移液器进行调整时插入扳手5弹射套筒6多道移液器下半段7盖板8下半段分离键Eppendorf8道移液器二、移液器使用和注意事项华大常用的移液器品牌和种类华大基因目前常用的自动移液器品牌为Eppendorf(德国）,Gilson（法国）,Rainin（美国）,Dragon-med（芬兰）等,实验平台以Eppendorf移液器为主。Eppendorf全套移液器(0.1-2.5ul–1ml)Gilson移液器(0.2-2ul-1ml)Rainin移液器(0.1ul-2ul-200ul)Dragon-med移液器(0.1-2.5ul-1ml)华大基因目前采用的与移液器配套吸头主要为Axygen公司所生产1ml(1000ul)10ul200ul带滤芯移液器使用相关材料用具1.5ml离心管0.5ml离心管进口0.2ulPCR薄壁管0.2mlPCR8连管单管移液器使用相关材料用具冻存盒离心管架96孔板如何正确合理的使用移液器？我做实验有好几年了，很熟练了，移液器操作肯定是没问题的！！？？我以前从没用过，我应该怎样正确使用？？？这个还不简单？Justapieceofcake!!!使用前第一步：选择合适的移液器第一，完成一个移液循环拇指的移动距离短，意味着舒适度更高；第二，比较相同量程的移液器完成一次排液（一定要按到底）所需的拇指用力，这是影响舒适性的关键，用力越少意味着长期使用造成手指损伤的风险越小；第三，装卸吸头，同样是越省力越好；第四，移液器的重量适中，过重会增加手的负担，但过轻也往往意味着材质可能差强人意；第五，其它的辅助设计，如壳体的磨砂设计以及指钩设计，有助于进一步提高舒适性。PhysioCare概念移液器研发过程中的人体工程学研究什么是适合自己的移液器：使用前第二步：三检查1.对吸头抽样、筛查，计算磨刺数量，弯头数量，不合格吸头数超过1/3的及时上报，不予使用。3.检查是否漏液2.检查移液器是否松动，动调到其中小量程，反复吹打10次，检查枪回味感觉移液器使用前注意事项1.使用前观察移液器是否已调至量程最大处，是否垂直放置在移液器架上；2.移液器在使用前，需要定期用肥皂水清洗或60%异丙醇消毒，再用双蒸水清洗晾干；RNA实验室每次使用前都要用RNAZap处理；3.发现移液器表面有损坏或者标签脱落，需要及时报告并与移液器维修人员联系保修；4.移液器有明显损伤的动作必须记录（例如：移液器摔落地上或与其它坚硬之物发生撞击）；5.一般情况下，移液器不得无故带出实验室，实验完毕，移液器应及时归位保管。移液器取液工作原理空气代排式移液器移液器吸排液基本操作Step1:给移液器装上吸头，将移液枪垂直插入吸头，顺时针旋转1/4到1/2圈，同时用力上紧即可。Step2:吸取液体，将移液器打紧到1档，吸头竖直浸入到液体中3mm左右，缓慢松开按钮，待液体进入吸头内后抽出液面1档移液器吸排液基本操作Step3:打出液体。将吸头尖端靠近杯壁下沿（管壁），将按钮打至2档，将吸头内液体缓慢打出，若吸头顶端还有少许液体，可以靠在杯壁（管壁）边缘利用液体张力贴在管壁上Step4:打掉吸头2档移液器吸液注意事项(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入移液器内腐蚀柱塞而造成漏气；(2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取粘稠溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差；(3)移液器未装吸头时，切莫移液；(4)在设置量程时，请注意旋转到所需量程数字清清楚楚在显示窗中，所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器；(5)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）；(6)严禁使用移液器吹打混匀大量液体；(7)不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。取液范围为移液器的中上量程。如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。移液器操作常见错误以Eppendorf移液器为例1.装配移液器吸头对于单道移液器，将移液器端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可。特别提示用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期这样操作，会导致移液器中的零部件因强烈撞击而松散，严重的情况会导致调节刻度的旋钮卡住。2.装配合适吸头选取合适的吸头，否则可能损坏移液器前端移液器操作常见错误3.吸液移液器倾斜吸液，会导致吸液不准确，要轻吸轻放。吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。移液器操作常见错误将移液器垂直挂在移液器支架上，切勿在吸嘴中有液体时平置移液器，以防液体流入移液器！移液器操作常见错误3.移液器放置三、实验室移液器吸液操作流程（真人演示）1、实验前台面准备实验前移液器处于最大量程2、单道移液器移液过程握枪加吸头调节移液量程吸液排液打掉吸头3、多道移液器取液过程握枪正确姿势（逆时针转动）加吸头前倾上紧吸头后倾加紧吸头吸液排液过程与单道移液器相似打掉吸头4移液器使用过程中的不当操作！用手托扶枪身前端超过最大量程吸液使用完毕不收拾桌面用移液器搅拌大量液体4移液器使用过程中的不当操作！四移液器使用检测、校准和维护移液器使用检测（一）气密性检测移液器吸满液体后，手持垂直放置15s，检查吸嘴的尖头有无液滴，如有，则说明漏气（漏液）。（二）准确性检测1)量程小于1μl，建议使用分光光度法检测。将移液器调至目标体积，然后移取染料溶液，加入一定体积的蒸馏水中，测定溶液的稀释度（334nm或340nm），重复几次移液操作，计算移液器的精确度。准确性检测（量程1ul）气密性检测2)量程大于1μl，可以用称重法检测。通过对水的称重，转换成体积，鉴别移液器的准确性。专业校准必须在专业的实验室操作进行。注意：称重法的实验室必备条件是高度灵敏的分析天平（定期校准）、双蒸水和称量容器。水、移液器和吸嘴必须具有相同的温度。移液器校准周期R&D实验室一般半年一次对移液器进行校准；GMP&GLP三个月进行一次校准。校准环境：室温20～25℃；相对湿度：45%～80%；工具：电子天平、小烧杯移液器维护保养事项1、定期清洁移液器，用酒精棉即可，主要擦拭手柄、弹射器及白套筒外部;2、定期检查移液器的密封状况，一旦发现密封老化或出现漏液，须及时更换密封圈；3、每年对移液器进行定期校正（视使用频率而定）；4、绝大多数移液器，在使用前和使用一段时间后，要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性；5、使用中若液体不小心进入活塞室应及时清除污染物；6、在吸取过高挥发、高腐蚀液体后，应将整支移液器拆开，用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁，并在晾干后安装使用。以免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面，对活塞杆产生腐蚀，损坏移液器；7、根据材料不同决定，移液器可以进行紫外消毒、高压消毒；8、发现问题及时找专业人员处理，经过专业训练的人员才能拆除枪体。移液器的拆卸安装