动物血液学检查

血液学检查dxx•血液学（hematology）是以血液和造血组织为主要研究对象的医学科学的一个独立分支学科。•祖国医学早在《黄帝内经》一书中有关于血液的记载，国外在公元前3～4世纪时已有人提到血液的名字。然而对于血液组成和功能的认识长期以来是唯心的和不完全的，有些概念是从点滴的现象和不完整的观察中推测出来的。系统地和科学地研究血液开始于显微镜的问世以后，用显微镜观察血液中的红细胞（1673年）、白细胞（1749年）和血小板（1842年），称为血液中的有形部分，是血液学家研究的重点对象。血液中的体液部分，亦称为血液无形成分（或血浆），许多年来由生物化学家和免疫学家所研究。目录•1，血液的采取方法•2，抗凝血的制备•3，血浆、血清的制备•4，血红蛋白的测定•5，红细胞(RBC)计数•6，红细胞压积(PCV)测定方法•7，红细胞沉降率(ESR)的测定•8，白细胞(WBC)计数•9，白细胞分类计数•10，血小板(PC)计数血液的组成•血液是由液态的血浆和悬浮在血浆中的血细胞组成。•全血＝45％血细胞＋55％血浆•血细胞：红细胞、白细胞、血小板；•血浆：（90－92％）水＋（8－10％）溶质•溶质：血浆蛋白（白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原）、无机盐、非蛋白氮、不含氮的有机物。•血液流出血管后，如不经抗凝处理，很快会凝集成血块，随着血块逐渐缩紧还会析出的淡黄色清亮液体，叫血清。•血清中没有纤维蛋白•血清中缺乏血浆中参与凝血反应的一些成分。出血时，输血清没用，要输血红蛋白。•血清是不含纤维蛋白原的血浆。血液的组成血液的理化特性1.颜色：红色动脉血：鲜红（血红蛋白含氧多）静脉血：暗红（血红蛋白含氧少）2.密度：畜禽全血的相对密度1.040-1.0753.气味：血液中由于存在挥发性脂肪酸而有腥味，又因其中含有氯化钠而稍带咸味。血液样品采集1.保定2.消毒3.采样血液的采取方法血液的采取方法•1，采血部位和方法•犬采血部位在前肢的前臂头静脉和后肢的隐静脉。采血时，犬侧卧保定，局部剪毛消毒，助手或犬主人用手握住采血部的向心端，或用橡皮条扎紧，使静脉怒张，用消毒干燥的注射器采血。•2，注意事项•（1）血样必须在进行任何药物治疗前采集，如果已经进行了治疗，须在采血记录上予以注明，否则动物接受了某些药物治疗，一些检查方法就无法得到准确的治疗。•（2）保定过程中尽量减少动物应激，否则会造成样品结果误差。抗凝血的制备•1，抗凝剂及其应用•血液检查多用抗凝血液，为防止血液凝固，通常在血液中加一下抗凝剂，而制备抗凝血。抗凝剂作用适用范围乙二胺四乙酸二钠草酸钾草酸铵与草酸钾合剂枸橼酸钠肝素脱钙作用脱钙作用脱钙作用脱钙作用抗凝血酶一般血液检查不宜作钾定量不宜作氮定量血沉、血凝固一般血液检查•2，抗凝血的制备方法•根据检测项目选择特定的抗凝剂。采集血样后，将其装入含有适当抗凝剂的容器内，轻轻摇动，使其与抗凝剂混合。•3，注意事项•（1）血液采集后要尽快与适当的抗凝剂混合，摇动手法应轻柔，剧烈晃动可造成溶血，红细胞内的化学物质释放入血浆，从而影响分析结果的准确性。•（2）采血后1h内不进行检测的样品应冷藏，检测前应先取出恢复到室温，并轻轻摇匀。抗凝血的制备血浆、血清的制备•血液流出血管后，如不经抗凝处理，很快会凝集成血块，随着血块逐渐缩紧还会析出的淡黄色清亮液体，叫血清。•血清与血浆的区别：•（1）血清中不含纤维蛋白原，血浆中含有纤维蛋白原。•（2）血清中缺乏凝血因子，血浆中含有凝血因子。•血浆的制备方法：•（1）采集血液样品，置于含有适量抗凝剂的试管内。•（2）缓慢摇动试管，使抗凝剂与血液混匀。•（3）2000-3000r/min离心5-10min，上层即为血浆。•（4）小心地用毛细移液管将血浆层移出至空白试管内。•（5）标记日期、采集时间、动物名称和病历号，冷藏或冷冻保存。血浆、血清的制备•血清的制备方法：•（1）采集血液样品，并将其放置于不含有抗凝剂的试管内。•（2）室温下或25-37℃温水中斜置，自然凝集20-30min。•（3）密封试管，2000-3000r/min离心10min，析出淡黄澄清的液体即为血清。•（4）用毛细移液管将血清移出至空白试管内。•（5）标记日期、采集时间、动物名称和病历号，冷藏或冷冻保存。血浆、血清的制备血红蛋白的测定•血红蛋白测定通常是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度，用g/L表示。•1，器材与试剂•（1）沙利氏血红蛋白计。在测定管上有两种刻度，一侧表示血红蛋白在每百毫升血液内的克数，另一侧表示百分数。国产的血红蛋白计是以每百毫升血液含14.5g血红蛋白做为100%而设制。•（2）0.1mol/L盐酸血红蛋白测定-沙利氏法•2，原理•血红蛋白本身的色泽常随结合的氧量而改变，不便于比色。在定量盐酸中加入少量稀盐酸，Hb被酸化后变为高铁Hb，呈现稳定的褐色，与标准柱相比，求出每百毫升血液中血红蛋白的克数或百分数。血红蛋白的测定•3，操作步骤•（1）向沙利氏比色管内加入1%盐酸5滴。•（2）用沙利氏吸血管吸血至20μl刻度处，用干脱脂棉擦去吸管外沾附的血液。•（3）徐徐吹入沙利氏比色管内，不要产生气泡，再反复吸、吹数次，以洗出沙利氏吸血管中的血液。轻轻振动比色管，使血液与盐酸充分混合。•（4）静置10min，待血液变成褐色后，缓缓滴加蒸馏水，每加1滴，用细玻璃棒搅动一次，直到颜色与标准色柱完全相同为止。液柱凹面所指的刻度数，即为每百毫升血液中血红蛋白的克数。血红蛋白的测定•4，正常值•犬的血红蛋白为120-194g/L，猫为110g/L•5，临床意义•（1）血红蛋白增多：主要是见于脱水而血液浓缩的各种疾病，如腹泻、呕吐、大出汗、多尿等，也见于肠便秘及某些中毒病；血也见于真性红细胞增多症，是一种原因不明的骨髓增生性疾病，目前认为是多能干细胞受累所致。其特点是红细胞持续性显著增多，全身总血量也增加，见于马、牛、犬和猫。•（2）血红蛋白量减少：主要见于各种贫血。血红蛋白的测定红细胞(RBC)计数•红细胞计数即测量单位体积（L）血液中红细胞的数量，用1012个/L表示。红细胞计数显微镜计数法红细胞计数板•1，器材与试剂•（1）血细胞计数板。•（2）血盖片。•（3）沙利氏吸管、小试管、试管架等。•（4）赫姆氏稀释液、生理盐水。红细胞(RBC)计数红细胞(RBC)计数2，操作步骤（1）稀释血液：用5mL刻度吸管吸取红细胞稀释液4.0ml。用沙利氏吸管准确吸取供检血液至10μl或20μl刻度处，用棉球擦去管尖外部余血，将吸管插入盛有红细胞稀释液的试管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液洗吸管3次，使血液与稀释液充分混合。•（2）充液：将计数板和盖玻片擦净，玻棒蘸取1滴混悬液充入血细胞计数池内，静置2-3分钟，待红细胞下沉，开始镜检计数。•计数时，先用低倍镜后转高倍镜，依次计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。对于压线的红细胞，应采取数上不数下，数左不数右的原则，保证计数域的一致性，使计数准确。充液计数方法3,计算•红细胞数（个/L）=5个中方格内的RBC数×5×10×106×血液稀释倍数（400或200）•式中：×5表示5个中方格内红细胞数折算为1个大方格红细胞数•×10因一个大格容积为0.1立方毫米，换算为1立方毫米•×200血液稀释倍数•×106将1立方毫米换算为1L•4，临床意义•（1）红细胞数增多：•相对性红细胞增多：多为血液浓缩而引起，常见于腹泻、呕吐、大出汗、急性胃炎、肠阻塞、肠变位、渗出性胸膜炎、渗出性腹膜炎及发热性疾病等。•绝对性红细胞增多：较为少见，多由于红细胞增生所致。•（2）红细胞数减少：见于各种类型的贫血，如失血、溶血等。红细胞(RBC)计数•5，注意事项•（1）红细胞计数关键是防凝、防溶，取样准确。•（2）稀释液充入计数室的量不可过多或过少。•（3）显微镜载物台应保持水平，否则，计数室的液体流向一侧而使计数不准。红细胞(RBC)计数红细胞压积容量PCV-温氏法红细胞压积(PCV)测定方法红细胞压积：压紧的红细胞在全血中所占的容积百分比，称为红细胞比容。红细胞压积(PCV)测定方法•操作方法•1，将双草酸混合液0.5mla（或10%EDTA，2滴）放入小瓶中，将小瓶置于烤箱中烤干。•2，用注射器抽血5ml，注入小瓶中，摇匀，勿使其凝固。•3.用长针头吸满抗凝血,插入温氏管底部,轻捏胶皮乳头,自下而上挤入血液至刻度10处。•4.置离心机中,以3000转/min的速度离心30-45min,取出观察,记录红细胞层高度,再离45min,如与第一离心的高度一致,此时红细胞柱层所占的刻度数,即为PCV数值,用%表示。如无离心机,静置24小时后,读取数值。红细胞沉降率(ESR)的测定1，红细胞沉降率是指将抗凝血装入特制的玻璃管内，在一定的时间内观察红细胞下降的毫米数，采用魏氏法测定。2，原理红细胞沉降速度主要与红细胞串钱状的形成、红细胞数目的多少、血浆蛋白的组成有关。通常血浆中球蛋白、纤维蛋白原和胆固醇含量增多时，可加速红细胞叠连、沉降。血浆中白蛋白和卵磷脂含量增多时，则红细胞叠连、沉降减慢。•3，临床意义•血沉测定是一种非特异性试验，它只能说明体内存在有某种病理过程，不能单独用于疾病诊断。•发现贫血时，血沉显著加快。•脱水时，血沉显著变慢。红细胞沉降率(ESR)的测定白细胞(WBC)计数白细胞计数是测定每升血液中各种白细胞总数，以109个/L表示。白细胞稀释液：3%（V/V）冰醋酸溶液或1%盐酸溶液，混合后加2滴10%结晶紫或1%美兰染液，使呈淡紫色，以便与红细胞稀释液相区别。原理：一定量的血液用冰醋酸溶液稀释后，可将红细胞破坏，然后在细胞计数板的计数室内计数一定容积的白细胞，以此推算出每升血液内白细胞数。白细胞分类计数是将血液制成涂片，经瑞氏或姬姆萨氏染色后在油镜下按白细胞的形态学特征进行分类，求出各类型白细胞比值。白细胞分类计数•血小板：是从骨髓成熟的巨核细胞裂解脱落下来的活细胞，无色、无细胞核，呈椭圆形、杆形或不规则形。•常用复方尿素稀释液。•原理：尿素能溶解红细胞和白细胞而保存完整形态的血小板，血液经此稀释后在血细胞计数室内直接计数，以求每升血液中的血小板数，以109个/L表示。血小板(PC)计数血小板具有重要的保护机能，参与血液凝固。血小板计数对于评价血液凝固机制提供一定的依据。血小板(PC)计数宠物血液生化的意义•1.血糖【正常值】3.9--5.9mmol/L（约60--110mg/dl）。【临床意义】对于胰岛素，糖皮质激素、肾上腺素等分泌不足或过多有鉴别意义；对于监测糖尿病的治疗效果有一定意•2.葡萄糖耐量【正常值】服糖后60分钟血糖160mg/dl，（9mmol/L）120分钟恢复到空腹水平；各次尿中无糖。【临床意义】糖耐量曲线，对于糖尿病、肾性糖尿病、甲亢等有诊断和鉴别诊断意义。3.二氧化碳结合力【正常值】23--31mmol/L。【临床意义】对于判断代谢性或呼吸性酸中毒、碱中毒有一定意义。4.尿素氮（BUN）【正常值】3.2--7mmol/L。【临床意义】判定肾功能。增高可见于各种原因的肾功能损害；肝功能严重损害时减低。宠物血液生化的意义•5.肌酐【正常值】88--177μmol/L。【临床意义】对急、慢性肾炎的诊断和预后有重要意义。6.肌酸【正常值】230--530μmol/L。【临床意义】肌肉严重损伤，肾脏重度损害或尿闭时增高。7.尿酸【正常值】119--238μmol/L。【临床意义】增高：临床多见于痛风、急性及慢性肾炎、白血病、多发性骨髓瘤等。8.钾【正常值】3.5--5.3mmol/L。【临床意义】判定电解质及酸碱平衡情况。宠物血液生化的意义•9.钠【正常值】136--145mmol/L。【临床意义】判定电解质及酸碱平衡情况。10.氯【正常值】100--106mmol/L。【临床意义】判定电解质及酸碱平衡情况。11.钙【正常值】2.2--2.7mmol/L。【临床意义】判定甲状旁腺机能，维生素Ｄ缺乏症，骨肿瘤，多发骨髓瘤有意义。12.无机磷【正常值】1.0--1.6mmol/L。【临床