实验动物基本知识及基本操作、实验方法

实验动物基本知识及基本操作、实验方法—熟练的技术是实验成功的基础宁波天一职业技术学院机能学实验教研组实验动物是生命科学研究最重要的和不可替代的实验材料。实验动物和动物实验是研究包括人类在内的生命活动及其疾病防治规律的基本手段。一、实验动物（experimentalanimal）婚垫雄蟾（一）实验动物的种类。蟾蜍（Toad）蟾蜍属两栖动物，其一些基本生命活动与哺乳动物近似，其离体组织和器官所需的生理环境比较简单(无须供氧和恒温)。蟾蜍常用于神经生理、肌肉生理、心脏生理，微循环、水肿等实验。雄蟾雌蟾（一）实验动物的种类。小鼠（Mouse)小鼠被广泛的用于生物学、医学、兽医学、生理学、遗传学、药理、毒理、肿瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生产和教学。（一）实验动物的种类。大鼠（Rat)大鼠应用于生理学、药理学、免疫学，内分泌学、神经生理、营养学、传染病、肿瘤和肝外科等的研究。（一）实验动物的种类。豚鼠（Guineapig)常用于免疫学、微生物学、传染病学、听觉生理、实验性坏血症等研究。（一）实验动物的种类。家兔(Rabbit)常用于免疫学、肿瘤、实验生理学、生殖生理、遗传性疾病等的方面的研究，制造生物制品。（一）实验动物的种类。猫（Cat）猫的神经系统和循环系统较发达，与人很相似。常用于神经、循环和呼吸方面的实验。（一）实验动物的种类。犬(Dog)常用于基础医学、药理、毒理学、实验外科学、行为学、肿瘤学等方面研究在以犬为实验动物的研究成果中，只有应用Beagle才能被国际公认。（一）实验动物的种类。猪(Pig)常应用于皮肤烧伤、肿瘤学、免疫学、心血管及糖尿病、遗传性和营养性疾病、移植、外科手术等方面的研究（一）实验动物的种类。猴(Monkey)主要用于传染病学、药理学和毒理学、生殖生理、口腔医学）营养、代谢、行为学和高级神经活动研究及老年病、器官移植、眼科、内分泌病和畸胎学、肿瘤学（二）实验动物的分类近交系近交系一般是指采用20代以上全同胞兄弟妹妹或亲子（子女与年青的父母）进行交配，而培养出来的遗传基因纯化的品系。（F＝98.6%）杂交一代由两个近交系杂交产生的子一代称为杂交一代。它既有近交系动物的特点，又获得了杂交优势。封闭群在同一血缘品系内，不以近交方式，而进行随机交配繁衍，经五年以上育成的相对维持同一血缘关系的种群。1.按遗传学特征分类突变品系在育种过程中，由于单个基因的突变，或将某个基因导入，或通过多次回交“留种”，而建立一个同类突变品系，此类个体中有具同样遗传缺陷或病态。非纯系即一般任意交配繁殖的杂种动物。杂种动物具有旺盛的生命力，适应性强，繁殖率高，生长快，易于饲养管理。个体差异大，反应性不规则，实验结果的重复性差。但其中包含有最敏感的与最不敏感的两种极端的个体。（二）实验动物的分类普通动物（Conventionalanimals,CV）又称一级动物，是微生物控制要求中最低的一个级别的动物，要求不带有动物烈性传染病和人畜共患病原体。清洁动物（Cleananimals,CL）又称二级动物，除不带有普通动物应排除的病原体外，还不应携带对动物危害大和对科学实验干扰大的病原体。2.按微生物学分类无特殊病原体动物（Specificpathogensfreeanimal，SPF动物）SPF动物又称三级动物，除不带有普通动物、清洁动物应排除的病原体外，还应排除有潜在感染或条件性致病的病原体，以及对实验干扰大的病原。无菌动物（Germfreeanimals，GF）和悉生动物（Gnotobioticanimals，GN）四级动物。无菌动物是指采用当前的技术手段无法在动物体表、体内检出一切其他生物体。例如，过敏反应或变态反应的研究宜选用豚鼠，因为豚鼠易于致敏。因家兔体温变化灵敏，故常用于发热、热原检定、解热药和过热的实验。狗、大鼠、家兔常用于高血压的研究。实验动物的种属选择应注意影响动物实验效果的各种因素。尽可能选择其结构、功能和代谢特点接近于人类的动物，不同种属的动物对于同一刺激的反应也不同。实验动物品系的选择同一种属动物的不同品系，对同一刺激的反应也有很大差异。（三）实验动物的种、系选择。例如：DBA／2小鼠100％的可发生听源性癫痫发作；而C57BL小鼠根本不出现这种反应实验动个体的选择同一品系的实验动物，对同一刺激物反应存在着个体差异。年龄、体重、性别、生理状态和健康情况不同，往往导致对同一刺激的不同结果。敏感性：幼年老年成年10～28周龄小鼠老年小鼠有些犬因饥饿、创伤等原因尚未正式做休克实验时，即已进入休克氯丙嗪血糖升高血糖降低5～6周龄的雄性大鼠5～6周龄的雌性大鼠麦角新碱有镇痛效果无镇痛效果动物血压高动物血压低降压药降压不降压•动物的捉拿、固定•动物性别的辨别•实验动物的编号•常用给药方法二、实验动物的基本操作•蟾蜍（一）动物的捉拿、固定AB图3-2-1青蛙(或蟾蜍)捉拿法图3-2-2青蛙(或蟾蜍)固定法•小鼠（一）动物的捉拿、固定图3-2-2小白鼠的捉拿法•大鼠、豚鼠•家兔（一）动物的捉拿、固定图3-2-5兔捉拿方法AB图3-2-4大鼠和豚鼠的捉拿和固定•蟾蜍•小白鼠•家兔（二）动物性别的辨别雄雌图3-2-7小鼠性别的特征•染色法•挂牌法（三）动物的编号213456789102030407050806090图3-2-8小鼠背部的编号方法（四）常用给药方法经消化道给药法自动摄取法喂药法灌胃给药法经直肠给药图3-2-9小鼠灌胃法胃管开口器图3-2-10兔灌胃方法（四）常用给药方法注射给药法皮下注射腹腔注射图3-2-11小鼠腹腔注射方法（四）常用给药方法注射给药法肌肉注射静脉注射8.5cm3.5cm1cm图3-2-12小鼠尾静脉注射法图3-2-13兔耳缘静脉注射法（四）常用给药方法涂布给药法药物经皮肤吸收、局部作用或致敏作用时间根据药物性质和要求定（五）动物被毛的去除法拔毛法剪毛法剃毛法脱毛法三、实验动物的麻醉常用麻醉药氨基甲酸乙酯氯醛糖巴比妥类乙醚局部麻醉药三、实验动物的麻醉常用麻醉方法全身麻醉吸入麻醉注射麻醉局部麻醉三、实验动物的麻醉麻醉操作要求麻醉的基本原则注意不同个体的耐受性及时判断麻醉的深浅静脉麻醉坚持先快后慢原则补充麻醉麻醉注意事项四、实验动物手术术前准备理论准备：了解结构、方法、应急措施等材料准备：动物准备、器械准备药品准备、其他准备仪器准备四、实验动物手术手术麻醉动物固定动物备皮皮肤切开组织分离结扎止血手术部位保护消毒缝合抗菌（具体方法在实验前介绍）五、实验动物的处死方法蟾蜍：剪去头部大白鼠、小白鼠：脊椎脱臼法断头法打击法豚鼠、兔等：空气栓塞法急性放血法药物法