姜黄素的提取

姜黄中姜黄素的提取－－索氏提取法一、实验目的1.掌握用索氏提取法提取姜黄浸膏的原理及操作。2.熟悉重量分析的基本步骤。关键控制点：1.正确的选择溶剂；2.抽提管中样品的装样是否保持虹吸正常；3.抽提的次数与间隔时间会影响提取效果；难点：1.定量检测时原料及成品的干燥称量；2.溶剂的正确回收；二、实验原理姜黄素能溶于脂溶性有机溶剂。本实验利用能溶于脂溶性溶剂这一特性，用脂溶性溶剂将姜黄素提取出来，借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行，通常使用的脂溶性溶剂为乙醚，或沸点为30℃～60℃的石油醚、二氯甲烷、乙醇等。用此法提取的脂溶性物质除姜黄素外，还有脂肪、游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故称为“浸膏”。同时，样品中结合状态的脂类（主要是脂蛋白）不能直接提取出来，所以该法又称为游离脂类定量测定法。索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将样品先回流1～2次，然后浸泡在溶剂中过夜；次日再继续抽提，则可明显提高提取率。或改用棉花代替滤纸。用棉花垫底后直接装样虹吸。三、实验器材1.电子天平。操作指南：调整水平度，插上电源，启动“ON/OFF”开关，按一下回零挡“TARE”，使屏幕上显示0.0000。推开玻璃门，轻轻将样品置于称量盘上，关上玻璃门，待屏幕上显示的数字稳定后记录下来，即为样品的重量（g）。注意，每次称量前都必须按一下回零挡“TARE”，使屏幕上显示0.0000。称量室内尤其是称量盘上必须保持清洁、干燥；若有药品撒落，立即用软毛刷清理干净。2.HH-2型数显恒温水浴锅操作指南：调整水平度，插上电源，启动“3.101C-3型电热鼓风干燥箱操作指南：插上电源插头，按下绿按钮（电源开关）和黄按钮（鼓风开关），将“设定/测量”按钮置于设定挡，调节“温度设定”旋钮，使显示器中的数字为所需的温度，再将“设定/测量”按钮置于测量挡，此时显示器中的数字表示烘箱内的实际温度。将加热旋钮（一共有3个）打到适当的挡位，烘箱开始加热。此时绿灯亮，当温度达到所设定值时，红灯亮，烘箱停止加热。以后烘箱会一直通过不断的加热-停止过程来保持恒温，红绿灯也会相应地交替闪亮。请注意，本实验由于设定温度为120℃，故在取出被烘干物品时，请戴上手套。4.索氏提取仪由冷凝管、抽提管和平底烧瓶三个部件组成，通过标准磨口相对接。安装装置：用铁架台、２只十字夹、２只烧瓶夹、２根乳胶管和１套索氏提取仪来安装装置。注意按照由下而上的顺序来安装。固定点分别是平底烧瓶的颈部和提取管的颈部，索氏提取仪的高度以平底烧瓶的瓶颈略高于恒温水浴锅的液面为宜。注意：用烧瓶夹夹玻璃仪器时，要先用手找好感觉，不能太紧（否则会夹破）也不能太松（否则会打滑而导致索氏提取仪的标准磨口接口漏气）。5.其它器材：不锈钢镊子、药勺、滤纸、铁架台、十字夹、烧瓶夹、手套、乳胶管。四、实验试剂称取10—20克样品。将样品在80℃～100℃电热鼓风干燥箱内烘去水分，一般烘4h，烘干时要避免过热。样品颗粒不宜太大，一般要在研钵中研碎样品。样品若是液体，应将一定体积的样品滴在滤纸上，在60℃～80℃电热鼓风干燥箱内烘干后，再进行实验。乙醇五、实验操作准备工作：将恒温水浴锅的水温事先加热（80℃）。务必保证提取管和烧瓶内干燥、洁净；若否，将其洗净并置于干燥箱内120℃烘干。折滤纸斗：取一张Ø11cm的滤纸，折成筒状，再将其一端折起来封死，便做成了滤纸斗。称样：取干燥的姜黄粉作为实验样品。将滤纸斗在电子天平上称重，然后用药勺取样品装入滤纸斗中，把滤纸斗的开口处折起来封死；防止样品泄出滤纸斗。调整滤纸斗的高度，使其放在抽提管中时略低于虹吸管的上弯头处。将装好样品的滤纸斗放在电子天平上称重，两质量之差即为样品的质量。提取：将索氏提取仪从下至上安装。首先安装好烧瓶，并调整其高度，使其刚好能浸入水浴锅中的水中。将装置从水浴锅的水中取出，继续安装提取管，把装有样品的滤纸斗放入提取管内，向提取管中缓缓倒入乙醇直至液面达到虹吸管上弯头部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入乙醇，使其液面达到第一次液面的一半。用乳胶管将冷凝管与自来水管相连，将冷凝管安装到提取管上，检查一下，确保所有接口均对接完好（不漏气，不打滑）。轻轻打开自来水（冷凝用），将索氏提取仪整个装置放入恒温水浴锅中加热提取（水温90℃左右。提取时间2～4h，约虹吸20次以上，记录每次虹吸所需的时间和虹吸次数。附注：若要将样品的姜黄素提取完全，提取时间至少为12h以上。由于实验时间的限制，我们的提取率只能达到90％左右。回收乙醇：提取2h后，当乙醇在提取管中的液面即将达到虹吸管的上弯头处时，从水浴锅中取出索氏提取仪装置，让乙醇虹吸而流入瓶中，取下回流管，取出滤纸桶及姜黄粉，继续放入恒温水浴锅中加热回收乙醇（取下平底烧瓶，回收提取管中的乙醇）直至冷凝管下端无乙醇滴下，表明平底烧瓶中的乙醇已经蒸干。注意：必须蒸干后才能放入干燥箱烘干，否则会引起火灾。称量粗浸膏质量：将平底烧瓶放入120℃的电热鼓风干燥箱中烘15min，取出冷却后称重（须戴手套，以免烫伤）。添加适量乙醇溶解后加入适量硅胶粉，将烧瓶放入热水中让乙醇蒸发，到处干粉。再将平底烧瓶用洗涤剂洗净，于120℃的电热鼓风干燥箱中烘干（约15min），取出冷却后称重，两者的质量之差就是粗浸膏的质量。清洁从提取管中取出滤纸斗，清洗提取管，整理好桌面上的仪器和试剂，并注意清洁自己的操作台，请老师验收。计算样品粗浸膏的含量（%）=（粗浸膏的质量/样品的质量）*100%索氏提取仪示意图记录与计算汇总虹吸次数12345678910…虹吸时间滤纸斗质量（g）滤纸斗+样品质量（g）样品质量（g）烧瓶+粗浸膏质量（g）烧瓶质量（g）粗浸膏质量（g）虹吸时间（min）提取次数样品中粗浸膏的含量（%）计算公式X=[(m1-m2)/m]×100式中：X----样品中粗脂肪的质量分数,%;m----样品的质量,g;m0---脂肪烧瓶的质量,g;m1---脂肪和脂肪烧瓶的质量,g.样品的质量m/g脂肪烧瓶的质量m0/g脂肪和脂肪烧瓶的质量m1/g第一次第二次第三次恒重值思考题1.简述索氏抽提器的提取原理及应用范围？2.潮湿的样品可否采用乙醚直接提取？为什么？答：不可以，乙醚会溶解水，把水带入脂层中，会影响乙醚的渗透与提取效果。3.使用乙醚作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？答：乙醚是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。检查方法：取5mL乙醚于试管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振摇1min。静置分层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加4滴5g/L淀粉指示剂显蓝色），则该乙醚需处理后使用。去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏乙醚。4.影响萃取的萃取效率的因素？答：物质的性质、物料与溶剂的比例、时间、温度、浓度、萃取剂与被萃取物的溶解度差值等因素有关。5.为什么包装试样的滤纸的上部不能高于索氏提取器支管的顶部？6.索氏法测脂肪的注意事项？答：实样品应干燥后研细，装样品的滤纸筒一定要紧密，不能往外漏样品；实验过程中不能接触明火；样品含水量较低时可选用无水乙醚做为溶剂，样品含水量高是只能选择石油醚做溶剂；在干燥器中的冷却时间一般要一致。7.如果样品是湿润的应如何处理？为什么？答：选择石油醚做为溶剂。因为氧与水能形成氢键使穿透组织能力降低，使乙醚抽提能力下降；石油醚溶解脂肪的能力虽然比乙醚弱些，但吸收水分比乙醚少，使用时允许样品含有微量水分，没有胶溶现象。另外可选择罗斯哥特里法、酸分解法等测定脂肪含量的其他方法。