生殖系统分泌物检验.

生殖系统分泌物检验生殖系统分泌物检验第一节精液检查第二节前列腺液检查第三节阴道分泌物检查第二十章目的与要求：◇掌握精液检查、前列腺液检查和阴道分泌物的理化性质及常用的检查手段◇了解精液检查、前列腺液检查和阴道分泌物检查的临床应用◇熟悉精液、前列腺液和阴道分泌物的组成成分第一节精液检查精液（semen）精浆（seminlplasma）95%游动于精浆中的精子（sperm）5%精子—产生于睾丸曲细精管的生精细胞，在附睾内发育成熟。精浆—为附性腺和生殖道（附睾、精囊、前列腺、尿道球腺和旁腺等腺体）分泌液组成的混合物。精浆的功能—运送精子、营养精子、激发精子活力。第一节精液检查精液（semen）精子（sperm）精浆（seminlplasma）精液组成成分—果糖、维生素、前列腺素、5-核苷酸酶、精胺、无机盐，各种酶等，提供营养和能量。精液有形成分—除生殖细胞外，尚有少量白细胞、生殖道脱落的上皮细胞。第一节精液检查精液常规检查（一般性状检查及显微镜检查）精液的特殊检查评估男性生育能力为不育症诊断和疗效观察提供依据辅助诊断男性生殖系统疾病观察输精管结扎术后的效果为提外受精和精子库筛选优质精子男性计划生育科研、法医学鉴定精液检查的目的精液检查包括第一节精液检查一、精液标本采集手淫法采集方法：体外排精法标本采集时机标本采集的次数及间隔时间标本运送采集完整的精液标本注意事项第一节精液检查二、一般性状检查精液外观和气味精液量正常男性一次排出精液量约2～５ml。精液液化时间通常精液离体后5～10min开始液化，30min完全液化。精液粘稠度精液酸碱度（pH）正常精液为弱减性，pH值在7.2～7.8之间。直接波棒法黏度计法第一节精液检查三、显微镜检查(一)涂片检查涂片方法：精子缺乏症（spermacrasia)无精子症（azoospermia)将液化了的精液混匀取适量精液滴在载玻片上，加上盖玻片显微镜下观察（高倍镜40X）第一节精液检查三、显微镜检查(一)涂片检查精子活率可直接涂片观察100个精子中，有活动精子所占的百分率，即为精子活率。其计算分式为：精子活率（%）＝活动精子数/活动精子数不活动精子数(Х100)[参考值]精子活率≥75%【临床意义】精子活率检查主要用于男性不育症的检查。第一节精液检查三、显微镜检查(一)涂片检查精子活力(spermmotility)指具有前向运动能力的精子。按WHO分级标准，精子的活动情况分级：a活动良好，精子呈快速直线运动b活动较好，精子呈中速直线运动c活动不良，精子呈运动迟缓，原地转动d不活动，精子呈不运动状态或死精子第一节精液检查三、显微镜检查(一)涂片检查精子活力(spermmotility)[参考值]正常精液，于排出后1h，a和b级精子之和≥50%。【临床意义】精子活率检查主要用于男性不育症的检查，精子活率与活动里与受精的关系十分密切，精子活力＜40％，为男性不育症的原因之一。精子活力降低见于：⑴精索静脉曲张，静脉血回流不畅，睾丸组织缺氧等。⑵生殖系统非特异性感染等导致精子活力下降。第一节精液检查三、显微镜检查(二)精子密度（spermdensity)指单位体积内精子数，亦称精子浓度。精子总数指一次全部射出精液量中精子总数，即单位体积精子数Х精液量。[参考值]正常精液精子浓度(50～100)Ⅹ109/L，总数≥40Ⅹ106/次。【临床意义】正常人精子密度变异很大，一般认为精子密度＜20Ⅹ109/L时，生育力低下。精子数量降低可见于：⑴精索静脉曲张；⑵先天性或后天性睾丸疾病；⑶输精管或精囊缺如；⑷重金属损害；⑸某些药物；⑹50岁以上男性精子数逐年降低。第一节精液检查三、显微镜检查(三)精子形态检查正常精子形态将含有精子的精液经涂片、固定、染色后，用光学显微镜观察和分类，计数200个精子，计算出各种形态的精子及比率。实验室常用改良巴氏染色法。第一节精液检查三、显微镜检查(三)精子形态检查异常精子形态⑴头部异常大圆头；小尖头；其次梨形头、锥形头、双头、无顶体顶体部分或全部脱落或混合畸形等。⑵体部异常分支状，有2个体部；体部肿胀，粗大；无体部等。⑶尾部异常无尾；短尾、双尾、多尾；卷曲尾等。⑷联合缺陷体[参考值]正常形态精子为70%～90%。【临床意义】正常精液中异常精子＜30%，若大于即可判断不育原因之一。大量畸形精子出现，是睾丸异常的表现，还可见精索静脉曲张症.第一节精液检查三、显微镜检查(四)其他细胞未成熟生殖细胞指各阶段发育不完全的生精细胞：有精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞及发育不全的精细胞。[参考值]正常人成熟精细胞＞99%。【临床意义】在病理情况下，当曲细精管的生精功能受到损害时，精液中可出现较多的病理性幼稚细胞，这些细胞表现为形态、大小以及核的形态大小都不规则，应予以鉴别。第一节精液检查三、显微镜检查(四)其他细胞其他细胞成分正常精液中存在极少量的红细胞、白细胞和上皮细胞。[参考值]正常精子中红细胞、白细胞和上皮细胞＜５／HP。【临床意义】极少量的细胞成分来自于精囊和前列腺。红细胞增多见于血精症、睾丸炎、瘤、前列腺癌等。白细胞若＞５／HP个，即为异常，大量出现见于生殖道炎症，将会影响精子的质量和功能。精液中查到癌细胞，对生殖系统恶性肿瘤的诊断提供重要依据。第一节精液检查四、化学检查(一)酸性磷酸酶（ACP）精浆中酸性磷酸酶主要来源于前列腺，又称前列腺酸性磷酸酶(PAP)[参考值]速率法：80～1000U/ml；β-硝基酚法：＞200U/次射精【临床意义】检测精浆中酸性磷酸酶有助于了解前列腺功能和对前列腺疾病的诊断。前列腺炎时PAP活性减低；前列腺肥大和前列腺癌时，PAP活性增高。当PAP活性降低时，精子活力减弱，受精几率降低。第一节精液检查四、化学检查(二)乳酸脱氢酶-X（LDH-X）精浆中LDH-X活性最强，相当于LDH总活性的1/3。广泛存在，具有组织特异性，对精子的生成、代谢、获得能量和受精有重要作用。[参考值]LDH-X相对活性≥40%；绝对活度（1430±940）U/L。【临床意义】LDH-X活性与生殖功能有良好的正相关。对睾丸组织与精子细胞具有组织特异性，活性降低见于睾丸组织萎缩；少精或无精子症。因此，检测LDH-X活性对男性不育的诊断是一项有价值的指标。第一节精液检查四、化学检查(三)精子顶体酶（acrosin）精子形成早期有丰富的顶体酶原mRNA表达，当精子头部进入卵子透明带时，精子获能，顶体酶原活化，启动肽链相互作用，促进顶体反应发生。[参考值]速率法：(37±21)U/L【临床意义】顶体酶活性与精子活力、活率正相关，与精子畸形率，白细胞数等负相关。第一节精液检查四、化学检查(四)精浆柠檬酸（seminalplasmaacidcitric）精浆中的柠檬酸主要来自前列腺，通过与钙离子结合，调节精浆中的钙离子浓度，与射精后精液凝固及液化过程密切相关。[参考值]紫外比色法：50mol/次射精【临床意义】精浆中的柠檬酸含量除与射精后精液凝固及液化外，还与睾酮水平相关，测定柠檬素含量可评价前列腺功能和判断雄激素分泌状态。第一节精液检查四、化学检查(五)精浆果糖（seminalplasmafructose）精浆果糖由精囊腺分泌，含量极其丰富，是精子能量的主要源。果糖含量高低直接影响精子的活力。由于雄激素水平影响精囊果糖的分泌，因此，精浆果糖含量不仅能反映精囊的分泌功能，而且还间接反映睾丸内分泌功能。[参考值]间苯二酚法：9.11～17.67mmol/L,吲哚比色法：≥13mol/次射精【临床意义】精浆果糖含量为零，见于先天性输精管缺如或精囊缺如、两侧输精管阻塞和逆行射精；果糖含量降低，见于精囊炎和雄激素分泌不足。而单纯性输精管阻塞所致的无精症，果糖含量正常。第一节精液检查四、化学检查(六)精浆锌（seminalplasmazinc）多种元素参与维护人体生殖内分泌系统的功能，其中锌与男性生殖功能关系最密切，含量远比血浆中高。主要存在于睾丸、附睾和前列腺。[参考值]原子吸收光谱法：163.02±45.26g/ml，比色法：≥2.4mol/次射精。【临床意义】严重缺锌可导致不育症，精浆锌的测定可作为诊治男性不育症的重要参考指标之一。精浆中含量减少或缺乏见于：⑴抑制脑垂体促性腺激素的释放。⑵影响性腺发育及性腺的内分泌功能。⑶影响精子生成、成熟、激活和获能过程。第一节精液检查五、免疫学检查(一)抗精子抗体1.混合抗免疫球蛋白试验（MAR）用新鲜精液与包被IgG的胶乳粒或绵羊红细胞混合，再加入特异的单抗IgG抗血清。若胶乳粒和活动精子之间形成混合凝集则表示精子表面存在IgG抗精子抗体。[参考值]阴性【临床意义】≥50%的精子与颗粒黏附，可能为免疫不育。10～50％的精子与颗粒黏附，可疑为免疫性不育。第一节精液检查五、免疫学检查(一)抗精子抗体２.免疫球珠试验（immunobeasdassay）免疫珠是用兔抗人免疫球蛋白与聚丙烯酰胺通过共价结合的一种微球，可同时检测IgG、IgA、IgM类型的抗体。[参考值]免疫珠粘附率＜20%【临床意义】粘附率≥20%为阳性，此时，精子在宫颈粘液中的穿透和体内受精无明显受损；粘附率≥50%有诊断价值。第一节精液检查五、免疫学检查(一)抗精子抗体3.精子凝集试验（SAT）血清、生殖道分泌物中存在的AsAb与精子膜上抗原结合，精子可出现各样凝集现象，如头-头、头-尾、尾-尾凝集。【临床意义】阳性结果提示血清、生殖道分泌物中存在AsAb。4.精子制动试验（SIT）AsAb与精子膜上抗原作用激活补体系统，导致精子顶体破坏，膜受损，通透性增加，精子失去活力。【临床意义】SIT试验用于筛查精液中是否存在AsAb。第一节精液检查五、免疫学检查(二)精浆免疫抑制物质（SPIM）SPIM能抑制对精子的免疫反应，保护受精卵，维护正常的生殖生理过程。[参考值]SPIM抗补体试验430±62U/mlMIM单向免疫扩散试验3.0±0.3g/L【临床意义】低下见于不育症，习惯性流产，配偶对丈夫精液过敏等。(三)精浆免疫球蛋白测定[参考值]IgA90.3±57.7mg/L；IgG28.6±16.7mg/L；IgM2.3±1.9mg/L【临床意义】AsAb阳性者，IgM增高；生殖系统炎症时，SIgA增高。第一节精液检查六、微生物学检查在检查精液微生物检查时，重要的是要防止标本污染。常用的检查有：革兰或抗酸染色，或进行需氧菌或厌氧菌培养等。一些快速检测，聚合酶链反应（PCR）检测技术等。⑴细菌：淋病奈瑟菌、链球菌、金黄色葡萄球菌等⑵支原体：解尿支原体⑶病毒：(HSV)、(CMV)等⑷原虫【临床意义】男性生殖道任何部位感染都可以从精液中检测出病原微生物。生殖道感染引起的不育症发病率为非感染不育症的4倍。第一节精液检查七、精子功能检查(一)体内穿透试验（invivopenetrationtest)亦叫性交试验（PCT）[参考值]性交4～８h后，正常活动精子数＞25/HP性交4～８h后，正常活动精子数＞70/HP【临床意义】通过性交试验来判断精子在宫颈粘液中活动能力，了解不育症夫妇，精子-宫颈粘液的相互符合程度及其质量，如精子有凝集现象、代谢章碍、逆行射精等；如女性宫颈粘液异常，均会影响试验结果的正常。第一节精液检查七、精子功能检查(二)体外穿透试验（invitropenetrationtest)⑴精子-宫颈粘液玻片穿透试验[参考值]精子穿透粘液，且90%以上精子呈直线运动【临床意义】精子-宫颈粘液体外试验，可分别了解男性精子质量和女性宫颈粘液质量。取液化精液取排卵期宫颈粘液第一节精液检查七、精子功能检查(二)体外穿透试验（invitropenetrationtest)⑵精子-宫颈粘液接触试验(SCMC)[参考值]精子摆动出现率0～25%为阴性【临床意义】试验＞25%以上，提示精液或宫颈粘液中有抗精子抗体存在。混匀-滴入取排卵期宫颈粘液取液化精液观察并计数非正常运动精子的出现率，求出摆动精子的出现率（%）第一节精液检查七、精子功能检查