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遗传学实验报告1实验三：果蝇巨染色体的制片和观察戚钰10131900107第九组42号2015.10.13一、实验目的1、练习果蝇幼虫的解剖技术及果蝇唾腺染色体的制片方法。2、观察果蝇的唾腺染色体，进一步了解基因在染色体上的排列方式。二、实验原理蝇唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫幼虫唾液腺内的巨大染色体，由于让染色体DNA经过多次复制，但并发送细胞核分裂，重复复制后染色线聚集在一起，因此比一般的染色体大的多。同时，唾腺细胞中的同源染色体总是处于配对状态，因此在果蝇唾腺细胞只能看到体细胞染色体数目的一半。由于每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，因而出现一系列宽窄不同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。利用这些特征不仅可以鉴定不同的染色体，用于细胞学观察和研究。三、实验步骤1、取材选取黑腹果蝇的三龄幼虫（约5mm），左手持解剖针压住虫体的1/2处，右手用解剖针钉住幼虫头部，轻轻向前拉动，把头部拉开，拉出唾液腺，并剔除唾腺周围的脂肪及其他物质。2、固定染色吸去生理盐水后加一滴HCl，水解5分钟，使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色体散开。吸去盐酸，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干，加2滴醋酸洋红，染色15分钟，保持唾液腺浸没于染液中。3、制片盖上盖玻片，用吸水纸吸干多余染液，并用手指轻压盖玻片，再用解剖针柄垂直轻敲，或进一步用拇指在盖玻片上适当用力压片，注意敲的过程中勿使盖玻片移动。遗传学实验报告24、观察将制片置低倍镜下找到分散好的标本，移至视野中心，然后转到高倍镜下观察。对染色体分散、个体性清楚的片子，应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，以便对照模式照片辨认出不同的染色体臂。四、实验结果我组所制作的果蝇巨染色体装片在显微镜下的放大图如图1所示。可以看到染色体已经散开，呈现出五臂的形态，放大后可以看到每条臂上都有深浅不一、宽窄不同的条纹。图1.10*40倍镜下果蝇三龄幼虫巨染色体形态图五、分析与讨论：1、我们组一共拉了10只左右的幼虫，成功拉出的共有4组，其中2组染色及压片比较成功，都在10*40倍镜下呈现分散状态，但是遗憾的是由于手机拍照并不能拍的很清楚而且显微镜也不能调到太清楚，所以照片有一些模糊，希望以后能够用电镜拍摄，应该会比较清晰，也会看到巨大染色体遗传学实验报告3更多细节。2、本次实验成功的关键是如何使染色体很好地分散开，我们组是先用解剖针柄垂直敲击盖玻片，再用大拇指用力按压，我们发现，没有分散成功的多半因为按压力不够，用力按压的效果比较好，我们没有出现分散过度的现象，所以放心用力按压，这样才能将染色体展开。3、一定要注意在用盐酸、醋酸洋红浸没唾腺组织的时候要注意不能让液体蒸发干掉，我们其中一组就是在用盐酸浸没时没注意干掉了。当然染液也不宜过多，不然压片时染液溢出，唾腺容易随染液漂走，所以染液加多时，压片前应小心用滤纸吸走部分染液。4、在用滤纸吸走溶液的时候也必须要小心。虽然很小心，小组成员还是有两次将唾腺组织吸到了纸上，如果发生这种情况，可以用大滴的生理盐水或者蒸馏水将其冲下来，边冲边将滤纸头在液滴中晃动，很容易成功。