动物细胞工程

动物细胞工程•动物细胞培养•核移植•动物细胞融合•单克隆抗体的制备基础植物细胞工程包括哪几种技术？动物细胞工程又包括有哪几种技术？•思考一、动物细胞培养（阅读课本第44-46页）请用简图描述动物细胞培养的过程？培养条件如何，与植物组织培养相同吗？为什么取幼龄动物器官组织或动物胚胎进行培养？为什么要使细胞分散成单个细胞呢？原代培养和传代培养如何划分？和植物组织培养的原理相同吗？细胞增殖什么叫动物细胞培养？见课本44页1.动物细胞培养过程•胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬浮液传至10代~50代无限传代剪碎胰蛋白酶原代培养胃蛋白酶适宜PH为强酸性，时间久会把细胞消化了分散成单个细胞避免接触抑制同时使其与培养液成分混合无法发挥细胞的全能性传代培养分裂能力强细胞贴壁生长、接触抑制胰蛋白酶分装少量细胞获得不死特性(核型变化)合成培养基2.培养条件：1.无菌、无毒的环境培养液及培养器具均要灭菌培养液中添加抗生素及时更换培养液清除代谢产物。2.营养动物血清3.适宜的温度和PH：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等4.气体环境:95%空气+5%CO236.5±0.57.2-7.4原代培养与传代培养的区别？分装原代培养传代培养动物细胞培养总结图解细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。动物细胞培养与植物组织培养的比较项目动物细胞培养植物组织培养相同点都需无菌条件;都进行有丝分裂不同点原理细胞的增殖细胞的全能性培养基液体培养基,动物血清及其他营养物质（葡萄糖）固体培养基,激素及其他营养物质（蔗糖）目的获得细胞或细胞产物等快速繁殖、培育无病毒植株等卵母细胞体外培养至MII中期高产奶牛（供体）体细胞培养细胞质细胞核早期胚胎卵裂代孕母牛子宫胚胎移植与供体遗传物质基本相同的犊牛分娩妊娠电刺激,激活受体细胞去核与第一极体细胞核移植二、动物体细胞核移植技术和克隆动物问题：1.原理2.过程3.遗传物质来源4.存在的问题动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物克隆组织培养试管动物(婴儿)生殖方式无性无性有性遗传物质来源2个亲本1个亲本2个亲本性别决定提供核亲本一般没有精子类型用途优良种畜快速繁育,可选择性别快速繁殖无病毒植株解决不孕不育对克隆与组织培养、试管动物(婴儿)区分不清易错点分析花药离体培养属于什么生殖方式？例：下列有关体细胞核移植技术的说法，不正确的是（）A.体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功，成功率非常高B.克隆技术的各个环节有待于进一步改进C.大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题D.克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议A对应训练3.动物细胞工程单克隆抗体制备基本过程（P53）植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备的比较PEG、灭活的病毒、电激抗原抗体杂交筛选能迅速繁殖、产生单一抗体特点：特异性强、灵敏度高、可大量制备应用：体外诊断（可同位素标记）生物导弹（运载药物、毒素、同位素）例：利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（）A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者D对应训练1．如图是动物细胞培养的基本过程示意图，请据图回答。(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取___________。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是______________，然后用__________酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是__________________。(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有________________等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这时培养到第__________代，到这时的培养称为______________。(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用__________处理，然后配制成__________，再分装。(5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，原因是______________________________。答案1.(1)动物胚胎或幼龄动物的器官、组织(2)剪碎组织胰蛋白使细胞与培养液充分接触(3)葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清10原代培养(4)胰蛋白酶细胞悬浮液(5)细胞没有发生癌变6．2008年2月26日，广西水牛研究所科研人员利用克隆胚胎冷冻技术，使一头杂交母水牛顺利产下一头冷冻胚胎移植的体细胞克隆雌性水牛犊，取名“盼盼”。(1)当克隆牛“盼盼”性成熟后进行减数分裂时，其初级卵母细胞内可以形成________个四分体。(2)①、④过程主要采取________________技术才能获得细胞群或囊胚，此时在培养液中常加入的物质有葡萄糖、氨基酸、维生素、________和________等。(3)③过程中，诱导形成重组细胞常见的方法，除电激融合外，常见的还有________。(4)科研人员获得的耳纤维细胞取自于1日龄的河流型摩拉水牛，原因是此时获取的细胞________、________。(1)25(2)动物细胞培养无机盐动物血清(3)用灭活病毒(或聚乙二醇)处理(4)分化程度低分裂能力强