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第九章病毒概述一、病毒的概念：病毒（Viruses）是一类结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA）、对抗生素不敏感、营严格寄生生活、非细胞形态的最微小生物。病毒特点•个体微小•结构简单•专性寄生•抵抗力特殊第一节病毒的形态与结构一、病毒的大小与形态砖形（痘病毒）弹状（狂犬病病毒）水泡性口炎病毒）球形（绝大多数病毒）二、包含体病毒在宿主细胞内增殖后，于细胞中形成的一种用光学显微镜即可看到的特殊“斑块”三、病毒的结构与功能1、核酸（芯髓）：为单股或双股RNA（或DNA），导入活细胞后可形成新的完整病毒，并致细胞病变。2、衣壳：包围芯髓的蛋白质称衣壳，为二十面体或螺旋对称。具有抗原性、保护作用、吸附作用。核酸和衣壳统称为核衣壳。3、襄膜：由脂质、蛋白质和糖类组成，故对乙醚敏感。有的病毒在襄膜外还有剌突。4、触须：某些无襄膜的病毒所具有。第二节病毒的增殖•病毒缺乏生物细胞所具有细胞器、新陈代谢必须的酶系统和能量。其增殖，只能靠宿主细胞提供原料、能量、生物合成场所（细胞器），在病毒核酸指控下，合成病毒的核酸与蛋白质等成分，然后在宿主细胞内装配为成熟的具有感染性的病毒体，再以特定的方式释放到细胞外，感染其它易感细胞，病毒的这种增殖方式称为复制。所需时间称为复制周期。病毒复制的过程•一、吸附•首先是病毒与宿主细胞之间通过静电引力发生的非特异性吸附。其次是病毒与宿主细胞之间有选择性和有特殊亲和力的特异性吸附。它是病毒感染具有明显选择性的理论基础。二、穿入①通过胞饮作用进入细胞，如牛痘病毒②通过病毒与细胞膜融合后进入细胞，如疱疹病毒③病毒与细胞膜上受体作用进入细胞，如脊髓灰质炎病毒④病毒直接完整进入细胞内，如呼肠孤病毒三、脱壳•病毒脱壳包括脱去襄膜和衣壳两个过程①脱襄膜，有的在与细胞膜融合时发生并向胞浆内释放核衣壳如疱疹病毒；有的在吞饮泡内发生如痘病毒。②脱衣壳，发生在吞饮泡内或细胞浆内。•四、生物合成•包括核酸和蛋白质合成。一般为：•DNA病毒（除痘病毒和虹病毒外）在细胞核中复制。•RNA病毒（含痘病毒和虹病毒）在细胞质中复制。•病毒脱壳后释放核酸，这时在细胞内查不到具有感染性的完整病毒子，此期称隐蔽期或黑暗期。•五、装配及释放①无襄膜的DNA病毒如腺病毒，核酸与衣壳在细胞核内装配，细胞溶解后一次释放。②无襄膜的RNA病毒如脊髓灰质炎病毒，核酸与衣壳在细胞浆内装配，细胞溶解后一次释放。③有襄膜的DNA病毒如单纯疱疹病毒，在核内装配为核衣壳。释放方式有三种：一是移至核膜以芽生方式进入胞浆，获得核膜成分作为襄膜。并由此渐渐释放到细胞外；二是通过核膜裂隙进入胞浆，从胞浆膜上获得襄膜，沿核周围与内质网相通的部位从细内逐渐释放。三是复合病毒如牛痘病毒的DNA与蛋白质均在胞浆中合成，形成“未成熟颗粒”经再分化成为成熟颗粒，其中一部分通过细胞表面释放，大部分则通过细胞与细胞之间接触而扩散释。④有襄膜的RNA病毒如副流感病毒，核酸与蛋白质在胞浆中装配螺旋状核衣壳，并在感染过程中使病毒特异性Ag成分（如血凝素、神经氨酸）整合于细胞膜上。当病毒以芽生方式通过细胞膜时，获得襄膜，并产生剌突。第三节干扰现象与干扰素一、干扰现象一种病毒（活病毒或灭活病毒）作用于宿主细胞后，可导致另一种在免疫学上有关或无关的病毒株不能在其中正常增殖的现象，称病毒的干扰现象。二、干扰素•概念：干扰素（IFN）是病毒或其它因素如干扰素诱生剂，剌激脊椎动物组织细胞（体外或体内）产生的一种能干扰病毒增殖的特殊蛋白质。•产生机理：⑴病毒与细胞DNA中干扰素基因的“抑制物”结合，从而消除抑制作用，导致产生特异性mRNA合成干扰素。⑵干扰素被释放以后进入另一个细胞，与细胞“作用因子约束物”结合导致产生干扰素。•作用机制：干扰素的作用机制不象抗病毒那样直接灭活病毒。干扰素对病毒体身没有作用，既不能直接阻止其吸附或穿入，也不能阻断释放，而是作用于宿主细胞，使其产生抗病毒蛋白质，这种蛋白质附着于细胞的核蛋白体上，选择性地抑制病毒mRNA译制为病毒蛋白质，从而影响病毒结构蛋白和酶类的合成，使复制受到阻抑而呈现抗病毒的作用。即最初感染的细胞由于病毒核酸的剌激被诱导产生干扰素，它透过细胞膜向外扩散并进入血液循环进入其它细胞。•干扰素具有广谱抗病毒作用，又具有细胞种属特征。即某一种动物产生的干扰素只能保护同种属或近缘种属动物细胞。•干扰素是一种活性很强的生物制剂，但对没有Ag性（或Ag很弱），故治疗病毒性疾病。亦具有抗肿瘤和调节免疫机能的作用。第四节病毒的抵抗力与分类一、病毒对理化因素的抵抗力病毒对理化因素的抵抗力与细菌繁殖体相似用理化因素使病毒丧失感染性的过程称灭活灭活后的病毒仍然保留其它生物学活性1、温度：病毒耐寒不耐热。大多数病毒可在4℃以下良好生存，尤其在干冰温度（－70℃）和液氮（－196℃）下更能长期保持其感染性。而大多数病毒于55-60℃10－30min灭活，100℃迅速灭活。有的在室温下只能存活数小时（流感、麻疹病毒），有的在自然界中可存活数日或数月（肠道病毒群、肝炎病毒）。但猪瘟Vi可耐受50℃2h，70℃1h，100℃0.5－1h。2、PH：•大多数病毒在PH6－8的范围内保持稳定。在PH5.09.0的环境中迅速灭活。•病毒种类不同对PH的稳定性亦不同。例如呼肠孤病毒能抗PH3.0；口蹄疫病毒在PH6.0－6.5及8.0－9.0迅速灭活，猪水泡病毒在PH2.2，24h仍具有感染性。3、氧化剂：•多数病毒对氧化剂敏感，常用H2O2、K2MO4、漂白粉、碘化物等灭活病毒。酚可用于几种病毒的消毒，但不宜于脊髓灰质炎病毒。4、甘油和抗生素：常用50%甘油生理盐水并加“双抗”保存病毒病料。二、病毒的分类1、按病毒的性质综合来分类：•双股或单股、有无包膜、立体或螺旋体对称、子粒多少、颗粒大小、对乙醚敏感性等方面对病毒分类。2、依传染途径不同分类：•呼吸道病毒、肠病毒、虫媒病毒等。3、根据寄生宿主不同分类：•细菌病毒、植物病毒、动物病毒。第五节病毒的分离培养一、病料的采集与送检尽早采取病料部位适宜冷藏速送二、病毒的分离三、分离病毒的鉴定•细胞致病作用(CPE)•红细胞吸附现象•干扰现象