RNA-电泳如何得出漂亮的条带

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RNA电泳如何得出漂亮的条带福建医科大学张小林背景:RNA电泳是分子生物实验中一个常用的实验方法,但RNase无处不在,所以常见的RNA电泳条带比较弥散,甚至检测不到,下面RNA电泳中的一些改进方法有助于你得到清晰可见的RNA条带。方法改进:1.电泳槽、制胶器、梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——自来水冲洗干净——ddH20冲洗——3%H2O2灌满浸泡过夜——灭活的0.1%DEPC水冲洗干净——超净台内紫外线照射过夜。2.烧瓶、烧杯、药匙、量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干。或者ddH20清洗干净,超净台内紫外线照射过夜。3.电泳缓冲液必须是RNasefree(昀好买试剂公司的)。4.预电泳5-10min减少了非特异RNA条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电泳仪装置是否有误。5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样时RNA的扩散、加样后RNA从齿槽逸出造成RNA的弥散及定位不良等现象。6.电泳3-5min让RNA进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的RNA量及定位的准确性,从而有利于DNA的鉴定和纯化。结果:页,共20页下一页返回

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