中国药科大学药物分析课件03第三章-药物的杂质检查

中国药科大学药分教研室第三章药物的杂质检查Testforpurity中国药科大学药分教研室中国药科大学药分教研室第三章药物的杂质检查Testforpurity概述一般杂质检查特殊杂质检查中国药科大学药分教研室有效性针对某些药效进行检查的项目如Al(OH)3的制酸力，反映主要质量；明胶的凝冻度，控制物理性能；利福平的结晶度，影响生物利用度均一性含量均一性如“含量均匀度”试验一、概述中国药科大学药分教研室安全性进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目纯度要求对杂质限量进行检查一、概述中国药科大学药分教研室OCH3HClNCH3OONCH3OCH3HClOCH3HClONC2H5例：纯度要求PethidineHydrochloride盐酸哌替啶无效异构体I无效异构体II中国药科大学药分教研室二、杂质来源与种类sourceandsortsofimpurities(C6H10O5)x+H2OH+(C6H10O5)yC12H22O112C6H12O6H2O,H+淀粉糊精麦芽糖葡萄糖1.制备过程中产生酸度：水解试剂带入乙醇中不溶物：水解中间体(糊精)SO32-：产品用H2SO3漂白可溶性淀粉：水解不完全中国药科大学药分教研室2.贮藏过程中产生外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、微生物等引起药物产生例如：麻醉乙醚醛及有毒的过氧化物O中国药科大学药分教研室(1)一般杂质：在多种药物中普遍存在的杂质。(Cl-SO42-PbAsFe)有害杂质(PbAs)信号杂质（Cl-SO42-）：考察生产工艺，反映药物的纯度水平(2)特殊杂质：个别药物的生产及贮藏中引入的杂质。杂质的种类中国药科大学药分教研室杂质的限量：药物中所含杂质的最大允许量。限量表示(g/g)：百分之几（%）百万分之几（10-6）限量检查：检查所含杂质是否超过杂质限量的规定，通常不要求测定其准确含量。3、杂质的限量检查（limittest）中国药科大学药分教研室杂质限量检查方法取一定量(C·V)与被检杂质相同的纯品或对照品配成对照品溶液，与一定量(S)药物供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定。中国药科大学药分教研室NaCl对照液葡萄糖稀硝酸10ml硝酸银1ml稀硝酸10ml硝酸银1ml对照液浊度供试液浊度中国药科大学药分教研室杂质限量的计算：式中：L杂质的限度（%）C对照液浓度（g/ml）V对照液的加入体积（ml)S供试品的量(g)注意:单位统一=杂质最大允许量杂质限量供试品量杂质对照液浓度其体积供试品量100%CVLS中国药科大学药分教研室例1：对乙酰氨基酚中氯化物的检查：样2.0g溶于100ml水中，取25ml检查Cl-，与标准NaCl溶液(10μg/ml)5ml对照液相比，不得更深。C=10μg/mlV=5.0mlS=252.0100=0.5g6105.010100%0.01%0.5L中国药科大学药分教研室第二节一般杂质检查方法条件：硝酸酸性条件（稀硝酸10ml）反应试剂：硝酸银试液1.0ml杂质对照：NaCl(10µg/ml)灵敏度范围：50~80g/50ml讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3一、氯化物（Chloride）检查原理：白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3Vc中国药科大学药分教研室1.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。2.平行操作原则。3.若供试品有色，需经处理后方可检查。注意：中国药科大学药分教研室）干扰及排除（1）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。（2）内消色法：倍量法供试品有色处理方法中国药科大学药分教研室二、重金属（HeavyMetals）的检查1、第一法硫代乙酰胺法适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物原理：Pb2++醋酸盐缓冲液+硫代乙酰胺(CH3CSNH2)PbS(黄~棕黑)条件：介质：醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml试剂：硫代乙酰胺(CH3CSNH2)2ml杂质对照液：PbNO3(10µg/ml)灵敏度范围：10~20g/27ml中国药科大学药分教研室葡萄糖中重金属的检查：样4.0g溶于23ml水，加入2ml缓冲盐，依法检查，其重金属不得超过百万分之五，取标准铅（10μg/ml），v=?C=10μg/mlL=510-6S=4.0g6610105104.0VV=2.0ml例2：中国药科大学药分教研室注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。1.外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。2.内消色法。3.改用第四法，微孔滤膜过滤法。中国药科大学药分教研室第二法：含芳环或杂环的有机药物如苯佐卡因、甲硝唑第三法:溶于碱的药物或在稀酸产生沉淀的药物如磺胺类、巴比妥类第四法：铅斑法中国药科大学药分教研室C垫圈(外径10mm,内径6mm)D滤膜(直径10mm,孔径3.0µm)E辅助滤板CDABFE滤器下部滤器上盖连接头微孔滤膜过滤法检查重金属装置中国药科大学药分教研室三、砷盐(arsenic)第一法古蔡氏法Gutzeit第二法Ag-DDC法白田道夫法Bettendorff国内外常用方法：中国药科大学药分教研室古蔡氏法：SbH3+HgBr2→SbH2(HgBr)+HBr锑斑--3432333AsOAsHHOAsAs砷斑2HgBr棕黄Ag吡啶DDCAg-红色胶态Zn+HCl中国药科大学药分教研室白田道夫法AsAs2SnCl3HCl中国药科大学药分教研室检查砷盐仪器装置8cm18cm有孔玻璃旋塞导气管AsH3发生瓶中国药科大学药分教研室二乙基二硫代氨基甲酸银法Ag-diethyldithiocarbamateAg-DDC法C2H5C2H5NCSSAg中国药科大学药分教研室四、干燥失重（lossondrying）恒温干燥干燥剂干燥减压干燥热分析法thermalanalysis,TA干燥失重物主要指水分(结晶水或吸附水)或挥发性物质中国药科大学药分教研室在程序控制温度下,测量物质的质量与温度关系的方法热重分析法thermalgravimetricanalysis,TGA:差示热分析法在程序控制温度下,测定供试品与参比物质之间的温差(ΔT)随温度变化的函数关系differentialthermalanalysis,DTA:中国药科大学药分教研室草酸钙(CaC2O4·H2O)的热重曲线ΔG1ΔG2ΔG310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T(℃)在温度T1时CaC2O4·H2OCaC2O4+H2O在温度T2时CaC2O4CaCO3+CO在温度T3时CaCO3CaO+CO2中国药科大学药分教研室···样品参比加热炉至信号放大器加热器导线炉温控制器⑴热差曲线的直线⑶吸热峰⑵放热峰⑶⑴⑵T(℃)△T热差曲线示意图差示热分析仪主要结构简图中国药科大学药分教研室盐酸多巴酚丁胺的DTA-TGA曲线10090807060196℃233℃中国药科大学药分教研室15℃/minProgram1、纯双氯青霉素转变成液态并降解2、加入乳糖3、加入硬脂酸镁4、加入硬脂酸，主成分峰消失5、单加入硬脂酸，主峰亦消失℃0100200△T12345DTA扫描图中国药科大学药分教研室甲磺酸二氢麦角毒碱的DSC-TGA曲线℃50100150200DSCTGA中国药科大学药分教研室t(min)△T不纯物质的DSC图中国药科大学药分教研室不同纯度苯甲酸的DSC曲线温度97.2%98.6%标准品中国药科大学药分教研室温度(℃)508011014017020023026029015.000.007.50盐酸舍曲林晶型Ⅰ的DSC曲线mcal/sec中国药科大学药分教研室温度(℃)50801101401702002302602905.000.002.50mcal/sec盐酸舍曲林晶型Ⅲ的DSC曲线中国药科大学药分教研室有机溶剂残留量测定法有机溶剂限度,%限度,%苯0.010.0002氯仿0.0050.006二氧六环0.010.038二氯甲烷0.010.06吡啶0.010.02甲苯0.010.089环氧乙烷0.0010.001Ch.P(95)Ch.P(2000)中国药科大学药分教研室六、有机溶剂残留量测定色谱系统与系统适用性试验SystemSuitabilityTests;SSTs以直径为0.25~0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相，柱温为80~170℃；并符合下列条件：⑴用待测物的色谱峰计算的N应大于1000；⑵内标物与待测物的两个色谱峰的R≥1.5；⑶每个标准溶液进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的RSD≤5%；若以外标法测定，所得待测物峰面积的RSD≤10%中国药科大学药分教研室嗅味及挥发性的差异颜色的差异溶解行为的差异旋光性质的差异吸附或分配性质的差异对光选择吸收性质的差异第三节特殊杂质检查物理性质上差异：中国药科大学药分教研室酸、碱性质的差异氧化还原性的差异杂质与一定试剂产生沉淀杂质与一定试剂产生颜色反应杂质与一定试剂反应产生气体化学性质上差异：中国药科大学药分教研室旋光性质的差异Ch.P规定黄体酮在乙醇中的比旋度为：＋186°～198°黄体酮及其中间体的比旋度（溶剂：乙醇）化合物浓度%温度℃[а]D黄体酮1～1.420～25+193°±4°醋酸双烯醇酮0.920-31°±2°醋酸妊娠烯醇酮～1常温+20°±2°中国药科大学药分教研室220260300nm肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线HOHOOCCH2NHCH3HOHOOHCHCH2NHCH3λmax310nm中国药科大学药分教研室中国药科大学药分教研室吸附或分配性质的差异薄层色谱法TLC一般要求：颗粒直径10~40µm薄层涂布：无粘合剂含粘合剂：常加入10~15%煅石膏(CaSO4·2H2O,180℃烘4h)或0.5~0.7%羧甲基纤维素钠水溶液原点至溶剂前沿的距离原点至斑点中心的距离fR比移值中国药科大学药分教研室常用方法：杂质对照品法供试品自身对照法对照药物法中国药科大学药分教研室供试品10µlN-甲基哌嗪10µl50mg/ml50µg/ml枸橼酸乙胺嗪I2蒸气显色NNCH3CONC2H5C2H5中国药科大学药分教研室规定：如显杂质斑点，不得多于2个，其颜色与对照品主斑点相比较，不得更深。地塞米松磷酸钠地塞米松20mg/ml0.20mg/ml中国药科大学药分教研室如有1~2个杂质点超过时，应不得深于0.01%对照液的主斑点。其中有1个杂质点应不深于0.002%供试品的主斑点。氨苯砜中检查“有关物质”规定：0.01%供试品100µg/ml1%供试品10mg/ml0.002%供试品20µg/ml中国药科大学药分教研室分类柱填充剂流动相正相色谱硅胶极性小的有机溶剂极性化学键合硅胶正己烷,氯仿,二氧六环等反相色谱十八烷基硅烷键合硅胶甲醇/水乙腈/水四氢呋喃/水离子对色谱ODSRP流动相中加离子对试剂离子交换色谱离子交换填料电解质水溶液排阻色谱凝胶渗透有机凝胶有机溶剂凝胶过滤玻璃微孔球水溶液高效液相色谱法HPLC中国药科大学药分教研室主要方法：峰面积归一化法不加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法：用于有杂质对照品时，杂质的含量测定。内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量：用于有杂质对照品时，杂质的含量测定。外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量：用于有杂质对照品或杂质对照品易制备的情况。中国药科大学药分教研室Ⅰ供试品Ⅱ供试品+内标内标峰内标峰杂质杂质