2014-11-糖原的分解和生物合成-1资料

第26章糖原的分解和生物合成GlycogenBreakdown&BiosynthesisofGlycogen1、糖原的生物学意义2、糖原的降解3、糖原的生物合成4、糖原代谢的调控1.糖原的生物学意义糖原－动物体内肝脏和肌肉中葡萄糖贮存方式.肝糖原的作用主要是迅速补充血糖；肌糖原主要是供给肌肉收缩时能量。淀粉－植物体内葡萄糖贮存方式.为何不是葡萄糖，而是以糖原形式贮存？为何是糖原，而不是脂类？（1）产生高渗性,导致尿量显著增多，可致机体脱水，甚至发生高渗性非酮症糖尿病性昏迷，危及生命。（2）随着大量液体排出，体内电解质也随之排出，引起水、电解质紊乱，极易并发各种急性病症。（3）血糖增高，不断刺激胰岛β-细胞分泌胰岛素，而且长期的刺激可使β-细胞功能衰竭，而加重糖尿病病情。（4）长期高血糖使脏器/组织病变,常见如:毛细血管管壁增厚，管腔变细，红细胞不易通过，组织细胞缺氧；肾小球硬化,肾乳头坏死；神经细胞变性，神经纤维发生节段性脱髓鞘病变；心、脑、下肢等多处动脉硬化等。1.1高血糖对人体的主要危害1.2糖原比脂类更适为中转性贮存物质高效能:G是机体主要能源物质；糖原分解直接产生G-1-P无需进行生物转化即可分解代谢被迅速动用:多分支,迅速分解释放G能灵敏地维持血糖水平（动物不能将脂肪酸转变为葡萄糖前体）1.3糖原的结构特点树枝状的多聚葡萄糖分子量100～1000万含有多个非还原性末端（合成与分解均由此端开始延伸或降解）直链内葡萄糖单位以α1，4-糖苷键（占总糖苷键93%）连接；支链之间以α1，6-糖苷键（7％）连接成分支。肝糖原普通显微观察肝糖原颗粒电子显微照片糖原结构示意糖原由聚糖链和生糖原蛋白两种成分组成.生糖原蛋白(糖原引物蛋白)聚糖链糖链非还原端还原端-具有C1游离半缩醛羟基非还原端-具有游离C6羟基16:支链点糖基连接14:直链中糖基连接糖原中的化学键二级结构：-螺旋2糖原的降解①糖原磷酸化酶(辅酶PLP)直链糖基降解②糖原脱支酶（糖基转移酶）去分支糖基③磷酸葡萄糖变位酶G-1-P→G-6-P④葡萄糖-6-磷酸酶G-6-P→G2.1参与糖原降解的酶类酶名称酶催化反应骨骼肌细胞缺乏此酶（G与G-P细胞通透性不同!）糖原磷酸化酶（磷酸吡多醛）糖原降解概览糖原核心糖原核心糖原核心糖原核心糖原脱支酶(寡糖基转移)糖原脱支酶(糖苷键水解)磷酸解水解..糖原磷酸化酶（磷酸吡多醛）磷酸基团进攻非还原端的1,4糖苷键的富电子O,导致糖苷键断裂,释放一个1-磷酸-葡萄糖(G-1-P)和减少一个糖基的糖原.2.2糖原的磷酸解反应O糖原(G)n+PiG-1-P+糖原(G)n-1磷酸解与水解的区别、磷酸解的优越性？P178磷酸解是正磷酸作为一个基团加到游离出来的葡萄糖分子半缩醛羟基(C1)上磷酸解在体外是可逆反应,但是在细胞内,因[Pi]/[G-1-P]比值远大于100,所以,反应趋向于发生磷酸解.磷酸解产物已经磷酸化,不用再消耗ATP产生磷酸葡萄糖,为糖酵解提供方便.2.2.1化学反应式PLP通过氢键结合转运无机磷酸基团HPO42-(红色示),该磷酸基团贡献其H+给-1,4糖苷键上的富电子O,导致电子云转移,糖苷键破裂,产生葡萄糖正碳离子过渡态,然后接受磷酸基团的转移形成磷酸酯键,生成G-1-P产物.2.2.2糖原磷酸解的反应机制正碳离子中间体酶酶酶磷酸吡哆醛(VitB6,PLP,红色部分示)与糖原磷酸酶中的Lys残基,通过希夫碱形式连接.磷酸吡哆醛的化学结构及其与酶的希夫碱连接起传递游离Pi基团的作用.故PLP是Pi的载体酶上一页中蓝色示意的P基团2.2.3糖原磷酸化酶的分子结构糖原磷酸化酶:调节糖原分解的关键酶（共价修饰+别构调节）同二聚体:含两个相同的亚基两个结构域a和b两种形式N-端结构域C-端结构域界面亚结构域Ser14P位点别构调节位点二聚体接触部位糖原结合亚结构域a:Ser14-P化,高活性b:Ser14-去P,低活性PLP结合部位;磷酸解催化中心(疏水)磷酸化酶:各个亚基(黄,白)680Lys结合PLP辅基,再与568Lys共同作用,结合Pi,发挥Pi载体作用.催化中心糖原结合中心糖原结合中心P位点别构中心C-端结构域N-端结构域肾上腺素＋受体腺苷环化酶腺苷环化酶ATPcAMP蛋白激酶A蛋白激酶A糖原磷酸化酶激酶糖原磷酸化酶b糖原磷酸化酶激酶糖原磷酸化酶a2.2.4糖原磷酸化酶的调节糖原分解激素（胰高血糖素，肾上腺素）作用于细胞膜受体后，促进cAMP产生，引起信号传导通路酶的逐级磷酸化，最终使糖原磷酸化酶发生磷酸化，催化糖原磷酸解发生。高活性无活性PP1：磷蛋白磷酸酶1PPPPPP1激素的级联放大作用：信号分子（激素）结合于特异性膜受体后，通过激酶级联事件，即：一系列蛋白质（酶）的逐级磷酸化，籍此使信号逐级传送和放大。肾上腺素级联系统对糖原分解的调节：信号分子（激素）G蛋白偶联受体－G蛋白－腺苷环化酶－蛋白激酶A－糖原磷酸化酶激酶－糖原磷酸化酶糖原降解关键酶酶的共价修饰调节共价修饰调节：生物体的一些酶（尤其是一些限速酶），在细胞内其它酶的作用下，其结构中某些特殊基团发生可逆的共价键生成或断裂（例如磷酸化或去磷酸化作用），从而引起酶活性的激活或抑制，快速改变该酶活性，调节某一代谢途径路，称为共价修饰调节。最常见的共价修饰是磷酸化修饰。通过蛋白激酶(PK）的催化，被修饰酶分子中丝氨酸或酪氨酸侧链上的羟基进行磷酸化，也可通过各种磷酸酶（如：磷蛋白磷酸酶PP1）将此类磷酸基团去除，从而形成可逆的共价修饰。磷酸化修饰是体内重要的快速调节酶活性的方式之一。不同的酶催化下级酶的磷酸化与去磷酸化的反应PP1酶P酶PKA修饰前后的酶活性不同酶的别构调节:激活或抑制酶的别构调节:酶分子中存在活性中心（催化亚基）和别构中心（调节亚基）,当调节物分子结合于别构中心时,引起酶的构象发生改变,从而导致酶的活性相应改变.这种酶活调节方式称为酶的别构调节.与别构中心特异性结合引起酶构象改变和酶活性改变的调节物质称为别构效应物；具有别构调节机制的酶成为别构酶.别构调节与共价修饰调节均属于酶的快速调节。酶的别构抑制:酶分子与其底物有较高亲和性,与效应物结合后,引起酶构象发生改变,失去与底物的亲和力,导致酶活性降低或丧失.酶的别构激活:酶分子与底物亲和力低,与效应物结合后,引起酶构象发生改变,导致酶对底物的亲和力大大提高,增加酶催化活性.别构激活别构抑制别构抑制剂别构激活剂肾上腺素＋受体腺苷环化酶腺苷环化酶ATPcAMP蛋白激酶A蛋白激酶A糖原磷酸化酶激酶糖原磷酸化酶b糖原磷酸化酶激酶糖原磷酸化酶a2.2.4糖原磷酸化酶的调节糖原分解激素（胰高血糖素，肾上腺素）作用于细胞膜受体后，促进cAMP产生，引起信号传导通路酶的逐级磷酸化，最终使糖原磷酸化酶发生磷酸化，催化糖原磷酸解发生。高活性无活性PP1：磷蛋白磷酸酶1PPPPPP1激素激活的蛋白激酶A使糖原磷酸化酶激酶的－亚基发生P化，同时，Ca＋＋结合于其δ亚基，双重作用，使得糖原磷酸化酶激酶具有完全的催化活性，促使糖原磷酸化酶b发生P化，成为有活性的糖原磷酸化酶a，促进糖原分解。糖原磷酸化酶激酶与糖原磷酸化酶的激活胰高血糖素无活磷酸化酶激酶高活磷酸化酶激酶活性糖原磷酸化酶a无活糖原磷酸化酶b部分活化部分活化共价修饰别构激活磷酸化酶a:有-P,更趋于R状态,高活性磷酸化酶b:无-P,更趋于T状态,无活性糖原磷酸化酶的共价修饰调节与构象改变R:松弛状态T:紧张状态R态与T态的平衡酶a酶b活性中心当细胞能荷低时，AMP浓度升高，结合于磷酸化酶b的AMP结合位点，导致酶构象由无活性的T状态改变为高活性的R状态，促进糖原磷酸解发生，增加血糖供应，促进糖酵解和氧化产能；ATP则相反。糖原磷酸化酶b的别构调节I——活性——失活核苷酸结合位点当机体营养充沛，代谢正常，细胞中葡萄糖浓度高时，葡萄糖结合于磷酸化酶a的G结合位点，导致其构象从有活性的R状态改变为无活性的T状态，因而，阻断糖原的分解。磷酸化酶活性的别构调节IIG结合位点——失活——活性2.3糖原分支处葡糖基的水解糖原脱支酶(糖苷键水解)糖原脱支酶：糖基转移酶活性糖原脱支酶：a-1,6糖苷酶活性G-1-P～90％H2OPPPP正常生理糖原降解：P糖原磷酸化酶～10％G-1-P由磷酸葡萄糖变位酶催化，经过G-1,6-2P中间产物生成G-6-P（此酶需少量G-1,6-2P发挥充分活性），即可进入糖酵解。某些组织中G-6-P由葡萄糖-6-磷酸酶催化水解生成葡萄糖（肝、肾及肠细胞含此酶，脑、肌肉细胞中无此酶），进入血液运送全身。葡萄糖-6-磷酸酶存在光面内质网,它的作用共需5种蛋白。2.4G-1-P的转化磷酸葡萄糖变位酶中的Ser残基结合有磷酸基团与底物中的磷酸基团发生交换，而使得磷酸基发生了分子内的转移。磷酸葡萄糖变位酶催化机制回顾：与糖酵解中的哪步反应机制相似？钙结合稳定蛋白G-6-P的水解与生物转运内质网细胞液细胞膜外血液循环葡萄糖-6-磷酸酶仅存在于肝、肾及肠细胞(联系糖异生途径）G体内转运形式局限于胞内p182扩展学习：蛋白质的合成与转运（细胞生物学）滑面内质网粗面内质网转运泡高尔基体顺面分泌泡（定向转运成熟蛋白质）接受内质网转运的待加工蛋白蛋白质在内质网中合成和初步加工，然后进入高尔基体进一步加工，最后定向运送到特定场所，执行其生理功能。内质网3糖原的生物合成糖原合成需要糖原引物：以细胞内生糖原蛋白为核心，在其上含4个以上葡萄糖残基作为糖原合成的引物。新的葡糖残基以半缩醛羟基（C1－OH)与聚糖链非还原端末位糖残基的C4-OH脱水缩合，形成新的－1，4糖苷键，逐步聚合加长聚糖链。细胞中糖原颗粒数目取决于糖原引物数目糖原合成时葡萄糖的供体是UDPG（高能活化态）3.1参与糖原合成的酶类①UDPG焦磷酸化酶葡萄糖单位的活化②糖原合酶（糖基聚合酶）聚糖直链的延长③糖原分支酶寡糖链转移分支的形成酶名称酶催化反应3.2葡萄糖的活化反应G-6-PPG-1-PPUDPG焦磷酸化酶UDPG化学结构（高能化合物）葡萄糖尿苷二磷酸（活化共消耗2ATP）UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（可逆）尿嘧啶核糖葡萄糖葡萄糖核糖尿嘧啶UDPG葡萄糖参与糖原合成的活化形式焦磷酸的迅速水解，使反应在细胞内不可逆。G-1-P糖原合酶：只能催化UDPG加在已有4个（或4个以上）糖基聚合的寡糖链非还原末端。生糖原蛋白：具有自动催化作用，催化8个G单位－14成键聚合，形成糖原核心。细胞内糖原颗粒数目取决于生糖原蛋白分子数目。糖原合酶必需与生糖原蛋白紧密结合才能有效发挥活性；一旦脱离生糖原蛋白，丧失催化糖单位聚合功能。3.3糖原合酶及其催化的反应3.3.1生糖原蛋白生糖原蛋白是具有自我催化功能的酶，以同二聚体的形式存在，彼此催化另一亚基中的Tyr残基中的羟基与G相连，UDPG作为G供体，聚合8个G后，由糖原合酶催化后续G单位聚合生糖原蛋白引物的形成脱水糖基加长延伸糖原合酶合成方向U非还原末端3.3.2糖原合酶催化的反应41糖原糖原GnGn＋1还原端非还原端G-6-P＋ATP＋糖原Gn＋H2O糖原Gn＋1＋ADP＋2Pi总反应：3.3.3糖原合酶上的电荷分布磷酸化前的电荷分布；磷酸化后的电荷分布肽链上存在多个磷酸化位点P化残基集中在酶肽链的N－末端和C－末端完全磷酸化后，C-末端的静电荷极大提高磷酸化的糖原合酶失去催化活性糖原合酶肽链3.3.4糖原合酶的调控高活性无活性激素信号的磷酸化级联放大机制同前。糖原合酶有多个P化位点，逐步P化，活性降低，致完全失活。P肾上腺素＋受体腺苷环化酶cAMPATP蛋白激酶A腺苷环化酶蛋白激酶A糖原合酶aPPPP1糖原合酶bPP糖原合酶糖原磷酸化酶两种酶的空间结构高度相似，磷酸化修饰效应相反。糖原分支酶3.4糖原分支酶与1，6糖苷键形成寡糖链转移糖原分支酶断开α1，4-糖苷键(自由能-15.5kJ/mol)形成α1，6-糖苷键(自由能-7.1kJ/mol)转移6－7个葡萄糖短链糖原多分支：增加可溶性、增加非还原性末端，大大提高糖原分