PCR试题要点

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【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。1.以下哪种物质在PCR反应中不需要()A.TaqDNA聚合酶B.dNTPsC.Mg2+D.RNA酶E.合适pH缓冲液2.以下哪种酶可耐高温()A.TaqDNA聚合酶B.HindⅢC.T4连接酶D.RNA酶E.Klenow片段3.PCR反应正确过程应为()A.退火→变性→延伸B.变性→退火→延伸C.退火→延伸→变性D.变性→延伸→退火E.延伸→变性→退火4.PCR技术的本质是()A.核酸杂交技术B.核酸重组技术C.核酸扩增技术D.核酸变性技术E.核酸连接技术5.TaqDNA聚合酶酶促反应最适温度为()A.37℃B.50℃~55℃C.70℃~75℃D.80℃~85℃E.94℃~95℃6.温度均一性较好的PCR仪为()A.水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪B.半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪C.压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪D.压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪E.水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪7.一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为()A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光PCR仪E.实时PCR仪8.能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为()A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光PCR仪E.实时PCR仪9.SteadySlope技术是下列哪一家公司的专利技术()A.eppendorf公司B.MJ公司C.Cepheid公司D.Roche公司E.ABI公司10.应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪()A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光PCR仪E.实时PCR仪11.在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数()A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光实时PCR仪E.定性PCR仪12.以下是经过PCR扩增后得到的Ct值,哪个样品的DNA原始拷贝数最多()A.样品A,Ct=20B.样品A,Ct=22C.样品A,Ct=24D.样品A,Ct=26E.样品A,Ct=2813.以空气为加热介质的PCR仪是()A.金属板式实时定量PCR仪B.96孔板式实时定量PCR仪C.离心式实时定量PCR仪D.各孔独立控温的定量PCR仪E.荧光实时定量PCR仪14.以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子()A.ABI7500B.ABI7900C.LightCycleTMD.SmartCyclerⅡE.RG300015.以下哪个PCR扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器()A.ABI7500B.ABI7900C.LightCycleTMD.SmartCyclerⅡE.RG300016.可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的是()A.ABI7500B.ABI7900C.LightCycleTMD.SmartCyclerⅡE.RG300017.拥有独立智能升降温模块的是()A.ABI7500B.ABI7900C.LightCycleTMD.SmartCyclerⅡE.RG300018.容纳样品量大,无需特殊耗材的是()A.ABI7500B.ABI7900C.LightCycleTMD.SmartCyclerⅡE.RG300019.PCR基因扩增仪最关键的部分是()A.温度控制系统B.荧光检测系统C.软件系统D.热盖E.样品基座20.“位置的边缘效应”是指()A.温度的准确性欠佳B.温度的均一性欠佳C.边缘升降温速度快D.边缘升降温速度慢E.梯度模式和标准模式温度不一致21.PCR扩增仪升降温速度快有很多优点,以下哪一项应除外()A.缩短反应时间B.提高工作效率C.消除位置的边缘效应D.缩短非特异性反应时间E.提高反应特异性22.在梯度模式下得出最佳反应条件,并以此条件在标准模式下单独做,但结果却不如人意,最有可能的原因是()A.样品孔温度与设定温度不一致B.样品孔间的温度有差异C.样品孔位置的边缘效应较高D.升降温速度不够快E.不同模式温度特性有差异23.定量PCR扩增仪的关机次序一般为()A.关软件→关PCR仪→关电脑B.关软件→关电脑→关PCR仪C.关PCR仪→关软件→关电脑D.关PCR仪→关电脑→关软件E.关电脑→关PCR仪→关软件24、PCR技术扩增DNA,需要的条件是()①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥25、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为()A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L26、多重PCR需要的引物对为()A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物27、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为()A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子28、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增()A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高29、PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋D.CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一30、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:()A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高31、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:()A.PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等C.PCR技术需在体内进行D.PCR技术是利用碱基互补配对的原则32、PCR技术扩增DNA,需要的条件是()①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥33、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A.640B.8100C.600D.864034、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置,M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置,哪份标本最有可能确诊为禽流感()A.MB.NC.QD.W35、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性,于是做了如下检测工作,其中正确的操作步骤及顺序是①降低温度,检测处理后形成的杂合DNA双链区段②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中④在一定的温度条件下,将巨型动物和大象的DNA水浴共热A.②④③B.②④③①C.③④①D.②④①36、PCR的发明人是A.MullisB.牛顿C.KennyD.James37、退火温度一般比引物的熔解温度(Tm)低多少合适A.7℃B.10℃C.5℃D.2℃E.20℃38、引物的最佳浓度为A.0.1-0.5μMB.1-2μMC.5-10μMD.100μME.200μM39、专门用于制备单链DNA的PCR技术是A、对称PCRB、反向PCRC、RT-PCRD、不对称PCRE、嵌套PCR40、PCR变性温度一般为A.96℃B.85℃C.72℃D.55℃E.100℃41、pre-mRNA内含子的5'-末端一般为()A、AUB、GUC、AGD、CGE、AC42、在大肠杆菌的DNA损伤修复时,对于填补缺口可能最重要的酶是A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、RNA聚合梅E、以上都不是43、可用于扩增未知序列的PCR方法是()A、对称PCRB、反向PCRC、RT-PCRD、不对称PCRE、嵌套PCR44、在聚合酶链反应(PCR)中最常用的DNA聚合酶是A.T4DNA连接酶B.T7DNA聚合酶C.TaqDNA聚合酶D.E.coliDNA聚合酶IE.E.coliDNA聚合酶II45、下列关于PCR引物设计的说法错误的是()A.设计引物时应考虑使3’端引物和5’端引物具有相似的Tm值B.每条引物自身不应有稳定的发夹结构C.上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构D.引物的5’和3’端必须和模板严格配对结合E.引物与非特异扩增区的序列无同源性46、TaqDNA聚合酶可以不依赖模板在dsDNA的3’末端加上一个碱基为()A.GB.AC.TD.CE.I【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。1.PCR技术每一个循环均包含以下哪些环节()A.酶切B.变性C.退火D.延伸E.连接2.以下哪些酶可用于PCR反应()A.KlenowB.HindⅢC.TaqDNA聚合酶D.RNaseE.DNase3.目前常用的PCR基因扩增仪控温方式有()A.水浴锅控温B.压缩机控温C.半导体控温D.离心式空气控温E.金属控温4.普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外,还包括()A.水浴式PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.变温金属块式PCR仪E.变温气流式PCR仪5.按变温方式不同,PCR基因扩增仪可分为()A.水浴式PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.变温金属块式PCR仪E.变温气流式PCR仪6.目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别()A.金属板式实时定量PCR仪B.梯度定量PCR仪C.原位定量PCR仪D.离心式实时定量PCR仪E.各孔独立控温的定量PCR仪7.下列产品哪些属于金属板式实时定量PCR仪()A.LightCycleTM荧光定量PCR仪B.ABI7500荧光定量PCR仪C.MJ公司Chromo4荧光定量PCR仪D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪E.Rotor-Gene3000荧光定量PCR仪8.下列产品哪些属于离心式实时定量PCR仪()A.LightCycleTM荧光定量PCR仪B.ABI7500荧光定量PCR仪C.MJ公司Chromo4荧光定量PCR仪D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪E.Rotor-Gene3000荧光定量PCR仪9.PCR基因扩增仪的温度控制主要是指()A.温度的准确性控制B.温度的均一性控制C.退火温度控制D.升降温速度控制E.延伸温度控制10.荧光定量PCR仪的荧光检测系统主要包括()A.发光二极管B.激发光源C.检测器D.光度计E.光电倍增管11.荧光定量PCR仪的荧光强度减弱或不稳定,可能的原因有()A.滤光片发霉B.光源损耗C.半导体模块故障D.荧光染料污染E.光电倍增管灵敏度下降12、PCR实验室应具备至少几个区域A.试剂准备区B.标本制备区C.扩增区D.污染处理区E.观察区13、PCR时,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:A.使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;B.避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,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