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第二节基因工程的原理和技术1、获取目的基因。2、形成重组DNA分子。3、将重组DNA导入受体细胞。4、筛选含有目的基因的受体细胞。5、目的基因的表达。爱情五步曲：1、找准目标2、约会牵手3、进入殿堂4、神父作证5、爱情结晶基因工程的一般操作步骤一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因CaCl2处理受体细胞（大肠杆菌），增大细胞壁的通透性。•显微注射法（将基因表达载体提纯，用显微仪注射到受精卵中）•农杆菌转化法•农杆菌转化法•基因枪法•花粉管通道法四环素抗性基因氨苄青霉素抗性基因如何筛选含有胰岛素原基因的大肠杆菌呢？ABCD把每个大肠杆菌分别放在有氨苄青霉素的培养基中生长，看能否长出菌落，再作出判断。无表达产物无表达产物有表达产物无表达产物1）以下说法正确的是（）A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来C练习2）有关基因工程的叙述中，错误的是（）A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶A练习3）有关基因工程的叙述正确的是（）A、限制酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料D练习4）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）A、人工合成目的基因B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达C练习人工合成基因的方法反转录法根据已知的氨基酸序列合成DNA甲硫氨酸——苯丙氨酸——色氨酸蛋白质：信使RNAAUGUUUUGG或AUGUUCUGG基因或DNATACAAAACCATGTTTTGGTACAAAACCATGTTTTGG或DNA合成仪DNA合成仪能自动进行化学合成的仪器，能按设计自动连接脱氧核苷酸的设备。人工合成基因的方法反转录法根据已知的氨基酸序列合成DNA甲硫氨酸——苯丙氨酸——色氨酸蛋白质：信使RNAAUGUUUUGG或AUGUUCUGG基因或DNATACAAAACCATGTTTTGGTACAAAACCATGTTTTGG或基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因文库的构建：关于基因工程的图片：我国生产的部分基因工程疫苗和药物转生长激素鲤鱼转基因超级小鼠我国生产的部分基因工程疫苗和药物对照抗虫转基因抗虫棉花和普通棉花果实耐贮藏，在25℃温度下，可贮藏40－50天，较对照延长贮藏期20－30天。转基因耐贮藏番茄和普通番茄转基因抗除草剂玉米施用除草剂，杂草被杀死，转基因抗除草剂的玉米不受影响（右侧为未施用除草剂的对照）