主讲人:中华医学会临床微生物学组(1~4届)全国委员《中华医学检验全书》主编北华大学临床微生物学教授海南医学院客座教授李影林2010年10月一、掌握流感嗜血杆菌的生物学性状、致病性和卫星现象。二、熟悉免疫性和防治原则。三、了解流感嗜血杆菌的微生物学检查法和其他嗜血杆菌嗜血杆菌属(Haemophilus)•根据《Bergy’s鉴定细菌学手册》第九版(1994)记载,嗜血杆菌属列为群5中的亚群3,其中和临床有关的有9个种即:•流感嗜血杆菌(H.influenzae)•副流感嗜血杆菌(H.parainfluenzae)•溶血嗜血杆菌(H.haemolyticus)•副溶血嗜血杆菌(H.parahemolyticus)•杜克嗜血杆菌(H.ducreyi)•埃及嗜血杆菌(H.aegyptius)•嗜沫嗜血杆菌(H.aphrophilus)•副嗜沫嗜血杆菌(H.paraphrophilus)•迟缓嗜血杆菌(H.segnis)•代表菌:流感嗜血杆菌(H.influenzae)形态与染色1.初分离G-短小杆菌;2.陈旧培养基或恢复其病灶中,具有多形性(球杆、长杆或丝状);3.无芽胞,无鞭毛,不能运动;4.多数菌株有荚膜,毒力较强。流感嗜血杆菌(H.influenzae)流感嗜血杆菌镜下形态(革兰染色)培养特性1.培养较难:必须借助于血液中的X、V两种辅助因子才能合成完整的酶,参预细菌的代谢过程。2.卫星现象(satellitephenomenon):当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培养时,由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子,并弥散到培养基里,可促进流感嗜血杆菌生长,故在金黄色葡萄球菌菌落周围菌落较大,而离金黄葡萄球菌越远者则流感嗜血杆菌的菌落越小,此现象称为卫星现象。流感嗜血杆菌卫星现象(BAP)satellitephenomenon(3)巧克力色琼脂:经35℃18~24h,培养形成微小(0.5~0.8mm)无色透明,不溶血,呈露滴样小菌落。流感嗜血杆菌菌落特征(巧克力琼脂)。生化反应:流感嗜血杆菌能分解葡萄糖,不发酵乳糖﹑甘露醇,对半乳糖﹑果糖﹑麦芽糖的发酵不稳定。Ag构造与分型:流感嗜血杆菌的抗原物造与肺炎链球菌相似。对热敏感:56℃30min可杀死抵抗力—弱对干燥敏感对常用消毒剂敏感.致病物质1.侵袭力:荚膜的抗吞噬作用(为本菌的主要毒力因子)2.菌毛:具有黏附和定植于细胞的作用3.内毒素:本菌为脂寡糖(LOS)致病作用尚不清楚4.IgA蛋白酶能水解SIgA,可降低黏膜局部免疫力。所致疾病常继发于流感﹑麻疹百日咳﹑结核病等临床表现慢性支气管炎鼻窦炎中耳炎免疫性体液免疫为主微生物学检查法•1.标本的采集:根据感染部位的不同可分别采取血液、脑脊液、鼻咽分泌物、痰液、脓汁等标本。注意事项。•2.检验方法:(1)标本直接涂片镜检;对化脓性脑膜炎,关节炎,下呼吸道感染有快速诊断价值.(2)分离培养(用巧克力色琼脂)(3)乳胶凝集试验,免疫荧光及荚膜肿胀试验检测荚膜抗原有助于快速诊断3.鉴定依据:(1)形态染色特点(2)在巧克力色琼脂平板上的菌落特点(3)卫星现象。(4)X、V因子需求试验•嗜血杆菌因子发酵XV葡萄糖蔗糖乳糖甘露糖木糖触酶CO2生长ONPG流感嗜血杆菌a++-+---D+--溶血嗜血杆菌++++---D+--杜克雷嗜血杆菌+----------副流感嗜血杆菌-+-++-+-DDD副溶血嗜血杆菌-++++---+--迟缓嗜血杆菌-+-WW---D-D副嗜沫嗜血杆菌-+-++++D-++嗜沫嗜血杆菌---++++--++(5)生化反应(种间鉴定)防治原则1.预防接种:b型流感嗜血杆菌荚膜多糖疫苗2.治疗:可选用广谱抗生素或磺胺类药物