生化检测基本常识

生化检测常识生生化化检检测测常常识识生化检测常识-1-目录第一章生化检测基本常识1.1标本的获得………………………………………………（2）第二章常规生化检测项目简介2.1生化项目的临床意义……………………………………（2）第三章生化仪参数测量原理3.1自动生化仪的分类……………………………………………（3）3.2分立式生化仪结构……………………………………………（5）3.3生化检验的原理和方法………………………………………（6）3.4生化分析仪测定方法的分类及应用度的计算…………………（9）3.5.测定值计算方程……………………………………………（10）3.6定标参数和浓度的计算………………………………………（17）第四章几个重要概念5．1试剂空白………………………………………………………（21）5．2样本空白………………………………………………………（21）5．3水空白………………………………………………………（21）5．4样本…………………………………………………………（21）5．5质控物质………………………………………………………（21）5．6底物控制………………………………………………………（21）生化检测常识-2-第一章生化检测基本常识生化检测是医院检验科（或化验室）常用的检测手段，通常以人的血清为标本，通过测量血清中各生化成份的含量，为临床诊断提供依据。1.1标本的获得一般要求病人空腹时采静脉血（全血）。全血经过离心机离心，分层为血清和血细胞，正常情况下，上层颜色浅且透明（血清），下层颜色深且不透明（血细胞）。有的血清较为特殊，或分层不明显（融血），或血清不透明（脂血，呈牛奶状）。第二章常规生化检测项目简介2.1生化项目的临床意义丙氨酸氨基转移酶（ALT）：又称为谷丙转氨酶（GPT）是衡量肝功能的重要指标，许多低端医疗机构在做体检时仅测此一项生化项目。正常人一般在40U/L以内。干粉试剂复溶后为单试剂，液体试剂一般为双试剂，应用动力学法可计算结果。蛋白：通常测白蛋白（ALB）和总蛋白（TP），终点法。一般用单试剂，有的TP试剂为双试剂，可用两点终点法测。蛋白质是血清的主要成份，大部份由肝细胞合成。通过蛋白的测定可以协助某些疾病的诊断。血糖：血液中的葡萄糖简称血糖（GLU）。常用于糖尿病的诊断。正常人空腹血糖一般为3.9～6.1mmol/L。市场上单、双试剂的商品化试剂盒都有，可用终点法（单试剂）或两点终点法测量（双试剂）。门冬氨酸氨基转移酶（AST）：又称为谷草转氨酶（GOT），主要用于心肌和肝胆疾病及骨骼肌病的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在40U/L以内。同ALT一样，无论单、双试剂，用动力学法可计算结果。碱性磷酸酶（ALP）：主要用于肝胆疾病及骨骼病的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在240U/L以内。用动力学法计算结果。γ-谷氨酰转移酶（GGT）：主要用于肝胆疾病诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在50U/L以内。用动力学法计算结果。胆红素（BiL）：胆红素的测定，能准确反映黄疸的程度，判断黄疸的类型。一般测量总胆红素（TBil）和直接胆红素（DBil）。甘油三酯（TG）：其含量测定是血脂分析的重要内容之一。总胆固醇（CHOL）：是游离胆固醇和胆固醇酯的总称，其测定对高脂蛋白血症和冠心病的诊断及发病机理的研究有一定意义。高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：主要在肝脏中合成，是血清中颗粒数最多的脂蛋白。其含量是冠心病诊断的重要依据之一。肌酐（CREA）：是肌酸代谢的最终产物，由肾脏排出。是肾功能的重要指标之一。尿素（Urea）：是蛋白质分解代谢的终产物。血尿素测定是肾功能的最敏感指标。载脂蛋白A1(APOA1):是高密度脂蛋白的主要组成成分，临床上主要用于脑血管病风险度的估计。载脂蛋白B(APOB):是低密度脂蛋白的主要组成成分，临床上主要用于冠心病的风险度的估计。肌酸激酶（CK）：肌酸激酶通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。可用于早期诊断急性心肌梗，常见肌病(如进行性肌营养不良发作期、病毒性心肌炎、多发性肌炎、挤压综合征等严重肌肉损伤)及脑血管疾病的诊断。生化检测常识-3-α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）：与肌酸激酶相同，用于诊断心肌梗死。α-淀粉酶（AMY）：在临床应用方面，α-淀粉酶活力升高与急性胰腺炎、胰腺管道阻塞、腹内疾病、流行性腮腺炎及细菌性腮腺炎。钙、氯、铁、钾、钠、镁、磷：这7项都属于离子组合，用于诊断人体中离子的含量。常用检测项目表序号项目名称缩写组合参考值1.白蛋白ALB肝功能35～55g/L2.总蛋白TP60～80g/L3.碱性磷酸酶ALP15～112U/L4.门冬氨酸氨基转移酶AST（GOT）8～37U/L5.丙氨酸氨基转移酶ALT（GPT）0～65U/L6.γ-谷氨酰转移酶GGT0～50U/L7.直接胆红素DB0～6umol/L8.总胆红素TB0～18umol/L9.肌酐CREA肾功能53～115μmol/L10.尿酸UA210～430umol/L11.尿素UREA2.5～6.4mmol/L12.胆固醇CHOL血脂3.6～6.5mmol/L13.甘油三酯TG0.45～1.81mmol/L14.高密度脂蛋白HDL0.9～1.68mmol/L15.低密度脂蛋白LDL2.7～3.1mmol/L16.载脂蛋白A1APOA11.0～1.6g/L17.载脂蛋白BAPOB0.6～1.1g/L18.脂蛋白Lp（a）0～30mg/dL19.肌酸激酶CK心肌酶类21～190U/L20.肌酸激酶同工酶CK-MB0～25U/L21.α-羟丁酸脱氢酶HBDH70～180U/L22.乳酸脱氢酶LDH114～240U/L23.钙Ca离子2.0～2.6mmol/L24.氯Cl95～105mmol/L25.铁Fe9～30μmol/L26.钾K3.5～5.5mmol/L27.镁Mg0.6～1.1mmol/L28.钠Na135～145mmol/L29.磷P0.8～1.6mmol/L30.α-淀粉酶AMY其它100～220U/L31.葡萄糖GLU3.9～5.8mmol/L第三章生化仪参数测量原理生化检测常识-4-3.1自动生化仪的分类3.1.1连续流动式自动化分析仪连续流动式自动化分析仪也叫管道式分析仪，其特点是测定项目相同的各待测样本与试剂混合后的化学反应，是在同一管道中经流动过程完成的。这类仪器一般可分为空气分段系统式和非分段系统式。所谓空气分段系统是指在吸入管道的每一个样品、试剂以及混合后的反应液之间，均由一小段空气间隔开；而非分段系统是靠试剂空白或缓冲液来间隔每个样品的反应液。在管道式分析仪中，以空气分段系统式最多，且较典型，整套仪器是由样品盘、比例泵、混合管、透析器、恒温器、比色计和记录器几个部件所组成。管道内的圆圈表示气泡，气泡可将样品及试剂分隔为许多液柱，并起一定的搅拌作用。但气泡影响比色，必须在比色前除去。将几个单通道管道式分析仪结合起来，对一个样品同时测定几个项目。著名的有12通道分析仪，命名为顺序多项自动分析仪（sequentialmultipleautoanalyzer）简称SMA12/60。同时发展为SMAC，C为计算机（computer）的缩写。这类大型分析仪至今仍有使用者。它对每个样品可同时分析12个项目，每小时可分析60个样品。后来发现不加入空气泡，更有利于结果的检测，发展为流动注射分析法（flowinjectionanalysis）。试剂的流动仍用比例泵驱动，样品用转动阀加入液流，反应后比色检测。3.1.2离心式生化分析仪离心式分析仪是1969年以后发展起来的一种分析仪，由Anderson设计，其特点是化学反应器装在离心机的转子位置，该圆形反应器称为转头，先将样品和试剂分别置与转头内，当离心机开动后，圆盘内的样品和试剂受离心力的作用而相互混合发生反应，最后流入圆盘外圈的比色槽内，通过比色计进行检测。离心式分析仪主要由两部分组成，一为加样部分，二为分析部分。加样部分包括样品盘、试剂盘、吸样臂（或管）、试剂臂（加液器）和电子控制部分（键盘和显示器等）。加样时转头置于加样部分。加样完毕后将转头移至离心机上。分析部分，除安装转头的离心机外，还有温控和光学检测系统，并有微机信息处理和显示系统。1．3分立式生化分析仪所谓分立式，是指按手工操作的方式编排程序，并以有节奏的机械操作代替手工，各环节用传送带连接起来，按顺序依次操作。分立式分析仪与管道式分析仪在结构上的主要区别为：前者各个样品和试剂在各自的试管中起反应，而后者是在同一管道中起反应；前者采用由采样器和加生化检测常识-5-液器组成的稀释器来取样和加试剂，而不用比例泵；前者一般没有透析器，如要除蛋白质等干扰，需另行处理。恒温器必须能容纳需保温的试管和试管架，所以比管道式分析仪的体积要大。除此以外，其它部件与管道式的基本相似。分立式分析仪的基本结构如下图所示。Depout公司还推出一种袋式分析仪，即试管变为塑料袋，反应在袋内进行，也以袋作比色杯。这种袋只能一次性使用。3.1.3干片式分析仪干片式分析仪是80年代问世的。首先Eastmankodak公司以其精湛的化学工艺造出了测定血清中血糖、尿素、蛋白质、胆固醇等的干式试剂片。当加上定量的血清后，在干片的前面产生颜色反应，用反射光度计检测即可进行定量。这类方法完全革除了液体试剂，故称干化学法。BoehringerMannheim公司推出了用全血的干征试剂。即将血细胞排除于滤膜之外，而血浆与试剂发生反应后显色检测。3.1.4模块式自动化系列7600系列全自动生化分析仪是日立公司于1998年开发出来的系列分析仪。它是由各种不同功能的模块组合而成，功能模块包括有样本投入部、电解质测定的ISE模块、常规实验项目测定的D模块、特殊实验项目测定的P模块、复查样本缓冲部和样本收纳部。根据D模块和P模块数目组合成不同型号的分析仪。生化检测常识-6-模块组合式实验室自动化系统包括：样品前处理系统，样品输送系统和样品后处理系统（生化分析，电解质分析，血液分析等）。样品前处理系统由能独立工作，不同功能的各模块以同一标准来连接，通过计算机控制运行。由样品投入部，离心分离部，开栓部，在线分注部，非在线分注部，贴条码部，盖栓部，样品分注收存部，标本接收部等模块构成前处理系统，每一模块既是系统的一部分，又是独立的单元，可根据不同需要选择使用，具有灵活性和扩展性。后处理系统有电解质分析系统，生化分析系统以及血液分析系统等。1．6全实验室自动化分析系统从检验标本处理开始，即标本的识别、传输、处理（分离血清等）、分注、分类（按项目分类）、检测和收费的自动化流水作业，到分析后自动储存标本，检验结果的自动分析、报告与传送，自动提示异常值或危险值，申请检验医师随时查询检验结果的全过程实现自动化、网络化。3.2分立式生化仪结构全自动生化分析仪一般由以下部分构成：探针系统、搅拌和冲洗系统、恒温系统、反应盘、光路系统构成。2．1探针系统液面检测技术：通过检测阻抗或电容、电流的变化，感知到空气和液面，可保证探针的感应装置至液面时会自动停止下降，即可增加速度也可减少污染，防止堵塞。2．2搅拌和冲洗系统搅拌系统是让样品和试剂混合后迅速分布均匀，保障测试正常进行。常用的搅拌方法为冲入空气、搅拌、振荡等，但是都容易产生气泡和外溢等问题。目前最好的方法是螺旋式搅拌棒附着特富龙涂层，一方面减少气泡，另一方面减少携带和污染。生化检测常识-7-清洗系统一般包括试剂针的内外臂清洗、样本针的内外臂清洗、比色杯的清洗。2．3恒温系统全自动生化仪一般都设有30和37度两种温度。目前常见的有水浴、空气浴，最新的是恒温液循环加温方式。水浴的优点是温度均匀、稳定；缺点是升温缓慢，开机预热时间长，因水质化（微生物、矿物质沉积）影响测定，因此要定期换水和比色杯。空气浴的优点是升温迅速，无需保养；缺点是温度易受外界环境影