2015-特殊染色技术(学)资料

特殊染色技术特殊染色简介特殊染色-----弹力纤维染色Gomori醛品红染色法----弹力纤维（实验操作）常规染色（普通染色）在组织制片技术中，苏木精和伊红染色(简称HE染色)，又称为常规染色。为了显示组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的病变、异常物质、病原体等，需要选用相应的染色方法进行染色以显示这些目的成分，这是HE染色不能显示的，故称特殊染色，简称特染。特殊染色常规染色(HE)特殊染色染料苏木精伊红各种染料目产物胞核胞浆正常组织成分及病变、异常物、病原菌颜色蓝色红色红、黄、蓝、绿、紫等多种颜色方法单一种类多复杂常用的特殊杂色方法染色方法显示的目的物VG–VanGieson（苦味酸酸性复红法）---------胶原纤维、平滑肌Masson三色染色法--------------------------------胶原纤维、平滑肌Gomori银染色法------------------------------------网状纤维Gomori醛品红染色法-------------------------------弹力纤维、肥大细胞磷钨酸苏木素（PTAH）----------------------------横纹肌过碘酸-Schiff反应（PAS）-----------------------糖原、中性粘液、霉菌阿利辛蓝-过碘酸-Schiff反应（AB-PAS）-----------酸性粘液与中性粘液苏丹III、油红0-------------------------------------脂类普鲁士蓝反应---------------------------------------含铁血黄素Gram甲紫染色法------------------------------------纤维素Ziehl-Neeleen抗酸杆菌法---------------------------结核杆菌麻风杆菌刚果红法----------------------------------------------淀粉染色原理化学反应在组织细胞中，酸性物质部分能与溶液中的阳离子结合，碱性物质部分能与溶液中的阴离子结合。物理作用毛细管作用及渗透作用吸收或溶液作用吸附作用特殊染色的意义观察常规HE染色切片中不能区别的病变。例如：VG染色可区别胶原纤维和平滑肌。苏丹染色可区别胞浆内脂肪变性与水样变性。特殊染色的命名发明者---VanGieson染色（VG染色）染色剂---油红O染色、苏丹IV染色目的物---网状纤维染色，肥大细胞染色混合命名---过碘酸雪夫氏反应（试剂+人名）1、特染对目的物的选择是相对的有时一种方法可以显示多种目的物例如PAS染色可显示糖原、中性粘液、霉菌等醛品红法可显示弹力纤维、肥大细胞等特染的特点2、有时一种目的物可以用多种方法显示如：弹力纤维染色可以用维多利亚蓝染色、醛品红法、地衣红法等3、但有的特染也具有特异性如：油红O对脂质的染色呈阳性特染的特点选择的特染试剂品种少配制简单操作简便效果好弹力纤维染色弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。应用常用于显示皮肤组织增殖和变化；呼吸道的支气管扩张，老年性肺气肿的纤维断裂、变性或萎缩；心血管的心内膜弹性纤维异常增殖症和高血压小动脉的异常增生，动脉粥样硬化弹性纤维的崩解断裂与消失；肾脏组织和肿瘤组织中的纤维病变，各种实验动物组织中的血管壁纤维损害或增生情况。常用的特殊染色方法Gomori醛品红染色法醛品红法间苯二酚品红法地衣红法Gomori醛品红染色法---弹力纤维染色材料：动脉组织固定于是10%缓冲甲醛溶液常规脱水、石蜡包埋切片厚度4um。试剂盒试剂A：Lugol碘液（8ml）；试剂B：硫代硫酸钠（8ml）；试剂C：醛品红染液（8ml）；试剂D：橙黄G染液（8ml）；染色步骤：1、石蜡切片脱蜡至水。2、滴加一滴（100ul）Lugol碘液（试剂A）孵育5分钟，稍水洗。3、滴加一滴（100ul）硫代硫酸钠（试剂B）处理5分钟。流水冲洗5分钟，70%酒精稍洗。4、滴加一滴（100ul）醛品红染液（试剂C）染色3～10分钟，70%酒精浸洗2次（每次30秒，至切片不再脱色为止）稍水洗。5、滴加一滴（100ul）橙黄G染液（试剂D）染色1秒（依背景深浅而定），稍水洗。6、95%酒精、无水酒精脱水，透明、封固。注：（龚志锦，詹洲。病理组织制片和染色技术，上海科学技术出版社。1994年10月第1版。P83～84）醛品红染液对特殊的蛋白质及含硫酸根的粘多糖具有很强的亲合力。它和弹力纤维结合得很好。此外，对肥大细胞颗粒，脂褐素，肝表面抗原、脑垂体的嗜碱细胞等也能有很好的着色效果。弹力纤维呈深紫色底色为不同程度的黄色肥大细胞呈紫蓝色结果注意事项1、不同的固定液或固定时间长短不一的组织，染色效果可有差异，可根据镜下控制来掌握染色或分化时间。2、染色液必须充分覆盖组织。3、橙黄G染液要淡染，若过染则会掩盖弹力纤维，对比度不强。4、每次染色宜用阳性片作对照。病理实验技术学习相关的网站1、中华病理技术网2、联合病理网【AllPath】3、病理学园地4、病理之家5、丁香园6、中国病理学网7、华夏病理1、梁英杰，凌启波,张威编著，临床病理学技术，人民卫生出版社。2011年12月第1版。2、龚志锦，詹洲。病理组织制片和染色技术，上海科学技术出版社。1994年10月第1版。参考文献